DNA提取在确定分子生物学的遗传问题中起着至关重要的作用。弗里德里希·米舍(Friedrich Miescher)于1869年在DNA上首次发现了粗糙的提取(Ali等人,2017年)。DNA提取的基本原理由几个步骤组成:(1)使用CTAB(Aboul-Maaty and Oraby and Oraby,2019)或SDS方法(El-Ashram等人,,2016年),而物理破坏,包括使用液氮隔离来研磨样品(Sahu等人,2012年)甚至酶促治疗,例如蛋白酶K(Sirkov,2016)和RNase(Tel- Zur等人。,1999; El-Ashram等。,2016年; Wang等。,2019年)可用于消除潜在的污染; (2)从细胞裂解物化合物中纯化DNA; (3)降水和DNA纯化(Dairawan and Shetty,2020年); (4)使用酒精和(5)含有低离子强度的溶液冲洗样品,通常使用Tris EDTA缓冲液溶解DNA并保护其免受降解。DNA提取方法可以使用
摘要。DNA提取是确定获得的基因组DNA的数量和质量的初始阶段。在年植物中使用幼叶并不总是存在,替代品使用较古老的叶子,但含有许多多酚和多糖。本文评论的目的是解释与高含量多糖和多酚的植物的有效DNA提取方法有关的修饰。通常需要进行植物DNA提取方法的修改,因为每种植物都有不同的代谢产物,因此需要不同的处理需求。有各种植物DNA提取的方法。CTAB方法是最广泛使用和开发的方法。通过增加TrishCl,β-甲醇,NaCl和PVP的浓度,重复纯化阶段或添加诸如RNase之类的便利化,进行了该方法的修改以获得质量基因组DNA。对修改进行了调整,以调整到所用植物的类型中,因此需要在开始时进行优化以确定正确的方法。在提取的每个阶段的几种类型的植物中的提取修饰及其对获得的DNA质量的影响可以比较,这是确定将调整的修饰的基准,该修饰将调整到要测试的植物类型。关键字:DNA提取,方法修饰,多酚,抽象多糖。DNA提取是确定获得的基因组DNA的数量和质量的初始阶段。有多种提取植物DNA的方法。并不总是可以在一年中使用幼叶,替代方法是使用成熟的叶子,但含有大量的多酚和多糖。本评论文章的目的是描述对高含量多糖和多酚的植物的有效DNA提取方法的修饰。通常需要进行DNA提取方法的修改,因为每种植物都包含不同的代谢产物,因此需要不同的治疗方法。CTAB方法是最广泛使用和开发的方法。进行该方法的修饰以获得质量的基因组DNA,可以通过增加TrishCl,β-硫酸乙醇,NACL和PVP的浓度,重复纯化步骤或添加RNase等化学物质。修改是根据所用植物类型进行的,因此需要在开始时进行优化以确定正确的方法。在每个提取阶段对几种类型的植物的提取修饰进行比较,并且对获得的DNA质量的影响可以用作基准,以根据要测试的植物的类型来确定要进行的修饰。关键字:DNA提取,修饰方法,多酚,多糖
1 北京理工大学机电学院,北京 100081 2 先进加工技术研究中心,北京 100081 * 电子邮件:heleibuaa@126.com,xucg@bit.edu.cn 收稿日期:2020 年 2 月 2 日 / 接受日期:2020 年 3 月 22 日 / 发表日期:2020 年 5 月 10 日 以硫酸锰和高锰酸钾为原料,CTAB 为表面活性剂,采用简单沉淀法合成 MnOOH 纳米棒,并以此为前驱体制备 Mn2O3 纳米棒。通过超声显微镜和电化学测试等各种物理化学实验对 Mn2O3 纳米棒的结构和性能进行了全面研究。 X 射线衍射、扫描电镜和透射电镜观察表明 Mn 2 O 3 结晶性良好,具有均一的棒状形貌,纳米棒的宽度和长度分别为 200~300 nm 和 2~4 μm。进一步分析该材料的电极性能发现,将其用作锂离子电池负极材料在 0.1C 倍率下可获得 1005 mAh·g -1 的二次放电容量。关键词: MnOOH;负极材料; Mn 2 O 3;锂离子电池。1.引言
