目标:本研究对三维(3D)培养方法在富集和分离乳腺癌干细胞(BCSC)中的功效进行了比较分析。该研究比较了在母质和悬浮液中生长的多细胞球体与常用的二维(2D)单层培养方法。方法:实验涉及9天3D多细胞球体培养物,然后使用两种乳腺癌细胞系进行24小时单层培养,即MCF7和MDA-MB-231。为了评估BCSC,该研究评估了包括CD44/CD24,Vimentin和Aldh1在内的各种表面标记的表达,以及多能干细胞基因(如SOX2,OCT4,KLF4和Nanog)。另外,测量了阿霉素的耐药性和从每种方法中得出的单个细胞的能力,以在无血清悬浮培养中形成球体。结果:研究结果表明,在悬浮液中生长的3D培养多细胞球体显示出干细胞标记物和阿霉素耐药性的显着增加。此外,这些球体在无血清培养基中形成具有超过50 µm的单细胞球体具有更高的能力。结论:总的来说,与2D单层和3D单基质甲基甲基甲基甲基甲基甲基甲基酯和3D Matrigel Meths相比,这种3D培养方法在悬浮液中具有增强的BCSC,具有增强的自我更新和增殖能力。因此,这种方法可以使用任何可用的BCSC隔离方法从细胞系中隔离BCSC的关键初步步骤。关键词:乳腺癌,抗癌性,癌症干细胞,阿霉素,3D培养
摘要输卵管上皮细胞 (FTEC) 被认为是高级别浆液性卵巢癌的起源细胞。FTEC 类器官可用作该疾病的研究模型。然而,培养类器官需要补充多种昂贵生长因子的培养基。我们提出,基于输卵管成分的组合条件培养基,包括上皮细胞、基质细胞和内皮细胞,可以增强 FTEC 类器官的形成。我们从输卵管的伞部获得了两种原代培养细胞系。根据类器官生长的培养基,将它们分成常规或组合培养基组并进行比较。评估了类器官的数量和大小。定量聚合酶链反应 (qPCR) 和免疫组织化学 (IHC) 用于评估基因和蛋白质表达 (PAX8、FOXJ1、β-catenin 和干性基因)。酶联免疫吸附测定用于测量两种培养基中的 Wnt3a 和 RSPO1。将 DKK1 和 LiCl 添加到培养基中以评估它们对 beta-catenin 信号传导的影响。通过生长因子阵列评估组合培养基中的生长因子。我们发现常规培养基更有利于类器官的增殖(数量和大小)。此外,组合培养基中的 WNT3A 和 RSPO1 浓度太低,需要添加,使得成本与常规培养基相当。然而,两组的类器官形成率均为 100%。此外,与常规培养基组相比,组合培养基组的 PAX8 和干性基因表达(OLFM4、SSEA4、LGR5、B3GALT5)更高。在常规培养基中生长的类器官中 Wnt 信号明显,但在组合培养基中则不明显。发现 PLGF、IGFBP6、VEGF、bFGF 和 SCFR 在组合培养基中富集。总之,组合培养基可以成功培养类器官并增强 PAX8 和干性基因表达。然而,传统培养基对于类器官增殖而言是更好的培养基。两种培养基的费用相当。使用组合培养基的好处需要进一步探索。
大脑可以说是人体最复杂的部分形式和功能。对调节其正常生理和病理生理的分子机制尚不清楚。缺乏知识在很大程度上源于人脑的无法访问的本质以及动物模型的局限性。因此,脑部疾病很难理解,甚至更难治疗。产生人类多能干细胞(HPSC)衍生的二维(2D)和3维(3D)神经培养的最新进展提供了一个可访问的系统来模拟人脑。基因编辑技术(例如CRISPR/CAS9)的突破将HPSC进一步提升到了可遗传障碍的实验系统中。强大的遗传筛选,以前保留用于模型生物和转化的细胞系,现在可以在人神经细胞中进行。结合了快速扩展的单细胞基因组学工具包,这些技术进步最终创造了使用功能基因组学研究人脑前所未有的机会。本综述将总结在HPSCS衍生的2D神经培养物和3D脑器官中应用基于CRISPR的遗传筛查的目前进展。我们还将评估所涉及的关键技术,并讨论其相关的实验考虑和未来应用。
