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实验动物
摘要：电穿孔动物基因敲除系统技术（TAKE）是一种简单有效的方法，利用成簇的规律间隔短回文重复序列（CRISPR）/CRISPR 相关蛋白 9（Cas9）系统生成转基因小鼠。为了增强电穿孔在小鼠基因编辑中的多功能性，针对玻璃化冷冻小鼠胚胎优化了电条件，并将其应用于广泛使用的近交系（C57BL/6NCr、BALB/cCrSlc、FVB/NJcl 和 C3H/HeJJcl）的新鲜胚胎。电脉冲设置（穿孔脉冲：电压，150 V；脉冲宽度，1.0 ms；脉冲间隔，50 ms；脉冲数，+4；转移脉冲：电压，20 V；脉冲宽度，50 ms；脉冲间隔，50 ms；脉冲数，±5）对于玻璃化冷冻加温的小鼠胚胎是最佳的，其可以有效地将 gRNA/Cas9 复合物递送到受精卵中而无需透明带变薄过程并编辑目标位点。这些电条件在广泛使用的近交系小鼠中有效地产生了转基因小鼠。此外，使用间隙为 5 mm 的电极进行电穿孔可以在 5 分钟内引入超过 100 个胚胎，而无需特殊的预处理和复杂的技术技能，例如显微注射，并且在产生的后代中表现出较高的胚胎发育率和基因组编辑效率，从而快速高效地产生基因组编辑小鼠。本研究中使用的电条件用途广泛，可以更轻松高效地生成转基因小鼠，有助于了解人类疾病和基因功能。关键词：CRISPR/Cas9、电穿孔、冻融胚胎、基因组编辑
实验动物
摘要：自发性hhy小鼠出现脑积水和皮层下异位，且已鉴定出Ccdc85c基因突变。为了比较Ccdc85c在不同物种中的作用，我们建立了Ccdc85c KO大鼠并研究了其病理表型。Ccdc85c KO大鼠是通过转录激活因子样效应核酸酶（TALEN）的基因组工程改造而来的。KO大鼠的Ccdc85c基因约350 bp缺失，缺乏CCDC85C蛋白表达。KO大鼠表现出非阻塞性脑积水、皮层下异位和颅内出血。KO大鼠具有许多与hhy小鼠相似的病理特征。这些结果表明CCDC85C在大鼠大脑发育中起着重要作用，且CCDC85C在大鼠和小鼠大脑中的作用相似。关键词: Ccdc85c, 脑积水, 大鼠, 皮层下异位
实验动物
摘要：小鼠尿液中含有人尿中未发现的主要尿蛋白（MUP）。因此，即使健康的小鼠也表现出蛋白尿，与健康的人不同，将小鼠用作人类疾病的模型变得具有挑战性。也未知尿液分析的量子是否可以精确地测量含有MUP的尿液中的蛋白质浓度。为了解决这些问题，我们通过使用Cas9蛋白和两个指导RNA去除MUP基因簇来产生MUP敲除（MUP-KO）小鼠，并表征了这些小鼠中的尿蛋白。，我们使用蛋白质定量试剂盒和量油盒测量了MUP-KO和野生型小鼠中的尿蛋白浓度。我们还使用SDS-PAGE和二维电泳（2DE）检查了尿蛋白组成。MUP-KO小鼠（17.9±1.8 mg/dl，平均值±SD，n = 3）的尿蛋白浓度明显低（P <0.001）（p <0.001）（p <0.001）。这种差异并未反映在量强壮的值中，这可能是由于对MUP的敏感性低。这表明用量油量有限，可以精确地测量MUP的变化。SDS-PAGE和2DE证实，像人类一样，MUP-KO小鼠的尿液中没有MUP，而野生型小鼠的尿液中有大量的MUP。MUP在2DE中的掩蔽效果将使尿蛋白，尤其是低分子量蛋白的明确比较。因此，MUP-KO小鼠可以为人类尿液分析提供有用的模型。关键词：基因组编辑，敲除模型，主要尿蛋白，尿液分析
实验和理论研究...
4.2.1 弹丸的行为 ................................................................................................ 164 4.2.2 单球阻力系数 .............................................................................................. 164 4.2.3 弹丸减速 ................................................................................................ 165 4.2.4 拟合时间范围数据 ............................................................................................. 166 4.2.5 推导每颗弹丸的速度和能量 ............................................................................. 167 4.2.6 弹丸云长度 ...................................................................................................... 168 4.2.7 最佳数据模型 ............................................................................................. 169
实验和临床心理药理学
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