自生产和使用以来,化石燃料就影响了生态系统,从而对其生物多样性造成了重大损害。细菌生物修复可以为该环境问题提供解决方案。在这项研究中,新物种异翅目Peretonis sp。nov。在体外和硅分析中,在碳氢化合物降解和生物表面活性剂生产方面,已将4D.3 T与其他密切相关的物种进行了表征和比较。生物表面活性剂在微生物碳氢化合物降解中起着重要作用,通过乳化碳氢化合物并使其可用于微生物降解机制。进行的测试显示了所有菌株的阳性结果或多或少。在合成生物表面活性剂中,所有测试的菌株均显示出三种互补测定(CTAB,溶血和E 24%)中的生物表面活性剂活性,并且在大多数等异端菌菌株中都预测了在硅中的Rhamnolipid合成基因。关于碳氢化合物降解,所有分析的异翅目菌株都提出了推定的基因,这些基因负责芳香族和烷烃碳氢化合物的有氧和厌氧降解。总体而言,我们的结果突出了异翅目属的代谢多样性和生化鲁棒性,该属被认为在碳氢化合物生物修复领域中引起了人们的关注。
摘要 利用源自农业废弃物的产品作为低成本吸附材料去除有机或无机污染物是理想的选择,因为这些材料在许多国家都很容易获得。这项研究旨在制备由纳米复合材料 OPBA / 膨润土 / TiO 2 制成的环境友好型吸附剂。采用共沉淀法制备 OPBA,在膨润土制备中添加 CTAB 表面活性剂。同时,采用溶胶-凝胶法制造 TiO 2 。通过 XRD、FTIR、SEM 和 BET 进行表征。吸附剂光谱没有显示吸收的显著变化,其中 OH 键变弱是由于膨润土层间存在 TiO 2 造成的。另一种可能性是由于煅烧和加热的影响。H 2 O 中的 OH 基团在层间被羟基化和脱水。 OPBA/TiO 2 /Bentonite复合材料的形成并没有明显改变TiO 2 的结晶性,证明OPBA和Bentonite的加入并没有降低光催化活性,整个样品的形貌为片状结构,且存在孔隙;在Bentonite/TiO 2 中加入OPBA导致样品的比表面积降低。
摘要 蓟马是重要的农业害虫,通过取食和传播植物病毒对农作物造成广泛损害,造成了巨大的经济损失。有效的 DNA 提取对于分子鉴定和病毒检测至关重要,但由于其体积小、角质层坚硬以及受到植物衍生物质的污染,提取 DNA 往往具有挑战性。已经开发出各种 DNA 提取方法来应对这些挑战,包括碱裂解、酶消化、基于有机溶剂的方法和旋转柱技术。碱裂解法是一种快速且经济有效的解决方案,可产生适用于 PCR 等应用的 DNA,但可能需要额外的纯化才能进行灵敏的分析。酶消化使用蛋白酶 K 等试剂,可确保获得相对纯净的 DNA,这些 DNA 可以稳定地储存并可用于下游应用。基于有机溶剂的方法,例如 CTAB 与氯仿相分离和酒精沉淀,对于分离高质量 DNA 非常有效,尤其是在含有大量污染物的样品中。基于离心柱的商业试剂盒进一步简化了该过程,通过最大限度地减少杂质,提供具有极高纯度的 DNA,使其成为敏感和高通量应用的理想选择。DNA
DNA提取自1869年弗里德里希·米舍(Friedrich Miescher)首次试图隔离它以来,它已经走了很长一段路,意外地发明了一种核酸隔离方法,后来其他人会完善。该过程涉及分解细胞膜和核信封以获得DNA,这对于PCR,DNA克隆,测序和电泳等各种分子生物学应用至关重要。取决于样本类型 - 需要植物,血液,细菌或其他 - 需要不同的提取方法,每种方法都有自己的手术,以确保DNA的所需纯度和数量。从苯酚 - 氯仿等醇到蛋白酶K,CTAB,自旋柱,磁珠等等,存在各种技术,每个技术都基于样品的特定要求选择。DNA提取的故事是连续的创新和精致之一,像Meselson和Stahl这样的先驱在1958年建立了全功能程序,而其他人则随着时间的推移贡献了他们的方法。从细胞中提取DNA的过程涉及三个主要步骤:细胞裂解,沉淀和溶解DNA。所使用的化学或组合的类型可能会根据目标和细胞类型而有所不同。对于柔软的细胞壁,如在结核分枝杆菌中发现的,用简单的裂解缓冲液加热是有效的。