2.1 微生物.................................... 17 2.2 培养基组成和实验程序。 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ... 22 2.3.5.1 RN A 测定.................................................................................................................................................. 25 2.3.5.2 DN A 测定.................................................................................................................................. .. • ................................................................................................................. 25 2.3.6 蛋白质估算....................................................................................................................................... .................................................................................. 26 2.3.7 NADH 和 NADPH 测定 ...................................... 27
2.1 微生物................................... 17 2.2 培养基组成和实验程序. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19 2.3.4 气体分析. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26 2.3.7 NADH 和 NADPH 的测定 . . . . 27
参考文献1。en ISO 11133:2014+AMD1:2018+AMD2:2020。 食物,动物饲料和水的微生物学 - 制备,生产,存储和性能测试。 2。 ISO 14189:2013。 水质 - 灌注梭菌的枚举 - 使用膜过滤的方法。 3。 ISO 7937:2004。 食物和动物喂养物质的微生物学 - 检测梭状芽胞杆菌的水平方法 - 菌落计数技术。 4。 Rapporti Istisan 07/5 ISSA 005B Rev.00。 确定性DI梭状芽胞杆菌(Sucque provenienti o污染da acque浅表表)。 5。 downes F.P.和K. Ito(2001)食品微生物学检查的纲要。 第4版。 美国公共卫生协会,华盛顿特区6。 Haushild,A.H.W。和A. Hilsheimer(1974)对perfrigens枚举的评估和修改。 应用。 微生物。 27:78。 7。 Harmon,S.M.,O.A。 Kautler和J.T. Peeler(1971)改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22:688。 8。 Shahidi,SA。 和AR Ferguson(1971)App。 微生物。 21:500-606。en ISO 11133:2014+AMD1:2018+AMD2:2020。食物,动物饲料和水的微生物学 - 制备,生产,存储和性能测试。2。ISO 14189:2013。 水质 - 灌注梭菌的枚举 - 使用膜过滤的方法。 3。 ISO 7937:2004。 食物和动物喂养物质的微生物学 - 检测梭状芽胞杆菌的水平方法 - 菌落计数技术。 4。 Rapporti Istisan 07/5 ISSA 005B Rev.00。 确定性DI梭状芽胞杆菌(Sucque provenienti o污染da acque浅表表)。 5。 downes F.P.和K. Ito(2001)食品微生物学检查的纲要。 第4版。 美国公共卫生协会,华盛顿特区6。 Haushild,A.H.W。和A. Hilsheimer(1974)对perfrigens枚举的评估和修改。 应用。 微生物。 27:78。 7。 Harmon,S.M.,O.A。 