简介 通过分子分析检测和监测兽医病原体是评估风险和减少财务损失的有效工具。动物疾病不仅会造成生产力损失,还会对食品安全构成威胁。因此,对从农场到餐桌的整个食品生产链进行持续评估对于公共健康至关重要。传统的基于培养的方法不太适合检测某些细菌或病毒病原体。相比之下,实时 (RT) PCR 在灵敏度和特异性方面都具有优势,并且可以在快速的周转时间内完成。作为 SAN 集团的一部分,KYLT 开发和生产了广泛的基于 (RT-)qPCR 的检测方法,以简化相关兽医和食品病原体的诊断。ANICON 还提供这些检测作为诊断服务。为了应对有时每天超过 600 个样本的高处理需求,我们开发了一种功能极其强大的自动化解决方案,该解决方案集成了 KYLT 净化器元件设备。在这里,我们介绍了一种全自动解决方案,用于
基因组 DNA 纯化试剂盒是一种简单快速的系统,可从各种来源纯化高质量的基因组 DNA,包括:全血、血清、细胞系、细菌细胞、植物和哺乳动物组织。该试剂盒基于从粗裂解物中进行选择性洗涤剂介导的 DNA 沉淀。整个过程非常快速,仅需 20-25 分钟,通常可从 0.2 mL 血液中得到 2-10 μg 基因组 DNA。
高质量DNA的纯化对于剪切和剪切和标记测定至关重要。与使用自旋柱纯化DNA的许多套件不同,Cutana™快速清理DNA纯化套件采用基于Spri珠的纯化策略。在这种方法中,以特定比率添加了Spri珠,以同时选择靶DNA的大小选择和纯化。更高的珠子:DNA比捕获了不同长度的DNA片段,而较低的比率优先恢复了更长的片段。值得注意的是,这些顺磁珠与8条管兼容,可以在Cutana剪切和运行和切割和标记工作流程中精简积分。
描述Thermo Scientific™First Strand cDNA合成试剂盒是一个完整的系统,用于有效合成mRNA或总RNA模板的第一链cDNA。该试剂盒使用M-Mulv逆转录酶,与AMW逆转录酶相比,RNase H活性较低。酶在37°C下保持活性,适合于9 kb的cDNA合成。套件提供的重组Thermo Scientific™Ribolock™RNase抑制剂可有效保护RNA在高达55°C的温度下免于降解。该套件均配有寡核(DT)18和随机己酯引物。随机六聚体引物与非特异性结合,并用于合成总RNA种群中所有RNA的cDNA。寡(DT)18底漆选择性地向poly(a)RNA的3末端退火,仅从poly(a)尾mRNA中合成cDNA。基因特异性底漆也可以与试剂盒一起使用,以从指定序列中进行质合。与该系统合成的第一链cDNA可以直接用作PCR或实时PCR中的模板。它也是第二链cDNA合成或线性RNA扩增的理想选择。可以将放射性和非放射性标记的核苷酸纳入第一个链cDNA,以用作包括微阵列在内的杂交实验的探针。
纯化被放置在带有高速风扇设置的10m3密封空间内。将不同的污染物喷涂到密封的腔室中。在测试期间控制温度和加湿。结果消除了空气中微生物的自然衰变。两个小时后,使用了六个网格的空气微生物采样器进行测试。
工作流程。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。20制备无细胞样品。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。20选项1:裂解样品(使用PK),然后将CFDNA绑定到珠子上。。。。。。。。21选项2:裂解样品(无PK),然后将CFDNA绑定到珠子上。。。。。。。22用洗涤溶液洗涤。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。22用80%乙醇洗涤两次。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>23洗脱cfDNA。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>。 div>23 div>
图3。水溶液中珠与DNA比对碎片恢复的影响。 为了确定不同的珠与DNA比对DNA片段尺寸选择的影响,将DNA尺寸梯子稀释至总体积为50 µL,并与各种体积的QIASEQ珠子从25 µL(0.5倍)到75 µL(1.5x)孵育。 在室温下DNA结合5分钟后,将管子放在磁性台上,再将溶液清除为止。 接下来,将上清液丢弃,并用200 µl 80%乙醇洗涤两次珠子。 在最终的乙醇洗涤后,除去上清液并将磁珠完全干燥。 将沉淀在6 µL缓冲液EB中洗脱。 在Agilent生物分析仪高灵敏度芯片上分析了等分试样(1 µL)以及未覆盖的尺寸梯子(参考阶梯)。 (a)片段定量。 (b)片段分布的百分比与参考相比。水溶液中珠与DNA比对碎片恢复的影响。为了确定不同的珠与DNA比对DNA片段尺寸选择的影响,将DNA尺寸梯子稀释至总体积为50 µL,并与各种体积的QIASEQ珠子从25 µL(0.5倍)到75 µL(1.5x)孵育。在室温下DNA结合5分钟后,将管子放在磁性台上,再将溶液清除为止。接下来,将上清液丢弃,并用200 µl 80%乙醇洗涤两次珠子。在最终的乙醇洗涤后,除去上清液并将磁珠完全干燥。将沉淀在6 µL缓冲液EB中洗脱。在Agilent生物分析仪高灵敏度芯片上分析了等分试样(1 µL)以及未覆盖的尺寸梯子(参考阶梯)。(a)片段定量。(b)片段分布的百分比与参考相比。
有证据表明,狂犬病的2剂或3剂PVRV(VERORAB)PREP可与3剂批准的HDCV和PCECV狂犬病准备,以获得安全性和免疫原性结果。与HDCV或PCECV Rabies Prep的3剂3剂量相比,狂犬病病毒病毒中和抗体(RVNA)血清转化速率在最后一次狂犬病疫苗准备剂量后的14或180天之间可能几乎没有差异。狂犬病准备接种后≥365天的RVNA血清转化率的证据非常不确定。不可能测量狂犬病疫苗功效的随机对照试验,因此许多证据依赖于免疫原性结果。免疫学“保护相关”可能在某种程度上无法完全预测保护。
NucleOmag®HMWDNA试剂盒设计用于从细胞,组织和植物材料中分离出高分子量DNA。此外,还显示了全血(EDTA),唾液,颊拭子以及细菌和酵母样品的兼容性。该程序基于在适当的缓冲液条件下核酸对顺磁珠的可逆吸附。样品裂解是使用裂解缓冲液HM1或HMB和蛋白酶K进行酶促的。用于将核酸与顺磁珠,结合缓冲液HM2和核瘤®B-珠的结合添加到转移和清除的裂解物中。磁分离后,使用洗涤缓冲液HM3,HM4和70%乙醇洗涤顺磁珠以去除污染物和盐分。使用冲洗缓冲液HM5去除以前的洗涤步骤的残留乙醇。接下来,高度纯化的DNA用洗脱缓冲液HM6洗脱,可直接用于下游应用。可以手动使用NucleOmag®HMWDNA试剂盒,也可以在标准的液体处理仪器和自动磁分离器上自动化。