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s y n t h e t i c b i o lo g y lo g y yarrowia lipolytica代谢，以有效合成从烧瓶到半纤维量表
Itaconic Acid是一种具有广泛应用的新兴平台化学物质。iTaconic酸目前是由曲霉通过生物发酵产生的。然而，曲霉是一种真菌病原体，需要额外的形态控制，使工业尺度上的岩性酸产生有问题。在这里，我们将普遍认为是安全的（GRAS）酵母Yarrowia脂溶剂来重新编程，以产生竞争性的iTaconic酸的产生。防止碳汇成脂质积聚后，我们在微调其生物合成途径的同时评估了线粒体内外的Itaconic酸的产生。然后，我们通过下调NAD +依赖性异位酸异位酸脱氢酶，通过弱启动子，RNA干扰或CRISPR干扰来模仿氮恢复条件下氮的限制。最终，我们在1升生物反应器中优化了批量培养的发酵参数，并在半脂肪量表上以50升生物反应器中的1升生物反应器中的130.1克滴度和94.8克每升产生了含酸的发酵参数。我们的发现提供了有效的方法来利用GRAS微生物Y.脂溶剂来用于竞争性工业规模生产Itaconic Acid。
OIV-MA-AS312-01A：R2016
注意：对于含有特别高浓度铵离子的葡萄酒，可以在上述条件下重新蒸馏馏出物，但用 1 mL 10/100 稀释的硫酸代替氢氧化钙悬浮液。3.4.1 ABV 低于或等于 1.5% vol 的饮料的程序 使用校准的烧瓶取 200 mL 饮料样品。注意饮料的温度。将其倒入蒸馏设备的烧瓶中或蒸汽蒸馏设备的起泡器中。用 5 mL 水冲洗校准的烧瓶四次，并将其添加到设备的烧瓶或起泡器中。加入 10 mL 2 M 氢氧化钙悬浮液，如有必要，在蒸馏时加入沸点调节剂（浮石等）。在 100 mL 校准烧瓶中收集蒸馏液，蒸馏液体积约为 75 mL，蒸汽蒸馏液体积约为 98-99 mL。在蒸馏液与初始温度相差 ± 2 °C 时，用蒸馏水补足至 100 mL。小心地以圆周运动混合。小心地以圆周运动混合。
1. 实验部分 1.1. 材料 1.2. 表征 ...
CTA-UPy 3 的合成在配有蛋形磁力搅拌器的三颈圆底烧瓶中在氮气气氛下进行。将抗坏血酸钠（93 mg，0.47 mmol）、五水硫酸铜（II）（48 mg，0.19 mmol）、叠氮化物官能化的 RAFT 剂 2（800 mg，1.79 mmol）和炔丙基-UPy 1（1g，2.90 mmol）加入到反应烧瓶中，并用氮气冲洗烧瓶 3 次。将无水 DMF（12 mL）注入反应混合物中并在室温下搅拌。一小时后，混合物的颜色从绿褐色变为黄色。三天后，将混合物倒入 150 mL 0.1M HCl 中，并用 DCM 洗涤三次。然后用 150 mL 盐水洗涤有机相一次，用 MgSO 4 干燥并蒸发溶剂。使用柱色谱法（40:1 氯仿/甲醇作为洗脱剂）获得纯产品。
将质粒 DNA 和杆状病毒 DNA 共转染（同源重组）到 SF9 细胞中
1. 每瓶接种 5x10 6 个 SF9 细胞，另留一个瓶作为阴性对照。2. 按照 A 部分中概述的方法，使用以下体积和量：10uL 杆状病毒 DNA（0.1ug/uL）2ug 质粒 DNA 1mL 转染缓冲液 B 5mL 未添加的 Grace 培养基洗涤液 1mL 转染缓冲液 A 5mL 未添加的 Grace 培养基洗涤液 7mL TMN/FH
定量分析
i）用给定的酸溶液冲洗干净的鼻腔ii）夹具倾斜架上的尺寸。使用漏斗用酸溶液填充尺寸。将酸溶液倒入Reniscus水平后必须去除此漏斗。iii）避免在底片内的溶液中避免用碱或基本溶液冲洗干净的2ocm³或25厘米的移液器，给定v）液化剂20厘米或25厘米的碱或底座或底座成一个干净的缝隙瓶。应在半月板一级准确阅读移液器。vi）切勿用要放置的溶液冲洗锥形瓶。锥形瓶应干净，但不一定干燥。vii）将2或3滴指示剂加到圆锥瓶中的底座或碱。viii）从滴定表上的弯月板级别写下最初的质量质量读数。必须通过将酸溶液逐渐从瓶中运行到烧瓶中的碱溶液，并在添加酸时轻轻摇动烧瓶，从而将读数至少放在十进制IX）滤液中。x）立即停止滴定，烧瓶中溶液的颜色发生了变化。这称为终点。xi）重复滴定3 0R 4次，并根据结果计算平均过滤器值。读数的差异和平均滤波器值不得超过±0.2。指示器在滴定过程中使用染料，以指示其颜色的变化，当达到终点时。指示剂通常是有机酸或碱，它们在溶液中稍微电离以产生确定颜色是否变化的离子。
SC14-16定量化学，平衡和燃料电池
产量，理论产量，实际新的，百分比的收益率，在经济上，副产品，体积瓶，移液器，小瓶，摩尔比率，Avogadro定律，摩尔气体体积，可逆反应，封闭系统，动态平衡，反应途径，反应途径。