Kautler和J.T. Peeler(1971)改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22:688。 8。 Shahidi,SA。 和AR Ferguson(1971)App。 微生物。 21:500-606。ISO 14189:2013。水质 - 灌注梭菌的枚举 - 使用膜过滤的方法。3。ISO 7937:2004。 食物和动物喂养物质的微生物学 - 检测梭状芽胞杆菌的水平方法 - 菌落计数技术。 4。 Rapporti Istisan 07/5 ISSA 005B Rev.00。 确定性DI梭状芽胞杆菌(Sucque provenienti o污染da acque浅表表)。 5。 downes F.P.和K. Ito(2001)食品微生物学检查的纲要。 第4版。 美国公共卫生协会,华盛顿特区6。 Haushild,A.H.W。和A. Hilsheimer(1974)对perfrigens枚举的评估和修改。 应用。 微生物。 27:78。 7。 Harmon,S.M.,O.A。 Kautler和J.T. Peeler(1971)改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22:688。 8。 Shahidi,SA。 和AR Ferguson(1971)App。 微生物。 21:500-606。ISO 7937:2004。食物和动物喂养物质的微生物学 - 检测梭状芽胞杆菌的水平方法 - 菌落计数技术。4。Rapporti Istisan 07/5 ISSA 005B Rev.00。确定性DI梭状芽胞杆菌(Sucque provenienti o污染da acque浅表表)。5。downes F.P.和K. Ito(2001)食品微生物学检查的纲要。第4版。 美国公共卫生协会,华盛顿特区6。 Haushild,A.H.W。和A. Hilsheimer(1974)对perfrigens枚举的评估和修改。 应用。 微生物。 27:78。 7。 Harmon,S.M.,O.A。 Kautler和J.T. Peeler(1971)改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22:688。 8。 Shahidi,SA。 和AR Ferguson(1971)App。 微生物。 21:500-606。第4版。美国公共卫生协会,华盛顿特区6。Haushild,A.H.W。和A. Hilsheimer(1974)对perfrigens枚举的评估和修改。应用。微生物。27:78。 7。 Harmon,S.M.,O.A。 Kautler和J.T. Peeler(1971)改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22:688。 8。 Shahidi,SA。 和AR Ferguson(1971)App。 微生物。 21:500-606。27:78。7。Harmon,S.M.,O.A。 Kautler和J.T. Peeler(1971)改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22:688。 8。 Shahidi,SA。 和AR Ferguson(1971)App。 微生物。 21:500-606。Harmon,S.M.,O.A。Kautler和J.T. Peeler(1971)改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22:688。 8。 Shahidi,SA。 和AR Ferguson(1971)App。 微生物。 21:500-606。Kautler和J.T.Peeler(1971)改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。应用。微生物。22:688。8。Shahidi,SA。 和AR Ferguson(1971)App。 微生物。 21:500-606。Shahidi,SA。和AR Ferguson(1971)App。微生物。21:500-606。