• Human immunodeficiency virus cultures • Highly pathogenic avian influenza virus cultures • Japanese Encephalitis virus cultures • Junin virus • Kyasanur Forest disease virus • Lassa virus • Machupo virus • Marburg virus • Monkeypox virus • Mycobacterium tuberculosis cultures • Nipah virus • Omsk hemorrhagic fever virus • Poliovirus cultures • Rabies virus • Rickettsia prowazekii cultures • Rickettsia rickettsia cultures • Rift Valley fever virus • Russian spring-summer encephalitis virus • Sabia virus • Shigella dysenteriae type 1 cultures • Tick-borne encephalitis virus cultures • Variola virus • Venezuelan equine encephalitis virus • West Nile virus培养物•黄热病病毒培养•耶尔森氏念珠菌培养
患者衍生的癌症类器官(PDOS)具有个性化治疗选择和改善患者预后的巨大希望。但是,在标准文化平台中生成足够数字的PDO来测试疗法是一项挑战。这一挑战对于胰腺导管腺癌(PDAC)特别急切,在该胰腺导管腺癌(PDAC)中,大多数患者在晚期患有不可切除的肿瘤的晚期诊断,并且患者组织的形式是针头活检。描述了使用有限量的PDAC活检可用的组织或PDO进行测试疗法的微流体设备的开发和表征。证明微流体PDO在表型和基因型上与金色标准的Matrigel类器官相似,其优点为1)球体均匀性,2)最小的细胞数需求,3)不依靠Matrigel。通过测试对几种化学疗法的PDO响应,包括糖原合酶激酶(GSKI)的抑制剂,可以证明微流体PDOS的效用。此外,微氟机培养物用于测试由NK细胞组成的免疫疗法的有效性与新型生物学结合。总而言之,我们的微流体装置对基于癌症活检的个性化肿瘤学有很大的好处,并且将来可能会发展成为化学疗法或免疫疗法治疗的伴侣诊断。
近年来,患者来源的原代细胞培养物在癌症临床前检测(包括药物筛选和遗传毒性研究)中的应用有所增加。然而,它们的转化价值受到多种限制的制约,包括可能由培养条件引起的多变性。在这里,我们表明常用于繁殖原代黑色素瘤培养物的培养基组成限制了它们对其肿瘤来源的代表性和细胞可塑性,并改变了它们对治疗的敏感性。事实上,我们建立并比较了不同黑色素瘤患者的培养物,这些培养物在低酪氨酸(Ham's F10)或高酪氨酸(补充酪氨酸的 Ham's F10 或 RPMI1640 或 DMEM)培养基中平行繁殖。酪氨酸是黑色素生物合成的前体,该过程在分化的黑色素细胞和黑色素瘤细胞中特别活跃。出乎意料的是,我们发现高酪氨酸浓度会促进早期表型向间充质样或衰老样表型转变,并阻止具有分化特征的黑色素瘤细胞培养物的建立,我们发现这些特征在人类临床活检中经常出现。此外,在这些培养条件下出现的侵袭性表型似乎是不可逆的,并且如预期的那样,与对 MAPKi 的内在抗性有关。与此形成鲜明对比的是,分化的黑色素瘤细胞培养物在低酪氨酸培养基中增殖时保留了它们的表型,更重要的是它们的表型可塑性,这是黑色素瘤细胞的一个关键特征。总之,我们的研究结果强调了在低酪氨酸培养基中培养黑色素瘤细胞的重要性,以保持其表型的起源身份和细胞可塑性。
文化”指导了国家对早期农业生物技术的反应,以及粮食作物中基因组编辑的出现。我们发现,“基于产品”的调查方法的各个方面在美国的生物安全框架中基本上维持了,并且英国和德国的方法在不同阶段的不同阶段结合了“基于过程”和“程序化”元素,这些元素涉及基因组编辑的科学和社会政治新颖性,以介绍为Varying Steles。我们试图通过探索如何围绕新兴的农业生物技术实现或限制公共推理的变化机会结构来解释这些稳定和改变的模式。通过展示机会结构和监管文化如何在长期内相互作用,我们提供了见解,以帮助我们解释基因组编辑治理中的当前和不断发展的动态以及农业生物技术的长期发展。
