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小麦叶子抗锈的克隆基因LR47从aegilops speltoides渗入
叶锈病是由Triticina Eriksson（PT）引起的，是小麦最严重的叶面疾病之一。抗叶生锈的育种是控制这种毁灭性疾病的实用且可持续的方法。在这里，我们报告了LR47的鉴定，LR47是一种从aegilops speltoides渗入小麦的广泛有效的叶子抗锈蚀基因。LR47编码均匀的亮叶核苷酸核苷酸结合重复蛋白，既具有必要又具有足够的能力来赋予PT耐药性，如功能丧失突变和转基因互补所证明。LR47渗透线，没有或减少了连接阻力，并开发了LR47的诊断分子标记。LR47蛋白的盘绕螺旋结构域无法诱导细胞死亡，也没有自蛋白相互作用。LR47的克隆扩大了可以掺入多基因转基因盒中以控制这种毁灭性疾病的叶片锈基基因的数量。
令人讨厌的纳粹和极端美国人：克隆，优生学和当代科幻小说中的民族象征交换
摘要摘要本文介绍了过去十到十五年的德国科幻小说，特别是那些主题化克隆和/或优生学的小说。讨论中的主要小说包括Barbara Kirchner的Die Verbesserte Frau，Birgit Rabisch的Duplik Jonas 7，以及Charlotte Kerner的Blueprint/Blaupause（由Franka Potente于2004年发行，是作为电影改编而发行的）。本讨论表明了这些和类似小说如何与纳粹优生和生殖实验的遗产相抗衡，其次，小说中现有的历史意识与当前生物技术问题的辩论内容有关，包括尤里根·哈伯马斯（JürgenHabermas），斯拉沃伊·Zizek，Slavoj Zizek和Peter Sloterdij。本文通过将这些辩论带入美国文本的比较例子中的文化交叉引用（Gattaca [1997]，The Island [2005]，二）），这些辩论倾向于令人恐惧的生殖技术的令人恐惧的方面与纳粹文本的含义，而德语文本则倾向于将其作为未来的访问者的来源。
香茅假单胞菌WXP-4一氧化二氮还原酶NosZ基因克隆、还原性能及结构
生物降解因条件温和、成本低廉、不产生二次污染等优点而受到广泛关注。6,7全球三分之二以上的N2O排放来源于土壤生态圈和水圈，在微生物反硝化途径的最后一步可以还原为无害的氮气（N2）。8–10一氧化二氮还原酶（N2OR）是唯一进行生物反硝化过程的酶，11,12因此，有效利用N2OR对于通过生物方法有效控制N2O排放至关重要。N2OR是一种周质多铜酶，为头尾相连的同型二聚体，每个单体包括两个结构域：C端的电子转移双核CuA中心和N端的催化四核CuZ中心。 13,14通常，CuA由6个氨基酸残基配体，包括1个蛋氨酸、1个色氨酸、2个半胱氨酸和2个组氨酸；CuZ则由7个组氨酸配体。15,16基于N 2 OR的三维结构，对N 2 O催化还原机理的一致看法是，N 2 O与CuZ的催化活性位点结合，然后电子从CuA转移，将N 2 O转化为N 2 。
将细胞融合与 CRISPR-Cas9 编辑相结合，在酵母中克隆较大的 DNA 片段或完整的细菌基因组
图 1：CReasPy-Fusion 方法的实验流程示意图。步骤 1（借用 CReasPy-Cloning 策略，左栏）：用两个质粒转化酵母，从而表达 Cas9 核酸酶和 gRNA。步骤 2（借用 Fusion Cloning 策略，右栏）：在线性重组模板（由酵母元件 CEN-HIS3 组成，带有或不带有 ARS，两侧是与目标基因座两侧相同的两个重组臂和一个抗生素抗性标记）存在下，将预装 pCas9 和 pgRNA 的酵母细胞与支原体细胞接触。步骤 3：进入酵母细胞后，目标基因组被 Cas9 切割，随后由酵母同源重组系统使用提供的线性 DNA 片段作为模板进行修复。因此，细菌基因组现在包括插入到精确位置的酵母元素，并由酵母作为着丝粒质粒携带。