然而,较硬的细胞壁需要机械,化学和酶促方法来提取DNA。基于化学的DNA提取方法是基于溶液的,涉及各种有机和无机溶液。这些包括SDS,CTAB,苯酚,氯仿和硫氰酸鸟酯。所有程序的主要步骤是细胞裂解,降水和洗脱。基于溶液的(化学)DNA提取进一步分为基于有机溶剂的和基于无机溶剂的方法。有机溶剂(如苯酚和氯仿)以前已被使用,但由于危险而灰心。相反,采用了更安全的替代方案,例如Triton X100和EDTA。不同的化学物质有特定目的;蛋白酶K等酶分解蛋白质直接靶向氨基酸连接。DNA提取过程的有效性可能受细胞类型的影响以及某些化合物或化学物质组合的使用。在冷链中,尽管有一些缺点,但基于蛋白酶K的DNA分离方法还是有效的方法。此过程的一个问题是酶的稳定性降低,随着时间的流逝而降低。使用无机溶液(例如氯化钠和乙酸钾)与蛋白酶K结合使用的盐溶液。但是,提取的DNA的纯度可能是一个问题,因为尽管获得了足够的质量,但收益率可能不会令人满意。苯酚 - 氯仿 - 异氧化酒精法(PCI)是提取DNA的另一种流行技术。它使用液化缓冲液,苯酚和氯仿对蛋白质和破坏细胞,从而产生出色的产率和纯度。可以通过使用现成的DNA提取缓冲区来修改此方法,从而快速而简单。高质量的DNA产量和简单操作系统对于准确的DNA分析至关重要。相反,基于二氧化硅的DNA提取方法提供了一种独特的方法,依赖于二氧化硅和DNA相互作用的独特化学。带正电荷的二氧化硅颗粒在离心过程中与带负电荷的DNA结合,从而允许高质量的DNA产量和易于操作。由于其简单性和有效性,该市售技术已在诊断实验室中被广泛接受。为了验证提取的DNA,可以使用溴化乙锭或其他与DNA在UV光下反应的荧光染料在琼脂糖凝胶上电泳。通过计算260 nm和280 nm波长的吸光度来测量DNA的纯度。确定DNA纯度的最常见方法是A260/A280比率,对于优质DNA,应在1.7-2.0之间。较低的比率表明存在更多的污染物。荧光测量是确定DNA产量和浓度的另一种流行方法,它由于其广泛的可用性和比吸光度方法更高的灵敏度。也可以使用二苯胺(DPA)指示器确认DNA的存在,该指标涉及DNA化学水解。与分光光度计在600 nm处的吸光度强度也可以通过将DNA浓度与已知DNA浓度的标准曲线进行比较来确定DNA浓度。已开发和应用多种用于DNA提取的方法,包括用于传染病的护理核酸测试和人类DNA提取方法。方法的选择取决于DNA的特定应用和所需的质量。
该药物受到其他监测。这将允许快速识别新的安全信息。您可以通过报告可能获得的任何副作用来提供帮助。有关如何报告副作用,请参见第4节的结尾。在收到此药物之前,请仔细阅读所有这些传单,因为它包含了重要的信息。- 保留此传单。您可能需要再次阅读。- 如果您还有其他问题,请询问您的医生,药剂师或护士。- 如果您有任何副作用,请与您的医生,药剂师或护士交谈。这包括此传单中未列出的任何可能的副作用。请参阅第4节。此传单中的内容1。什么是佐剂三价流感疫苗seqirus,以及它用于2。在收到辅助三价流感疫苗Seqirus 3。如何给出佐剂的三价流感疫苗Seqirus 4。可能的副作用5。如何存储佐剂三价流感疫苗Seqirus 6。包装和其他信息的内容1。辅助三价流感疫苗Seqirus是什么,以及用于辅助三价流感疫苗seqirus的辅助疫苗是一种针对流感的疫苗(流感)。当一个人获得疫苗时,免疫系统(人体的自然防御系统)将自行保护对流感病毒。疫苗中的所有成分都不会引起流感。该疫苗用于预防50岁及以上的成年人的流感。2。根据世界卫生组织在2024/2025季节的建议,该疫苗针对三种流感病毒菌株。