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CRISPR/Cas 介导的马铃薯基因组编辑
基因组工程正在重塑植物生物技术和农业。使用最近开发的基因编辑技术进行作物改良现在比以往任何时候都更容易、更快速、更精确。尽管马铃薯被认为是一种全球粮食安全作物，但它并没有从这些技术的多样化中获益足够多。栽培马铃薯的独特遗传特征，如四体遗传、高基因组杂合性和近交衰退，阻碍了这种重要作物的常规育种。因此，基因组编辑为马铃薯的性状改良提供了一套极好的工具。此外，使用特定的转化方案，可以设计出无转基因的商业品种。在这篇评论中，我们首先描述了马铃薯基因组编辑过去的成就，并强调了这些努力中缺失的一些方面。然后，我们讨论了马铃薯基因组编辑的技术挑战，并提出了克服这些困难的方法。最后，我们讨论了尚未在马铃薯中探索的基因组编辑应用，并指出了文献中缺失的一些途径。
MAFB PET政策（CAS 7 2月23日）。 ...
所有Minot AFB军事人员，民用雇员，居民，游客，承包商和抚养人的备忘录来自：5 BW/CC主题：Minot AFB PET政策1。div>宠物是许多军人家庭不可或缺的一部分。为了维持良好的秩序和纪律，根据AFI 32-6000，住房管理，段落，1.2.27.31、1.2.27.32、2.21和2.22，空军要求安装指挥官以建立一项服务的动物和当地的宠物政策，以纳入空军限制。本政策适用于所有访问Minot AFB的人员，其中包括但不限于：军事成员，民用雇员，居民，访客，承包商和受抚养人。所有宠物所有者必须遵守所有联邦和州法律，这项政策，并证明宠物是疫苗接种和注册的最新。安装指挥官对基地的宠物有豁免权限。2。受限制的动物：居民不得登上被视为“侵略性”或“潜在侵略性”的任何品种（包括混合品种）的狗，除非狗是一只经过认证的军事工作犬，该犬在其处理部队指挥官或批准的书面批准的书面批准中得到了司令官的书面批准。出于本政策的目的，IAW AFI 32-6000，“侵略性”或“潜在的侵略性”狗的品种被定义为斗牛犬（美国斯塔福德郡公牛梗或英国斯塔福德郡的牛犬），Rottweiler，Doberman Pinscher，Chow和Wolf Hybrid。a。除了这些品种外，Minot空军基地住房（MAFBH）禁止在私有化住房中使用以下品种：阿拉斯加Malamute，Akita，Presa Canario（Canary Mastiff）和美国牛狗。禁令还扩展到其他犬或单个狗的品种，这些狗或单个狗证明或已知证明具有主导或侵略性行为的倾向，包括具有以下类型的行为：（1）无端的吠叫，咆哮，咆哮或咆哮或在接近动物的人中； （2）当人们在场时沿着栅栏线奔跑； （3）咬人或刮擦人，以及（4）逃避监禁或限制追逐人们。
CAS ETH 金融和保险机器学习
课程模块通常由一组讲师负责，他们利用自己的专业知识为课程模块中的部分内容做出贡献。我们的目标是让活跃于研究领域的学者和从业者客座讲师共同教授课程模块，以便将研究见解与实际案例和应用相结合。每个课程模块将由一名 ETH 教员全面领导，该教员将负责课程模块的质量以及由课程负责人负责策划的不同课程贡献者之间的有效互动。
CRISPR/Cas 系统在抗病毒治疗中的应用
随着 CRISPR/Cas 系统随着时间的推移而不断完善，人们开始努力将其应用于现实世界的问题，例如开发序列靶向的抗病毒疗法。病毒对人类构成了重大威胁，迫切需要新的工具来对抗这些快速变异的病原体。重要的是，各种 CRISPR 系统都有可能以有针对性和易于适应的方式直接切割 DNA 和 RNA 病毒基因组，从而预防或治疗感染。这篇观点文章重点介绍了最近使用不同 Cas 效应物对抗导致人类急性感染的各种 RNA 病毒的研究；潜伏病毒 (HIV-1)；慢性病毒 (乙型肝炎)；以及感染牲畜和工业重要动物物种的病毒。本文讨论了前景和剩余的挑战，特别是在应对新出现的病毒（如 SARS-CoV-2）的背景下。
GB4.0平台，CRISPR/CAS ...