将细胞融合与 CRISPR-Cas9 编辑相结合，在酵母中克隆较大的 DNA 片段或完整的细菌基因组
图 1：CReasPy-Fusion 方法的实验流程示意图。步骤 1（借用 CReasPy-Cloning 策略，左栏）：用两个质粒转化酵母，从而表达 Cas9 核酸酶和 gRNA。步骤 2（借用 Fusion Cloning 策略，右栏）：在线性重组模板（由酵母元件 CEN-HIS3 组成，带有或不带有 ARS，两侧是与目标基因座两侧相同的两个重组臂和一个抗生素抗性标记）存在下，将预装 pCas9 和 pgRNA 的酵母细胞与支原体细胞接触。步骤 3：进入酵母细胞后，目标基因组被 Cas9 切割，随后由酵母同源重组系统使用提供的线性 DNA 片段作为模板进行修复。因此，细菌基因组现在包括插入到精确位置的酵母元素，并由酵母作为着丝粒质粒携带。
使用隐式行为克隆和动态运动原始的动态运动来促进机器人运动计划的增强学习
摘要 - 用于运动计划的运动计划（RL）在慢训练速度和差异性差方面仍然具有低效率和差异性。在本文中，我们提出了一种新型的基于RL的机器人运动计划框架，该框架使用隐式行为克隆（IBC）和动态运动原始（DMP）来提高训练速度和外部RL试剂的概括性。IBC利用人类演示数据来利用RL的训练速度，而DMP则是一种启发式模型，将运动计划转移到更简单的计划空间。为了支持这一点，我们还使用可用于类似研究的选择实验创建了人类的示范数据集。比较研究揭示了所提出的方法比传统RL药剂的优势，训练速度更快，得分更高。实体实验实验指示了所提出的方法对简单组装任务的适用性。我们的工作提供了一种新的观点，即使用运动原语和人类演示来利用RL的性能用于机器人应用。
使用创新方法的Ubia人类基因的克隆和表达，用于PUAST载体中的重组蛋白质的产生
简介：被证明是GAL4/UAS调节的转基因的系统库，已被证明是识别基因和定义发育途径的强大遗传系统。该系统提供了有价值的见解，可以突出动物与人之间的进化保护。目标：这项研究的目的是克隆，表达和表征UBIA基因。该研究使用UBIA -PCDNA3基因作为哺乳动物克隆的模型提出了克隆基因的高效方法。然后将这些基因整合到果蝇的puast载体中，果蝇是一种表达载体和真核细胞系统，通常用于产生重组蛋白。材料和方法：从人类细胞中分离出UBIA，并合成互补的DNA。基于UBIA基因序列设计了一个寡核苷酸引物对，分别在正向和反向引物的5端掺入Xhoi和Xbal限制位点。然后通过PCR扩增UBIA基因，克隆到PCDNA3质粒中，并测序所得的重组质粒。随后，将基因sub clone到Puast载体中，并在S2细胞中以真核细胞系统表示。蛋白质的确定和验证是通过蛋白质印迹技术进行的。结果：通过酶菌落-PCR和酶消化实现了将UBIA基因克隆到Puast载体中的确认。克隆和子克隆技术通过酶消化验证，以及基因测序。克隆的UBIA基因与相同基因之间的身份呈现99％。，我们通过60 kDa大小的蛋白质印迹揭示了一种奇异的带纯化蛋白质。结论：通过使用PUAST载体提供的真核表达系统，可以实现更多蛋白质基因的蛋白质合成。该技术已被证明是一个合适的平台，可以在治疗，药理学和疫苗开发等各种应用中发挥作用。
使用创新方法克隆和表达 UbiA 人类基因，在 PUAST 载体中生产重组蛋白
