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通过基因打靶和随后的单链退火介导的标记基因切除，在植物中对 miRNA 靶位进行精确的基因组编辑
基因打靶 (GT) 能够使用供体 DNA 作为模板进行精确的基因组修饰（例如，引入碱基替换）。结合用于选择 GT 细胞的选择标记的干净切除，GT 有望成为一种标准的、普遍适用的碱基编辑系统。之前，我们展示了通过 piggyBac 转座子从水稻中 GT 修饰的位点进行标记切除。然而，piggyBac 介导的标记切除的局限性在于它只能识别 TTAA 序列。最近，我们提出了一种新颖的通用精确基因组编辑系统，该系统由 GT 和随后的单链退火 (SSA) 介导的标记切除组成，原则上不受靶序列的限制。在本研究中，我们将碱基替换引入了 OsCly1 基因的 microRNA miR172 靶位点，OsCly1 基因是参与闭花授粉开花的大麦 Cleistogamy1 基因的直系同源物。为确保有效的 SSA，GT 载体在选择标记的两端都含有 1.2 kb 的重叠序列。使用带有重叠序列的载体进行正负选择介导的 GT 的频率与使用不带重叠序列的 piggyBac 介导的标记切除载体的频率相当，在 T 0 代中，SSA 介导的标记切除频率计算为 ∼ 40%。这个频率被认为足以产生无标记细胞，尽管它低于使用 piggyBac 介导的标记切除的频率（接近 100%）。到目前为止，使用碱基编辑器和基于 CRISPR/Cas9 的 prime 编辑系统在目标基因的不连续多个碱基中引入精确替换已经相当困难。在这里，利用 GT 和我们的 SSA 介导的标记切除系统，我们成功地在 OsCly1 基因的 miR172 靶位点上不仅实现了单个碱基的精确替换，而且还实现了人工不连续的多个碱基的精确替换。
移动电极阻抗光谱，以精确的电导率测量腐蚀性离子介质
对于此类高级应用，使用高精度的电导率测量单元，能够在广泛的电导率范围内进行测量并且对广泛的腐蚀性离子介质具有抵抗力是有益的。最常见的是，使用了两种类型的电导率传感器：基于电极的传感器和电感传感器。电极传感器适用于低电导率和中等电导率，电导率的精度在2×10-8至0.65 s cm -1的范围内±3％至5％。14，15在通用设备中，由于这些传感器的紧凑设计，尤其是针对更高的电导率，准确性降低了。此外，在反应性介质中，电极结垢可以改变细胞常数，并对测量精度产生负面影响。电感传导率传感器特别适用于苛刻的化学环境，因为只有惰性和耐热材料（例如PEEK和PTFE）与样品接触。但是，这些传感器缺乏电极型对应物的灵敏度，并且需要较大的样品体积。16后者在实验室应用中不利，例如，当空间有限或
使用ECOC-SVM大麦基因组学的历史和未来观点审查朝着精确的CRISPR DNA片段编辑...
©作者2020。由牛津大学出版社出版，代表《分子细胞生物学杂志》，IBCB，SIBS，CAS。这是根据Creative Commons Attribution许可条款（http://creativecommons.org/licenses/4.0/）分发的一篇开放访问文章，该文章允许在任何媒介中不受限制地重复使用，分发和再现，前提是适当地引用了原始工作。
无需仪器的蛋白质微阵列制造以实现精确的...
摘要：蛋白质微阵列已成为药物和生物标志物开发以及诊断等各个领域的一种有吸引力的工具。因此，微阵列格式的多重结合亲和力测量变得至关重要。基于微阵列的蛋白质测定的制备依赖于探针溶液的精确分配，以实现在活性表面上的有效固定。设备成本过高，需要经过培训的人员来操作高复杂性的机器人点样器进行微阵列制造，这对研究人员来说是重大的障碍，尤其是对于资源有限的小型实验室。在这里，我们提出了一种低成本、无需仪器的分配技术，通过该技术，熟悉微量移液的用户可以通过手动创建多重蛋白质测定，与机器人点样测定相比，该测定显示出更好的捕获效率和噪音水平。在本研究中，我们使用干涉反射成像传感器平台，通过分析与抗 α-乳清蛋白抗体相互作用获得的结合动力学，比较了手动和机器人分配 α-乳清蛋白探针点的效率。我们表明，通过微量移液器手动点样制备的蛋白质阵列性能达到甚至超过了最先进的机器人点样器制备的蛋白质阵列的性能。与通过平均 75 个机器人点（对应于相同有效传感器表面积）获得的数据相比，这些无需仪器的蛋白质测定具有更高的结合信号（约 4 倍改善）和结合曲线中约 3 倍更好的信噪比 (SNR)。我们展示了在 24 复用芯片格式中确定抗原抗体结合系数的潜力，测量误差小于 5%。
精确的Cas9基因组编辑在体内与多合一，自我...
