与研磨过程。我通常更喜欢类似于水稻颗粒的沉淀尺寸,无论是冷冻的还是新鲜的。我去除了多余的液体,因为它使磨石变得困难(藻类倾向于漂浮!)。我检查了显微镜下的样品,以评估磨削的进展,并观察CTAB溶液的绿色。通常,我将每个样品磨碎大约一分钟。•或者,您可以使用自动涡流适配器(例如Mobio)同时处理多个样本。沉淀后,将二氧化硅砂和细胞与CTAB放在管中。让其在架子上站立5分钟,然后将其转移到热块20分钟。如果CTAB缓冲区在此步骤之后没有变成绿色,请重复涡旋过程。一般规则,尤其是在仅氯仿提取物中,添加更多的组织可以产生更多的DNA到一定点,但它还增加了样品中污垢或杂质的量。DNA中的残基可以氧化样品,从而导致降解,并且可能会干扰下游应用中使用的酶。因此,必须在所用的组织量与提取的DNA质量之间找到适当的平衡,以确保在进一步的实验中获得可靠的结果。
引物名称序列(5'→3')tm(°C)参考CNL12(f)Ctgccctagtage 58 1 5sa'(f)旋转61 2 5sage 61 2 5sage 61 2 5sage 61 2 5sage 61 2 5sage 61 2 5sage 61 2 5sage 61 2 5sage 61 2 5sage 61 2 5sage 61 2 5sage(f)gagacaag-gagacaag-gagacaag-gagacaagi-gagacaagi-gagacaigi gagacaigi gagacaigi gagacaigi gagacaigi gagacaigi gagacaigi gagacaigi gagacaagi 56 ctgactactactatgtgtgtg 51 4 TMI-3F GGCCATAGGACTCTCATGAAAGC 63 4 TMI-4R ATGCATGGCTTAATCTTTGAGA 62 4 TMI-5R CGAGGCGCGCGCGCGTGAAAGGGTG 63 4 TMI-8F 63 4 TMI-8F 4 TMI-8F GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGY 63 4 TmI-8RA CAAGE 63 4 4 4 TmI-9F 9F 9F 4 TmI-9R 61F 61F 61F GGAAGTAGETTHIGHTTHIGHT 54 4 4 TmI-13RALY 55 4 TmI-15RA 56 4 TmI-17AGE 4 TmI-17AGE 61Phage 61phage TMI-18PHAGE 61PHAGE 61PHAGE 61PHAGE 61PHAGE 61BER 4 TMI-19F TMI-19F TMI-19F 45 4 TMSP-I-2F TACTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTGCAGE 61 4 4 4 4 4 4 4 1:ANDERSON&Stasovski(1999),2:(1992),4:这项研究。(1992),4:这项研究。
摘要 钻探油气井过程中最重要的挑战之一是处理页岩地层和随后的页岩膨胀。在本研究中,我们利用羧甲基三甲基氯化铵 (CTAC) 来抑制页岩膨胀,代表了这种特殊阳离子表面活性剂的一种新应用。我们进行了几项实验来评估 CTAC 在防止页岩膨胀方面的有效性并深入了解其潜在机制。此外,根据结果,CTAC 在低浓度下非常有效,可以与其他常见添加剂一起使用。此外,在膨润土混合物中存在 1 wt.% 的 CTAC、十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB) 和氯化钾 (KCl) 时,接触角分别为 77°、75° 和 38°。此外,通过添加 CTAB,简单和完全钻井泥浆中的总页岩回收率分别增加了 5.53% 和 0.94%。同时,在CTAC存在下,增幅分别为12.37%和6.43%。此外,在完整钻井泥浆中加入CTAC和CTAB分别使膨胀减少了9.94%和4.2%。最后,对比研究表明,CTAC作为一种新型抑制剂的效果优于CTAB和KCl作为常规抑制剂。
目标。比较了从哺乳动物粪便样品中恢复细菌DNA的四种DNA提取方法。方法和结果。评估了来自Qiaamp,Tianamp和Magen的三种商业试剂盒,以及经典的切丁酰三甲基铵溴化物(CTAB)方法,评估了它们在从肠道菌群中提取细菌DNA的性能中心曲霉)和小鼠(mus musculus)。首先,我们根据DNA产量,纯度和完整性评估了四种方法的效率。然后,我们研究了这些方法对微生物组成和多样性的影响,并根据16S rRNA基因测序和实时定量PCR检查了显性门细菌的相对丰度。我们的结果表明,CTAB方法产生的DNA量相对较大,而Magen套件产生了更多的Firmicutes DNA,并更准确地反映了微生物群的真实状态。结论。取得了最佳性能。作为CTAB方法和MAGEN试剂盒具有不同的优势,我们进一步测试并比较了其在定义的菌群上的DNA提取性能,其中包含来自四个主要门的六种菌株,以查看哪一个更好地反映了微生物群的真实状态。总而言之,发现Magen套件优于CTAB方法,因为测试结果更接近定义的微生物群。
摘要:通过表面活性剂介导的策略制备了分层ZSM5和Y沸石,NH 4 OH改变了处理的持续时间和CTAB表面活性剂的量,并作为关键胶束浓度的参考倍数(CMC)。使用粉末X射线衍射,N 2吸附等温线在-196℃以及SEM和TEM显微镜表征。在80°C的乙酸盐中用乙酸盐的弗里德尔 - 工艺酰化评估了催化性能。碱性表面活性剂介导的治疗对两个沸石的影响不同。对于ZSM5,CTAB分子聚集体几乎无法在中型毛孔内扩散,主要导致晶间的中源性和外部表面积增加,而没有阳性催化影响。另一方面,对于大孔沸石,CTAB分子聚集体很容易扩散并促进胶束周围晶体单位的重排,从而导致毛孔的肿大,即晶体内孔隙度。用CTAB量为CMC的32倍处理了12小时的优化基于Y的样品,显示出添加较高量的表面活性剂时未观察到的产品产量和速率常数的增加。在400℃的热处理上,用消费催化剂的再利用显示出约90%的再生效率,显示了改良催化剂的良好潜力。