简介：Gal4/UAS 调控的转基因系统文库已被证明是一种强大的遗传系统，可用于识别基因和定义发育途径。该系统提供了宝贵的见解，强调了动物和人类之间的进化保守性。目标：本研究的目的是克隆、表达和表征 UbiA 基因。该研究提出了一种高效的基因克隆方法，使用 UbiA -pcDNA3 基因作为哺乳动物克隆的模型。然后将这些基因整合到果蝇的 PUAST 载体中，这是一种常用于生产重组蛋白的表达载体和真核细胞系统。材料和方法：从人细胞中分离 UbiA，并合成互补 DNA。根据 UbiA 基因序列设计寡核苷酸引物对，分别在正向和反向引物的 5' 端加入 XhoI 和 Xbal 限制位点。然后通过 PCR 扩增 UbiA 基因，克隆到 pcDNA3 质粒中，并对得到的重组质粒进行测序。随后将该基因亚克隆到PUAST载体中，在真核细胞系统中S2细胞中表达，通过Western印迹技术进行蛋白测定和验证。结果：通过菌落PCR和酶切验证UbiA基因克隆到PUAST载体中，通过酶切和基因测序验证克隆和亚克隆技术。克隆的UbiA基因与同源基因的同一性为99%。Western印迹结果表明纯化的蛋白为一条60kDa的单条带。结论：利用PUAST载体提供的真核表达系统可以实现更多UbiA基因的蛋白合成，该技术已被证明是一个合适的平台，可用于治疗学、药理学和疫苗开发等各种应用。
转化相关的重组（TAR）克隆及其在基因功能上的应用；基因组结构和进化；生物技术和生物医学
转化相关的重组（TAR）克隆代表了一种独特的工具，可以选择性，高效地从复杂的基因组（例如动物和植物）和简单基因组（例如细菌和病毒）中恢复给定数百KB的给定染色体片段。该技术利用了酵母菌酿酒酵母中高水平的同源重组。在这篇综述中，我们总结了先前针对复杂基因组开发的开拓性焦油克隆技术的多个应用，用于功能，进化和结构研究，并扩展了经过修改的焦油版本以分离生物合成基因簇（BGC），从微生物中分离出生物合成的属性，这些属性是新型的构造和工业构造的综合构造，并为工具制造了工具以及工具工程，并构成了工程工程的工程，以实现工程的工程，以实现工程的工程，以实现工程的工程构造，以实现工程构造的工具。疫苗。焦油克隆被改编为用于基础研究的合成微生物基因组组装的可靠方法。在这篇综述中，我们还讨论了焦油克隆与HAC（人造染色体）的结合如何以及基于CRISPR的技术可能有助于未来。
使用体细胞核转移的躯体细胞核转移产生基因核的核细胞核转移生成
牲畜的遗传工程（GE）最初是主要使用核对核微注射到Zygotes（1985-1996）的。由于较低的整合效率，由于随机整合而导致的异常转基因表达以及在转基因创始动物中存在遗传镶嵌物，因此该技术的应用受到限制。尽管为国内物种建立了胚胎干细胞（ESC）的巨大努力，但牲畜不存在ESC GE技术。体细胞核转移（SCNT）的发展绕过了牲畜ESC的需求，并通过提供第一个基于细胞的基于细胞的遗传操作的平台来彻底改变牲畜转基因领域。自多莉（Dolly）诞生以来近二十年（1996 - 2013年），SCNT是产生敲除和敲除牲畜的唯一方法。新一代基因编辑技术的CRISPRS/CAS9系统的到来使我们能够轻松有效地引入精确的基因组修饰。这种技术进步加速了SCNT的GE牲畜的产生，并恢复了合子微观渗透，作为重要的GE方法。SCNT技术的主要优点是能够在动物产生之前体外确认所需的遗传修饰。还可以测试编辑的细胞的潜在脱靶突变。此外，这种方法消除了合子微观渗透后经常观察到的遗传镶嵌的风险。复制（2021）162 F11 – F22尽管效率低，但SCNT还是世界上许多实验室的完善程序，并将继续在GE牲畜领域发挥重要作用。