CRISPR/CAS能够同时瞄准多个基因座（多重）的能力是改变植物育种的游戏规则。多路复用不仅会加速性格金字塔，而且还可以揭示功能冗余所隐藏的特征。此外，多路复用增强了基于DCAS的可编程基因表达，并实现了类似级联的基因调节。然而，包含串联阵列导向RNA（GRNA）的多重构建体的设计和组装需要无疤的克隆，并且由于存在重复序列而仍然很麻烦，从而阻碍了更广泛的使用。在这里，我们介绍了软件辅助克隆平台Goldenbraid（GB）的全面扩展，其中除了其多基因克隆软件之外，我们将新的工具集成了新的工具，用于基于IIS的易于且六个串联阵容的GRNA，使用Cas9和cas12a，使用GRNA-trees-trees-trees-crrna-crrrna-crrrna和crrrnna crrrnna crrrnna crrrnna crrrna carrna-crrrna crrrna cas12a。作为新工具的应力测试，我们组装并用于农杆菌介导的稳定转化A 17 cas9-grnas构造，靶向烟草中的Squamosa-promoter结合蛋白样（SPL）基因家族的子集。14个选定的基因是miR156的靶标，因此在少年到成年和营养至生殖相变中可能起重要作用。使用17个grnas构建体，我们生成了一组无Cas9的SPL编辑的T 1植物，该植物携带了多达9个双重突变，并显示出叶少年和更多的分支。GB4.0 Genome Edition纳入了新的基于Web的工具和随附的DNA零件集合，为植物基因组工程提供了多合一的开放平台。使用荧光素酶lyanum lycopersicum mtb促进剂或Agrobacterium tumefaciens Nopaline benthase prospermers inice inice inice Amamaine inice Amamaine in NiceAtient在NICAPASE中，NICAPASE PROSSITER in NICAPASE in NICAPASE in NICAPASE in NICAPASE in NICAPASE in NICAPASE in NICASIEN中，NICAIN中的使用单个和多重GRNA的GB组装DCAS9和基于DCAS12A的CRISPR/CAS激活剂和阻遏物使用单一和多路复用GRNA的功能。使用单个和多重GRNA的GB组装DCAS9和基于DCAS12A的CRISPR/CAS激活剂和阻遏物使用单一和多路复用GRNA的功能。
背景论文：CRISPR/CAS-技术描述
Das CRISPR (engl.: Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats )/Cas (engl.: CRISPR-associated )-System wird im Labor dazu verwendet, zielgerichtete Veränderungen am Erbgut eines Organismus vorzunehmen (Genomeditierung/Genome Editing).Die Methode wird derzeit intensiv weiterentwickelt und findet vor allem Anwendung in der Pflanzen- und Tierzucht, der medizinischen Forschung und der Grundlagenforschung.Dieses Hintergrundpapier beschreibt zunächst die natürliche Funktion von CRISPR/Cas in Bakterien und erklärt anschließend, wie CRISPR/Cas als molekularbiologische Technik verwendet wird, um damit DNA an spezifischen Stellen des Erbguts von Zielorganismen zu schneiden.Es wird unter anderem darauf eingegangen, mit welchen Verfahren die Genschere CRISPR/Cas in pflanzliche Zellen eingeschleust werden kann und wie Veränderungen am Erbgut bewirkt werden können.Ursprung von CRISPR/Cas in Bakterien
高效 CRISPR/Cas 介导的靶向诱变......