What you need to know before you receive Adjuvanted Trivalent Influenza Vaccine Seqirus You should not receive Adjuvanted Trivalent Influenza Vaccine Seqirus - If you are allergic to the active ingredients or any of the other ingredients of this medicine (listed in section 6) egg or chicken proteins (such as ovalbumin), kanamycin and neomycin sulphate,甲醛,氯三铵溴化物(CTAB)和氢化可的松,它们是制造过程中的痕量残基。- 如果您发生了严重的过敏反应(例如过敏症)先前的流感疫苗接种。
摘要冬季油菜的两个突变体(甘蓝纳普斯L. var。oleifera)通过化学诱变(HOR3-M10453和HOR4-M10464)培养种子中含有含油酸的量。突变植物的整体性能远低于野生型品种。具有高收益的双低(“ 00”)品种和具有有价值的农艺性状的繁殖品种的多个回合,然后需要选择高油酸基因型,以获得新的“ 00”种类的新“ 00”品种,具有高油酸含量的种子中的高油酸含量。要执行此类选择,使用了特定的裂解扩增的多态性序列(CAPS)标记。该标记旨在检测去饱和酶基因BNAA.FAD2中两个相关点突变的存在,并且先前已对其进行了描述和专利。使用FSP BI限制酶消化了特定的聚合酶链反应产物(732 bp),该酶识别5'-C↓TAG -3'序列,这是两个突变等位基因共有的,从而对这些等位基因特异性产生带模式。重新设计了该专利中提出的方法,调整为特定的实验室条件并进行了彻底的测试。测试了不同的DNA提取方案以优化过程。CAPS方法的两个变体(带有和不使用放大产品的净化)被认为选择最佳选择。此外,还测试了研究标记检测BNAA.FAD2基因座中杂合性的能力。最后,我们还提供了一些在繁殖计划中使用标记辅助选择(MAS)中使用新帽标记的示例。建议使用CAPS标记的DNA提取的标准CTAB方法和简化的两步(放大/消化)程序。标记物被发现可用于检测研究的BNAA.FAD2去饱和酶基因的两个突变等位基因,并有可能确保育种者的霍尔线纯度。然而,还表明它无法检测到任何其他揭示的等位基因或基因在油酸水平的调节中起作用。
抽象的兰花(兰花科)是以其鲜花形状,颜色和香气归因于其高度美学价值而闻名的装饰植物。两种类型的混合兰花和吸引人的花朵,即phaenopsis的“牛皇后”兰花和树突状'Cheddi Jagan'的花朵在这项研究中使用了迷人的花朵,因为其花色的美丽。这项研究的目的是表征诱导花颜色的花色和CHS(Chalcone合酶)基因含量的形态。这项研究中使用的方法通过使用RHS(皇家园艺学会)的颜色图和分子分析,通过DNA基因组分离和GDNA的PCR扩增CHS基因特异性引物,分析了花朵的颜色。结果表明,使用p。通过RHS观察到紫色。'ox Queen'编码为深紫色粉红色(N73A)和d。'Cheddi Jagan'编码为强红色紫色(N72C)。CHS基因可以在p中扩增。'牛皇后'1,287 bp和d。'Cheddi Jagan'3,731 bp。在两个兰花中,放大的结果显示了具有保守域PLN03172和PLN03170的CHS基序。研究结果表明,兰花花的形态存在显着差异。紫色可以通过RHS观察到p。'ox Queen'编码为n73a和d。'Cheddi Jagan'编码为N73C。结果表明,根据Murray和Thomson的使用CTAB方法可以分离GDNA,并且CHS基因可以通过CHS引物可以扩增,从而产生1200 bp的p。'Cheddi Jagan'。'ox Queen'和2500 bp d。通过这项研究,预计将对未来的研究进行初步数据,这是通过编辑CHS基因中的CRISPR/CAS9基因组来形成杂色花的。这项研究旨在支持p。'牛皇后'和d。'Cheddi Jagan',使用CRISPR/CAS9技术专注于CHS基因。版权所有:©2024,J.热带生物多样性生物技术(CC BY-SA 4.0)