摘要:肉毒乳梭交产生肉毒杆菌毒素(BONTS),导致一种罕见但致命的食物中毒类型,称为食物中毒。本综述旨在提供有关细菌,孢子,毒素和肉毒杆菌的信息,并描述使用物理治疗(例如,加热,压力,辐照和其他新兴技术)的使用来控制食物中这种生物学危害。由于这种细菌的孢子可以抵抗各种严酷的环境条件,例如高温,因此,A型肉毒杆菌孢子的12杆孢子的热灭活仍然是食品商业灭菌的标准。然而,非热物理治疗的最新进展是对热灭菌的替代方案,并有所限制。低 - (<2 kgy)和培养基(3-5 kgy) - 剂量电离辐射分别有效地减少营养细胞和孢子的对数。但是,需要非常高的剂量(> 10 kgy)才能灭活BONT。高压加工(HPP)即使在1.5 GPA时也不会使孢子失活,并且需要热量组合才能实现其目标。其他新兴技术也对植物细胞和孢子表现出了一些希望。但是,它们对肉毒杆菌的应用非常有限。与细菌有关的各种因素(例如,营养阶段,生长条件,损伤状况,细菌类型等)食物矩阵(例如成分,状态,pH,温度,AW等。)和该方法(例如电源,能量,频率,从源到目标等的距离等)影响这些处理对肉毒杆菌的效率。此外,不同物理技术的作用方式是不同的,这提供了结合不同物理治疗方法以实现添加剂和/或协同作用的机会。本评论旨在指导决策者,研究人员和教育者使用物理治疗来控制肉毒杆菌危害。
摘要:群集定期间隔短的短膜重复序列(CRISPR)/CAS(CRISPR相关蛋白质)9工具已经彻底改变了生物学 - 已经构建了几个高效的高效工具,这些工具已导致能够快速设计模型细菌,例如,Escherichia coli。但是,CRISPR/CAS9工具的使用已落后于非模型细菌,阻碍了工程工作。在这里,我们开发了改进的CRISPR/CAS9工具,以实现与工业相关细菌丙梭菌的有效快速代谢工程。以前的努力在C. actobutylicum中实施CRISPR/CAS9系统已受到缺乏严格控制的诱导系统以及大质粒的影响,从而阻碍了较低的转化效率。我们从艰难梭菌的木糖诱导系统控制下成功地将Cas9基因从链球菌诱导的系统控制到了基因组,然后我们表明,这导致了一个紧密控制的系统。然后,我们优化了编辑盒的长度,从而产生了一个小的编辑质粒,该质粒还包含UPP基因,以便使用UPP /5-氟尿嘧啶的反式系统快速失去质粒。我们使用该系统执行LDHA和PTB-BUK操纵子的单独和顺序缺失。
DBT-NIAB 科学家研究印度奶牛以获取治疗结核病的药物 结核病 (TB) 是全球主要死亡原因之一。2018 年全球约有 1000 万新发病例和 150 万人死亡。它是艾滋病毒感染者的主要杀手,也是与抗菌素耐药性 (AMR) 相关死亡的主要原因。印度是该病负担最重的国家,估计发病率约为 269 万例。据报道,相当一部分人类结核病是由牛分枝杆菌引起的,牛分枝杆菌是牛结核病 (牛结核病或 BTB) 的主要病原菌。换句话说,牛是人畜共患结核病的主要宿主。更糟糕的是,牛的结核病也是由人类结核杆菌 M. Tuberculosis 引起的。由于多种原因,牛结核病和人畜共患结核病对印度的健康提出了独特的挑战。
拜氏梭菌 (Clostridium beijerinckii) 是一种很有前途的丁醇工业生产微生物,但其丁醇产量低且缺乏高效的基因工程工具包。一些负责 Spo0A 磷酸化的组氨酸激酶 (HK) 已被证实是调控溶剂型梭菌 (如丙酮丁醇梭菌) 丁醇生物合成的重要功能组分,但尚未在拜氏梭菌中进行有关 HK 的研究。本研究通过序列比对,筛选出 6 个已注释但尚未鉴定的候选 HK 基因,这些基因与丙酮丁醇梭菌的基因具有部分同源性(不低于 30%)。利用基于 CRISPR-Cas9n 的基因组编辑技术删除这些 HK 基因的编码区。 cbei2073 和 cbei4484 的缺失导致丁醇生物合成发生显著变化,与野生型相比,丁醇产量分别增加了 40.8% 和 17.3% (13.8 g/L 和 11.5 g/L vs. 9.8 g/L)。观察到丁醇生产速率更快,丁醇生产率分别大幅提高了 40.0% 和 20.0%,表明这两个 HK 在调节 C. beijerinckii 细胞代谢中起重要作用。此外,两个 HKs 失活菌株的孢子形成频率分别降低了 96.9% 和 77.4%。与野生型相比,另外四个 HK 缺失突变菌株(包括 cbei2087、cbei2435、cbei4925 和 cbei1553)表现出的表型变化很小。本研究揭示了HKs在拜氏梭菌中孢子形成和溶剂生成中的作用,并提供了一种新的HKs工程化策略来提高代谢物的产量。本研究产生的高丁醇生产菌株在工业生物丁醇生产中具有巨大的潜力。
摘要:当前研究的目的是研究从动物粪便中回收的灌注梭菌(C. perfringens)的患病率,并确定这种分离株的抗菌敏感性。从100个分析的样品中分离出14(14/100; 14%)C。渗透分离株(从猪中从猪中收集的粪便样品中回收了十二个,从牛肉小牛的粪便样品中收集了两个)。优势基因型均为A型,所有分离株都是CPA阳性。针对灌注梭状芽胞杆菌的最有效的抗菌剂被证明是万古霉素,利福平和林霉素。还观察到对四环素(71.4%),青霉素(64.2%),红霉素(42.8%)和Enro flofflofflofflofflofflofflycilcins(71.4%)和Enro flofflofflofflofflofflycilcins(35.7%)。据我们所知,这是关于罗马尼亚食物产生动物的刺激念珠菌的患病率,表征和抗菌敏感性的第一个分析,这为动物作为抗浓度的C.渗透菌菌株的来源提供了进一步的证据。