载脂蛋白B mRNA编辑催化多肽(APOBEC)家族指定多种胞苷脱氨酶。在哺乳动物中,至少5个基因编码Apobecs 1,2,3,4,而激活诱导的胞苷脱氨酶(AID)[1,2]。A1酶是第一个被重新认可的酶,并且在特定宿主mRNA的组织特异性编辑中起着至关重要的作用[3],但是尚未确定在病毒基因的诱变中的确认作用。人类已经扩增了APOBEC3(A3)基因座,以产生7个成员:A3A,A3B,A3C,A3D,A3D,A3F,A3G,A3G和A3H。所有APOBEC蛋白似乎与单链RNA或DNA或两者都结合[1,2]。apo-bec酶在细胞学上脱氨酸单链核酸,导致C-TO-U突变。当这些突变发生在重复病毒的减去链上时,结果是病毒和链的g- to-a转变。由于这些过渡通常会导致胡说八道或误导性突变,因此基本病毒基因产物的合成被阻断,传染性颗粒产量下降[1,2]。在反应中,病毒产生多种基因,干扰A3蛋白的功能。通常,这些是蛋白质拮抗剂,包括HIV-1 VIF的众所周知的例子,它充当了E3连接酶诱导某些A3脱氨酸酶的蛋白酶体降解的适配器[4-7]。此示例提供了明确的证据,表明A3基因的功能是干扰病毒复制。A3s在淋巴样和髓样细胞中似乎以较高的量表示[8-10],这表明这些酶是病毒入侵的前线防御者。然而,其他细胞类型(例如乳腺细胞)也表达A3 [11]。由于某些A3被包装到病毒颗粒中,因此,A3S的病毒体掺入为摄入牛奶传播病毒的新生儿提供了额外的概念。尽管逆转录病毒DNA的脱氨基可能是病毒抑制的主要机制,但已经观察到了脱氨基依赖性的APOBEC活性模式[12,13]。由于A3S与包装到病毒体中的单链RNA结合,因此这些脱氨酶为病毒DNA合成提供了路障[13-15]。A3G还与HIV-1反向转纹酶(RT)相互作用,以干扰DNA复制[16]。不同的APOBEC可能已经演变为允许与RT以外的逆转录病毒酶结合。A3酶也已显示可分别抑制含DNA和RNA的病毒,例如人乳头状瘤病毒和冠状病毒[13-15]。APOBEC与其他病毒聚合酶的结合将为阻断各种病毒的复制提供充足的机会。
此预印本的版权持有人(此版本发布于2023年4月26日。; https://doi.org/10.1101/2023.04.25.538294 doi:Biorxiv Preprint
引言角质形成细胞(KC)长期以来一直被认为是转染最困难的细胞类型之一(1,2),但是这种耐药性背后的机制尚不清楚。kc是表皮的主要细胞成分,它充当人体和外部药物(例如细菌和病毒)之间的主要界面。除了对上皮真皮作为物理屏障的关键贡献之外,KC还通过一系列模式受体和分泌各种细胞因子的能力具有非常活跃的免疫作用(3)。原核生物衍生的定期插入短的短质体重复序列(CRISPR)/CAS9技术改变了我们操纵活细胞中特定DNA和RNA序列的能力(4)。CRISPR/CAS9系统依赖于引导RNA(GRNA)来靶向特异性和功能,通过产生焦油的DNA断裂,从而通过各种内源性机制刺激修复。CRISPR技术可用于通过非同源最终连接途径或通过同源性编辑的单基结合途径插入或删除小型DNA段 -
。CC-BY 4.0国际许可证。是根据作者/资助者提供的预印本(未经同行评审认证)提供的,他已授予Biorxiv的许可证,以在2023年2月17日发布的此版本中在版权所有者中显示预印本。 https://doi.org/10.1101/2023.02.17.528918 doi:Biorxiv Preprint
叶酸很重要,因为它可以帮助预防大脑和脊柱的重大先天缺陷。在怀孕前和怀孕期间,确保每天摄入 400 微克叶酸。叶酸以维生素形式存在,也存在于许多强化食品中,如面包和谷类食品。此外,各种健康食品中都天然含有叶酸。
1. 英国伦敦癌症研究所癌症药物研发中心 7 2. 上海生物制品研究所,上海,中国 8 3. 广东工业大学生物医学与制药科学研究所,广州,中国 9 4. 中国农业科学院深圳农业基因组研究所,深圳,中国 10 5. 广州医科大学 GMU-GIBH 联合生命科学学院,广州,中国 11
胞嘧啶碱基编辑器 (CBE) 能够在目标基因座上实现有效的胞嘧啶到胸苷 (C-to-T) 替换,而不会造成双链断裂。然而,目前的 CBE 会编辑其活动窗口内的所有 C,从而产生不良的旁观者突变。在最具挑战性的情况下,当旁观者 C 与目标 C 相邻时,现有的碱基编辑器无法区分它们并编辑两个 C。为了提高 CBE 的精度,我们识别并设计了人类 APOBEC3G (A3G) 脱氨酶;当与 Cas9 切口酶融合时,所得的 A3G-BE 会在人类细胞中对 5′-CC-3′ 基序中的第二个 C 进行选择性编辑。我们的 A3G-BE 可以高精度地安装单个与疾病相关的 C-to-T 替换。与 BE4max 相比,完美修饰等位基因的百分比在疾病校正方面高出 6000 倍以上,在疾病建模方面高出 600 倍以上。基于双细胞胚胎注射方法和 RNA 测序分析,我们的 A3G-BE 表现出最小的基因组和转录组范围的脱靶效应,实现了高靶向保真度。