慢性骨髓性白血病(CML)是一种以BCR-ABL癌基因为特征的髓增生性疾病。尽管用酪氨酸激酶抑制剂(TKI)进行了高度治疗,但约有30%的患者对该治疗产生了抵抗力。要改善外部,需要确定新的治疗目标。在这里,我们探索了酪蛋白激酶2(CK2),作为CML治疗的潜在靶标。以前,我们在未反应tkis imatinib和dasatinib的患者中检测到Hsp90β丝氨酸226的磷酸化增加。该位点被CK2磷酸化,这也与CML对伊马替尼的抗性有关。在目前的工作中,我们建立了六个新型的伊马替尼和dasatinib-耐药的CML细胞系,所有这些细胞系都增加了CK2激活。A CK2抑制剂CX-4945,诱导亲本和抗性细胞系中CML细胞的细胞死亡。在某些情况下,CK2抑制也增强了TKI对细胞代谢活性的影响。在健康供体的正常单核血细胞和BCR-ABL负HL60细胞系中未观察到CK2抑制作用。我们的数据表明,即使在具有不同机制的TKI机制的细胞中,CK2激酶也支持CML细胞的生存能力,因此代表了潜在的治疗靶标。
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帕金森病 (PD) 是一种常见且使人衰弱的神经退行性疾病,其源于多巴胺能神经元的损失,并伴有进行性运动功能障碍。神经胶质细胞衍生的神经营养因子 (GDNF) 在治疗 PD 和其他神经病方面非常有前景。在本研究中,我们应用 CRISPR/Cas9 技术开发了一种基因靶向敲入系统,用于在牛 β-酪蛋白基因位点表达人类 gdnf 基因。构建了 CRISPR/Cas9 表达质粒和 pP40-GN 载体。使用组织外植体法培养和收集牛胎儿成纤维细胞。然后将 pP40-GN 和 CRISPR/Cas9 载体电转染到牛胎儿成纤维细胞中。使用 G418 筛选抗性克隆,同时通过 PCR 分析和 PCR 产物测序鉴定目标克隆。采用耳组织阻断法成功分离培养牛胎儿成纤维细胞,将pP40-GN靶载体和CRISPR/Cas9表达载体共转染牛胎儿成纤维细胞,经7天G418筛选,共获得12个健康、分离良好的细胞克隆,其中5个发生基因打靶事件。本研究为利用基因打靶牛乳腺生物反应器生产人GDNF蛋白奠定了基础,为PD的靶向治疗提供了新的策略。
背景:植物质体酪蛋白水解蛋白酶(Clp)是质体蛋白酶网络的核心部分,由多个亚基组成。许多Clp在植物尤其是作物中的分子功能尚不明确。结果:本研究鉴定出水稻白化致死突变体al3,该突变体产生白化叶片并在幼苗期死亡。分子克隆表明,AL3编码质体酪蛋白水解蛋白酶OsClpR1,与拟南芥ClpR1同源,靶向叶绿体。与野生型相比,al3突变体中的叶绿体结构发育不良。OsClpR1在水稻所有组织中组成性表达,尤其是在幼叶中。OsClpR1突变影响叶绿素生物合成和叶绿体发育相关基因的转录水平。三个叶绿体基因( rpl2 , ndhB , ndhA )的RNA编辑效率在 al3 中显著降低。利用酵母双杂交筛选发现OsClpR1与OsClpP4,OsClpP5,OsClpP2和OsClpS1发生相互作用。
大豆酪蛋白消化物琼脂是一种广泛使用的培养基,它支持多种生物的生长,甚至是奈瑟菌、李斯特菌和布鲁氏菌等苛刻菌的生长。添加血液的培养基提供了完美界定的溶血区,同时由于其含有氯化钠,可防止红细胞溶解。它在医疗行业中经常用于生产抗原、毒素等。它简单且不含抑制剂的成分使其适用于检测食品和其他产品中的抗菌剂。胰蛋白胨大豆琼脂被各种药典推荐作为无菌测试培养基(6、3)。胰蛋白胨大豆琼脂符合 USP(6)的规定,用于微生物限度测试和抗菌防腐剂有效性测试。Gunn 等人(2)使用该培养基来培养苛刻菌,并研究添加 5%v/v 血液后的溶血反应。胰蛋白胨和大豆蛋白胨的组合使该培养基营养丰富,可提供氨基酸和
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