在许多情况下,从基础神经科学到生物医学应用,正确识别突发事件都至关重要。然而,文献中可以找到的突发检测方法都没有被广泛用于此任务。作为传统技术的替代方案,提出了一种用于实时突发检测的新型神经形态方法,并在体外培养采集的数据上进行了测试。该系统由一个神经形态听觉传感器组成,它将从电生理记录中获得的输入信号转换为尖峰并将其分解为不同的频带。传感器的输出被发送到在 SpiNNaker 板上实现的经过训练的尖峰神经网络,该网络可辨别突发和非突发活动。这种数据驱动的方法与 8 种不同的传统基于尖峰的方法进行了比较,解决了它们的一些缺点,例如能够检测高频和低频事件并以在线方式工作。使用所提出的系统,在检测到的事件数量、平均突发持续时间和相关性方面获得了与当前最先进的方法相似的结果,也受益于
摘要:过去已经研究了细菌的生长和行为,但是尽管对无数过程的影响,包括生物膜形成,但对船员健康的影响很少,但几乎没有将重点引向细胞大小。分析了在国际空间站(ISS)上培养在不同材料和媒体上培养的铜绿假单胞菌的特征上清液等分试样,作为太空生物膜项目的一部分。在该实验中,铜绿假单胞菌是在微重力的(与地球对照匹配的)中生长的,在改良的人工尿液培养基(Maumg-high Pi)或补充了KNO 3的LB Lennox中,并评估了其在六种不同材料上的生物膜形成。在孵育一二,两天和三天后,ISS船员通过固定在多聚甲醛中终止了实验的子集,并在此处介绍了上清液的等分试样进行浮游细胞尺寸研究。通过在油浸入下的相对造影显微镜,moticam 10+数码相机和斐济图像分析程序下使用相对造影显微镜,获得了飞行后的测量。统计比较,以确定使用Kruskal – Wallis和Dunn检验的哪些治疗方法在细胞尺寸上产生了显着差异。在LBK和Maumg-High Pi中,培养物中存在的材料存在统计学上的显着差异。与此一起,数据还按重力条件,培养基和孵育天数分组。总而言之,在微重力上生长的培养物上观察到较小的细胞,并且细胞大小随孵育时间的函数和培养物的生长而变化。在微重力中培养的浮游细胞的比较显示细胞长度降低(根据材料,从4%到10%)和直径(根据材料,根据材料的1%到10%)就其匹配的地球对照组而言,需要注意的是,在给定时间,培养物可能在其生长曲线上可能在不同的生长曲线上处于不同的位置。我们在此处描述了这些变化,以及在机组人员健康和潜在应用方面对人类太空旅行的可能影响。
IATA and DOT Indicative Category A List CATEGORY A PATHOGENS, INDICATIVE OF INFECTIOUS SUBSTANCES, AFFECTING HUMANS (UN2814) WHEN TRANSPORTED IN ANY FORM UNLESS OTHERWISE INDICATED: Bacillus anthracis (cultures only) Brucella abortus , Brucella melitensis , Brucella suis (cultures only) Burkholderia mallei , Burkholderia pseudomallei (cultures only) Chlamydia psittaci avian strains (cultures only) Clostridium botulinum (cultures only) Coccidioides immitis (cultures only) Coxiella burnetii (cultures only) Crimean-Congo hemorrhagic fever virus Dengue virus (cultures only) Eastern equine encephalitis virus (cultures only) Ebola virus Escherichia coli , verotoxigenic (仅培养)屈肌病毒francisella tularensis(仅培养)瓜纳里托病毒hantaan病毒hantavirus引起肾脏综合征发烧的肾脏综合征hendra病毒肝炎病毒(仅培养物)仅是培养的疱疹病毒(仅培养),仅是培养的培养基(培养),培养了(培养)人类(培养)人类(培养)人类(培养)人(培养)人(培养)病毒(培养物)。脑炎病毒(仅培养)