与腺相关病毒（AAV）载体是治疗基因组编辑的重要输送平台，但受到货物限制的严格限制，尤其是对于Cas9S等大型效应子。同时传递多个向量可以限制剂量和功效，并增加安全风险。使用紧凑型效应器的使用使Cas9的单-AAV输送具有1-3个指南，用于使用最终连接维修途径的编辑，但是许多精确的编辑可以在体内纠正引起疾病的突变，需要与同源性修复（HDR）模板。在这里，我们描述了一个〜4.8-kb AAV平台，该平台表达NME2CAS9和两个SGRNA以产生分段删除，或一个带有HDR模板的单个SGRNA。我们还检查了向量中的NME2CAS9目标位点的实用性，以进行自我激活。我们证明，这些平台可以有效地治疗小鼠中的两种疾病模型[I型遗传性酪氨酸（HT-I）和粘多糖糖型I型（MPS-I）]。这些结果将使单载体AAV能够实现各种治疗基因组编辑结果。
NSCLC早期的靶向疗法：炒作还是希望？ 使用多... 启动环境测试评估 评论文章基于脑电图的情感识别：最新... 与非... 相比 对主要编辑的特殊性的无偏见... 靶向衰老的治疗药物的进步 编辑创新的能源存储的高级高级材料：综合，表征和应用 使用基于群体的元疗法诊断心律不齐的诊断：比较分析 使用ECOC-SVM 的LSTM网络从静止状态EEG信号中分类非重生脑损伤 大麦基因组学的历史和未来观点 审查朝着精确的CRISPR DNA片段编辑...
摘要：非小细胞肺癌（NSCLC）约占肺癌的85％，其发病率每年增加。在临床实践中引入了几种新的和更有效的分子，这导致了局部先进和转移性NSCLC的生存和生活质量的一致提高。特别是，致癌驱动因素确实改变了NSCLC的治疗算法。在NSCLC仍然可以接受根治性手术的早期，将近25％的患者被诊断出。完全切除的早期阶段的五年生存率仍然令人失望。辅助化疗表现出适度的生存率，具体取决于阶段，但一半以上的患者复发。鉴于这种改善的需求，在过去的几年中，已经在早期NSCLC中评估了不同的靶向疗法，但在未选择的患者中没有生存益处。然而，在转移性环境中，可靠的预测生物标志物鉴定出可靠的预测生物标志物，分子导向研究的设计以及新型有效且毒性较小的剂的可用性在早期NSCLC治疗中为新型时代开辟了道路。在这篇综述中，我们将讨论NSCLC早期有针对性治疗方案的当前景观。
精确的位点特异性和mRNA特异性控制...
Cold Spring Harbor Laboratory Press on February 27, 2025 - Published by rnajournal.cshlp.org Downloaded from Cold Spring Harbor Laboratory Press on February 27, 2025 - Published by rnajournal.cshlp.org Downloaded from Cold Spring Harbor Laboratory Press on February 27, 2025 - Published by rnajournal.cshlp.org Downloaded from Cold Spring Harbor Laboratory Press on February 2025年2月27日 - 由rnajournal.cshlp.org出版于2025年2月27日从冷春港实验室出版社下载 - 由rnajournal.cshlp.org出版于2025年2月27日从冷春港实验室出版社下载 - 由rnajournal.cshlp.org.cshlp.org plocalional出版。
利用主要编辑对果蝇进行精确的基因组工程
（未经同行评审认证）是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此预印本的版权所有者此版本于 2020 年 8 月 5 日发布。；https://doi.org/10.1101/2020.08.05.232348 doi：bioRxiv preprint
Cas9 融合可实现精确的体内编辑
目前的 Cas9 试剂可以高度特异性地靶向基因组位点。然而，当用于敲入时，靶向结果本质上是不精确的，通常会导致非预期的敲除而不是预期的编辑。这将基因组编辑的应用限制在离体方法中，其中可能进行克隆选择。在这里，我们描述了一种使用迭代高通量体外和高产量体内测定的工作流程，以评估和比较 CRISPR 敲入试剂在编辑效率和精度方面的性能。我们测试了 Cas9 和 DNA 供体模板变体的组合，并确定 Cas9-CtIP 与原位线性化供体在细胞系和小鼠脑体内显示出成倍的编辑精度增加。通过迭代此过程，我们生成了新的化合物融合，包括 eRad18-Cas9-CtIP，其性能进一步成倍增加。继续利用该平台开发精确编辑试剂有望在模型生物中直接进行体内敲入，并有望用于未来的靶向基因疗法。
有限的时间前馈脱钩和精确的DC微电网朝向大信号稳定性
摘要 - 这项研究是通过考虑一个新兴的实际问题来开始的，即DC微电网应在喂食电阻载荷和恒定功率载荷（CPLS）时能够具有较大信号稳定性的操作。要更具体，应在存在大量综合可再生能源和CPL，系统内部不确定性，外部干扰，耦合相互作用以及其他不利影响的情况下确保稳定性。从控制的角度来看，我们有意提出了一个通用解决方案，以实现互连系统的确切分散的跟踪控制任务。首先，提出了一种替代的有限时间馈电机制，该机制与反馈统治或递归取消过程基本不同。其次，可以从系统信息中直接构建一个comite控制器，因为它与稳定性分析相脱。提议的设计框架的一个主要优点是它降低了设计的复杂性，因此促进了实际实现。作为直接应用，为自主DC微电网系统构建了一个简单的分散复合控制器。数值模拟和实验比较结果都表明，在各种不同情况下，DC微电网实现了大信号稳定性。