下一代测序需要高质量的核酸,但是分离的DNA和RNA通常具有挑战性,尤其是在植物组织中。尽管开发了各种试剂盒和试剂,但这些产物是根据模型植物的分离而定制的。在这里,我们引入了一种通用裂解缓冲液,以将核酸与包括顽固植物在内的各种植物种类分开,以促进分子分析,例如定量PCR(QPCR),转录组学和全基因组测序(WGS)。该方案是对原始CTAB方法的修改,该方法导致从许多植物物种(包括单子叶植物和eudicot)中分离出核酸。裂解缓冲液由六烷基三甲基溴二铵(CTAB),氯化钠(NaCl),Tris碱,乙二胺甲乙酸抗乙酸(EDTA)和β-苯二甲醇(βME)组成。修饰的CTAB方法可以及时从少量植物组织(例如15-100 mg)中分离出核酸,这非常适合大量样品,并且当适当的样品收集是一个限制因素时。方案不仅分离出来自各种植物物种的DNA,还分离出RNA。这使得与先前描述的用于DNA分离的CTAB方法相比,它对分子分析非常有效。成分的适当浓度可以同时从植物组织中分离出高质量的DNA和RNA。此外,此协议与市售列兼容。使DNA和RNA有资格用于下一代测序平台,该方案补充了柱,以纯化同一组织中的DNA或RNA,以满足高标准以进行测序分析。该方案提供了一种理想的方法,可以克服从各种植物物种中分离出高质量DNA或RNA的潜在障碍,以进行下流的分子分析。
推荐采用市售商品化的DNA提取纯化试剂盒。如使用CTAB法提取DNA所需试剂如下: a) 乙二胺四乙酸二钠(Na 2 EDTA,C 10 H 14 N 2 O 8 Na 2 ·2H 2 O)。 b) 氢氧化钠(NaOH)。 c) EDTA 溶液:ρ(EDTA)=0.02 mol/L:称取5.8448 g EDTA 溶于适量超纯水中,NaOH 固体调节pH 至8.0,定容至1000 mL,121℃灭菌18 min,冷却后常温保存。 d) 三羟甲基氨基甲烷(Tris,C 4 H 11 NO 3 )。 e) 浓盐酸:ρ(HCl)=1.19 g/mL。 f) Tris-HCl 溶液:ρ(Tris-HCl)=0.1 mol/L:称取15.76 g Tris-HCl 溶于适量超纯水中,浓盐酸调pH 至8.0,定容至1000 mL,121℃灭菌18 min,冷却后常温保存。 g) 十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)。 h) 氯化钠(NaCl)。 i) CTAB 提取液:称取4 g CTAB 和16.38 g NaCl,分别溶于适量超纯水中,加入0.02 mol/L EDTA 溶 液(5.3 c)8 mL 和0.1 mol/L Tris-HCl 溶液(5.3 f)20 mL,定容至200 mL,121℃灭菌18 min, 冷却后常温保存。 j) Tris 饱和酚(pH=8.0)。 k) 三氯甲烷(CHC l3 )。 l) 异戊醇(C 5 H1 2O )。 m) 酚氯仿:Tris 饱和酚、氯仿和异戊醇按25:24:1 体积比配制。 n) 乙酸铵(CH 3 COONH 4 )。 o) 乙酸铵溶液,ρ(CH3COONH4)=7.5 mol/L:称取5.78 g 乙酸铵溶于10 mL 超纯水中。 p) 乙酸钠(CH 3 COONa·3H 2 O)。 q) 乙酸钠溶液,ρ(CH 3 COONa)=3 mol/L:称取102.06 g 乙酸钠溶于适量超纯水中,冰醋酸调节pH 至5.2,定容至250 mL,121 ℃灭菌18 min; r) 无水乙醇(C 2 H 6 O)。 s) 冰乙酸(C 2 H 4 O 2 )。 t) 蛋白酶K:400 U/mL。 u) 超纯水:经121 ℃,0.1 MPa 灭菌30 min,无细菌无DNA 酶。
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请选择您想要为样本提供的服务。______Service 1- Reading DNA/Primer concentrations and making necessary dilutions ______Service 2- Performing Sequencing PCR reactions ______Service 3- Running the Sequencing reactions Sample Information, please circle or fill in the blank ______Service 4- Purification of Sequencing PCR reactions Method Purified: CHCI3/phenolCscl Gel Column (Qiagen, Promega, Other_______) None ______服务仅加载(3730)和发送数据准备方法:碱性裂解沸腾的ctab其他______服务6-确定在二十四小时内确定的数据浓度:分光光度计荧光计凝胶其他有关详细信息,请参见我们的网站。DNA最初来自_______________的生物体会寄回额外的模板吗?是否
还原剂和保护剂对于湿化学合成至关重要。作为氧化还原过程的基础,还原剂将二价铜盐离子降低到零价状态,并进一步诱导其成核和生长。保护剂用于使超铜粉的湿化学合成功能化,并吸附在铜颗粒表面上,以减少表面能量以控制生长,防止聚集和阻碍氧化。13在大多数情况下,抗坏血酸是合成超铜粉末颗粒中最常用的还原剂,而中等降低速率可确保强大的可控性。14吡咯烷(PVP),15杆基三甲基氨基铵(CTAB),16个烷基胺(Cetyl,octadecyl),17个和其他大分子分子长碳链表面表面表面表面以改善分散和避免聚集的生长,以避免进行聚集和