CRISPR/Cas 技术近期已成为植物基因功能研究和作物改良的首选分子工具。小麦是一种全球重要的主粮作物，其基因组已被充分注释，使用基因组编辑技术（如 CRISPR/Cas）有很大空间改善其重要的农业性状。作为本研究的一部分，我们针对六倍体小麦 Triticum aestivum 中的三个不同基因：春季品种 Cadenza 中的 TaBAK1-2 以及冬季品种 Cezanne、Goncourt 和 Prevert 中的 Ta- eIF4E 和 Ta-eIF(iso)4E。已成功生成所有目标基因的携带 CRISPR/Cas 诱导的插入/缺失的原代转基因系。由于冬小麦品种通常不太适合遗传转化，本研究中介绍的冬小麦转化和基因组编辑的成功实验方法将引起研究该作物的研究界的兴趣。
风险可能对环境的crisp/cas效应
迅速开发的新基因组编辑技术表明，越来越迫切需要评估相关风险。当前，最常用和最有前途的方法是CRISPR/CAS系统。本背景论文讨论了基因组编辑的植物对环境的可能影响，并包括一项案例研究Camelina Sativa，这是一种大多在欧洲和北美种植的年度植物。使用CRISPR/CAS9已更改了Camelina的脂肪酸含量。案例研究提供了对基因组编辑植物的代谢途径的意外影响的解释，并概述了可能的意外环境影响。即使使用基因组编辑介导的DNA的变化成功，这些变化对生物体的影响可能与预期的完全不同， 意外的和意外的效果，即使使用基因组编辑的DNA的变化成功。 在这方面，精确度不得等于安全。 与其他代谢途径的相互作用可以改变植物中成分的组成或使其更容易受到疾病的影响。 此外，与传粉媒介，土壤生物或食物链的相互作用也可能受到影响。 其中一些效果很难检测到，因为它不足以仅检查DNA序列。 相反，通常必须更仔细地检查细胞中的复杂代谢过程。 对代谢和信号通路的不良影响，而不是预期的变化，CRISPR/CAS可以干预其他信号传导或代谢途径。意外的和意外的效果，即使使用基因组编辑的DNA的变化成功。 在这方面，精确度不得等于安全。 与其他代谢途径的相互作用可以改变植物中成分的组成或使其更容易受到疾病的影响。 此外，与传粉媒介，土壤生物或食物链的相互作用也可能受到影响。 其中一些效果很难检测到，因为它不足以仅检查DNA序列。 相反，通常必须更仔细地检查细胞中的复杂代谢过程。 对代谢和信号通路的不良影响，而不是预期的变化，CRISPR/CAS可以干预其他信号传导或代谢途径。意外的和意外的效果，即使使用基因组编辑的DNA的变化成功。精确度不得等于安全。与其他代谢途径的相互作用可以改变植物中成分的组成或使其更容易受到疾病的影响。此外，与传粉媒介，土壤生物或食物链的相互作用也可能受到影响。其中一些效果很难检测到，因为它不足以仅检查DNA序列。相反，通常必须更仔细地检查细胞中的复杂代谢过程。对代谢和信号通路的不良影响，而不是预期的变化，CRISPR/CAS可以干预其他信号传导或代谢途径。这是因为代谢途径相互联系。DNA，RNA，蛋白质和/或代谢产物可以相互作用，从而刺激或阻断特定功能。例如，如果基因剪刀用于防止基因被激活并且不再产生相应的蛋白质，则除了预期的效果外，这还会导致细胞中其他信号传导途径的破坏。结果，代谢产物的形成可能会增加，而不应改变。诱导的变化绝不应自行考虑，而应在复杂，平衡的生物系统的背景下进行考虑。
下一代CRISPR -CAS技术和应用
调节和编辑遗传信息的能力对于研究基因功能和发现生物学机制至关重要。自从1971年首次使用固定酶生产特定的DNA片段以来，科学家一直在利用原核生物分子进行基因编辑1。除了限制酶2外，DNA修饰工具类别还包括重组酶3和可编程的核酸酶，例如毛核酸酶，锌指核酸酶，转铺激活剂样效应子核酸酶和CRISPR – CAS Systems 4。修饰特定基因座的DNA结合蛋白具有非常高级的科学，生物技术和医学。但是，开发模块化DNA结合蛋白以在自定义目标上结合的复杂性通常需要蛋白质工程专业知识。在过去的十年中，CRISPR – CAS9技术通过消除了对工程定制靶向靶向DNA结合蛋白的任何专业知识的需求，从而改变了基因组工程，因为CRISPR-CAS9的目标特异性取决于核酸的基础配对，而不是蛋白质-DNA识别。在本质上，CRISPR -CAS系统是一种用于裂解入侵核酸5的实质性适应性免疫机制。在各种细菌和古细菌中存在各种CRISPR -CAS系统，它们的组成部分和作用机理不同。例如，1类CRISPR – CAS系统可以使用多蛋白效应子络合物，而2类系统具有单个效应蛋白；总的来说
CRISPR/CAS 技术：基因编辑的一场革命
科学进步通常以重大技术突破为特征。单克隆抗体的产生、聚合酶链式反应 (PCR) 的发明或荧光蛋白的使用对生命科学产生了巨大影响。DNA 编辑技术已被广泛用于以特定且受控的方式修改基因。例如，在 CRISPR/Cas 技术 (Jinek 等人，2012) 开发之前，插入基因的额外副本 (转基因) 或通过同源重组破坏或替换基因是使用的基因组修饰方法。1993 年 CRISPR 序列的表征 (Mojica 等人，1993) 以及随后基因修饰技术的开发 (Jinek 等人，2012，Gasiunas 等人，2012) 彻底改变了现代生物学中遗传实验的格局。