XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search SystemC3G
角质形成细胞感知并通过刺激/IFN-κ激活和APOBEC3G诱导消除CRISPR DNA
引言角质形成细胞（KC）长期以来一直被认为是转染最困难的细胞类型之一（1，2），但是这种耐药性背后的机制尚不清楚。kc是表皮的主要细胞成分，它充当人体和外部药物（例如细菌和病毒）之间的主要界面。除了对上皮真皮作为物理屏障的关键贡献之外，KC还通过一系列模式受体和分泌各种细胞因子的能力具有非常活跃的免疫作用（3）。原核生物衍生的定期插入短的短质体重复序列（CRISPR）/CAS9技术改变了我们操纵活细胞中特定DNA和RNA序列的能力（4）。CRISPR/CAS9系统依赖于引导RNA（GRNA）来靶向特异性和功能，通过产生焦油的DNA断裂，从而通过各种内源性机制刺激修复。CRISPR技术可用于通过非同源最终连接途径或通过同源性编辑的单基结合途径插入或删除小型DNA段 -
使用工程化的 APOBEC3G 进行单个 C 到 T 替换...
胞嘧啶碱基编辑器 (CBE) 能够在目标基因座上实现有效的胞嘧啶到胸苷 (C-to-T) 替换，而不会造成双链断裂。然而，目前的 CBE 会编辑其活动窗口内的所有 C，从而产生不良的旁观者突变。在最具挑战性的情况下，当旁观者 C 与目标 C 相邻时，现有的碱基编辑器无法区分它们并编辑两个 C。为了提高 CBE 的精度，我们识别并设计了人类 APOBEC3G (A3G) 脱氨酶；当与 Cas9 切口酶融合时，所得的 A3G-BE 会在人类细胞中对 5′-CC-3′ 基序中的第二个 C 进行选择性编辑。我们的 A3G-BE 可以高精度地安装单个与疾病相关的 C-to-T 替换。与 BE4max 相比，完美修饰等位基因的百分比在疾病校正方面高出 6000 倍以上，在疾病建模方面高出 600 倍以上。基于双细胞胚胎注射方法和 RNA 测序分析，我们的 A3G-BE 表现出最小的基因组和转录组范围的脱靶效应，实现了高靶向保真度。