XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search SystemHEK
具有提高AAV生产率的新的T抗原负HEK293细胞系
图1Hekexpress®细胞的基因型表征。（a）使用靶向T抗原编码序列的引物（集1）的引物，跨Hekexpress®基因组的TLA序列覆盖率。绘图表明质粒的积分位点位于3染色体等效物（CHR3）上。（b）使用针对T抗原编码序列（集1）或CHR3（集3和4）的引物（集3和4）的引物（集3和4）的引物，（b）在人类CHR3中整合基因座的TLA序列覆盖率。 集合1的覆盖范围表明，与人类HG38基因组相比，Hekexpress®基因组（绿色箭头）中的550 kb缺失。 集合3和4的覆盖范围确认了综合质量PRTAK的连接。 （c）PRTAK质粒图最初集成在Hekexpress®细胞系中。 大小的T抗原序列在橙色的基因中，在深紫色和grnas（grna_beginning和grna_end）中指示。 （d）Chr3等效（红色）的图与550 kb缺失以及包含T抗原序列的PRTAK质粒的整合。 由TLA证实的质粒 - 染色体连接均以蓝色指示。 Hek，人类胚胎肾； TLA，靶向基因座放大。（b）在人类CHR3中整合基因座的TLA序列覆盖率。集合1的覆盖范围表明，与人类HG38基因组相比，Hekexpress®基因组（绿色箭头）中的550 kb缺失。集合3和4的覆盖范围确认了综合质量PRTAK的连接。（c）PRTAK质粒图最初集成在Hekexpress®细胞系中。大小的T抗原序列在橙色的基因中，在深紫色和grnas（grna_beginning和grna_end）中指示。（d）Chr3等效（红色）的图与550 kb缺失以及包含T抗原序列的PRTAK质粒的整合。由TLA证实的质粒 - 染色体连接均以蓝色指示。Hek，人类胚胎肾； TLA，靶向基因座放大。
HEK-293细胞系中的定量分析
不可消除的细胞会产生胞质Ca 2+信号，以响应G蛋白偶联受体和生长因子受体的刺激（Berridge等，2003； Clapham，2007）。通常，在没有外部Ca 2+的情况下，可以在短时间内观察到这些Ca 2+信号，这表明胞质Ca 2+浓度（[[Ca 2+] Cyt）的潜在增加的主要机制是Ca 2+从内质含量网状（Barak和Parak and Parekh，Parekh，2020）中释放出Ca 2+的释放。Along with mitochondria, the clearance of cytosolic Ca 2+ by the plasma membrane Ca 2+ ATPase (PMCA) and the Na + -Ca 2+ -exchanger (NCX) reduces the amount of Ca 2+ that is available to the sarco/endoplasmic reticulum Ca 2+ ATPase (SERCA) for re fi lling ER Ca 2+ stores after each Ca 2+ spike, and as a结果，Ca 2+信号在无Ca 2+的解决方案中（Barak and Parekh，2020年）后降低。为了产生稳定的高胞质Ca 2+尖峰，因此是必不可少的，细胞外Ca 2+的大孔是必须的，这是由商店经营的Ca 2+进入（SOCE）实现的，之所以称为刺激触发的刺激触发，从而降低ER Ca 2+水平（Putney，2017; Lewis，2017; Lewis，2020 2020）。通常，SOCE生成
CRISPR/Cas9 介导的 HuTu-80 和 HEK 293T 细胞系中的 LRP10 敲除
在患有家族性帕金森病 (PD)、帕金森病性痴呆 (PDD) 和路易体痴呆 (DLB) 的患者中，已发现低密度脂蛋白相关蛋白 10 基因 (LRP10) 中罕见的致病变异 (Quadri et al., 2018)。此外，对携带不同 LRP10 变异的患者的尸检分析显示，脑干、边缘和皮质区域中存在严重的 α-突触核蛋白相关病理负担，表现为路易体 (LB) 和路易体神经突 (LN) (Quadri et al., 2018)。重要的是，功能研究表明，最初发现的 LRP10 致病变异影响 LRP10 转录本表达和稳定性、蛋白质稳定性或蛋白质定位，表明功能丧失 (LoF) 是一种共同的致病机制 (Quadri et al., 2018)。此外，早期使用 LRP10 过表达模型的研究报告称 LRP10 参与细胞内运输途径 (Boucher et al., 2008; Brodeur et al., 2009, 2012; Doray et al., 2008). 尽管有这些数据，但对于内源性 LRP10 在健康和疾病中的功能知之甚少，部分原因是缺乏体外 LRP10 敲除 (KO) 模型。
海报：resDNASEQTM HEK293 和 E1A 片段长度定量分析：基因治疗和疫苗制造中 GMP 批签发的综合解决方案
目的生物制药产品必须限制宿主细胞残留 DNA 污染物，以防止对患者产生基因毒性和免疫毒性风险。现有的残留宿主细胞 DNA 监管指南要求每剂量 ≤10ng，DNA 大小为 200bp 或更低。在病毒载体生产中，衣壳化 DNA 的数量、大小和致癌序列是额外的关注点。为了满足这一需求，赛默飞世尔科技开发了两种旨在满足监管指导的互补检测方法。Applied Biosystems™ resDNASEQ™ 定量 HEK293 DNA 试剂盒可定量总残留宿主细胞 DNA，Applied Biosystems™ resDNASEQ™ E1A DNA 片段长度试剂盒可对针对 E1A 致癌基因的短（86bp）、中（200bp）和长（476bp）片段进行大小分析。
设计基于 HEK-293T 外泌体的递送平台，实现有效的肿瘤靶向化疗/内照射联合治疗
摘要 外泌体是由哺乳动物细胞主动内源性分泌的纳米级单层膜囊泡。目前，具有肿瘤靶向成像和治疗潜力的多功能外泌体引起了癌症研究的广泛兴趣。在此，我们开发了一个基于HEK-293T外泌体的多功能靶向递送平台，通过改造HEK-293T细胞以表达与αv整合素特异性iRGD肽和酪氨酸片段融合的明确外泌体膜蛋白（Lamp2b）。该平台装载阿霉素（Dox）并使用氯胺-T方法用放射性碘-131（ 131 I）标记。共聚焦成像和流式细胞术证明iRGD外泌体能高效靶向和递送Dox至整合素αvβ3阳性的间变性甲状腺癌（ATC）细胞，而体内用131I标记后，单光子发射计算机断层扫描-计算机断层扫描证实其具有优异的肿瘤靶向能力。此外，静脉注射该载体可将Dox和131I特异性地递送至肿瘤组织，在8505C异种移植小鼠模型中显著抑制肿瘤生长，同时表现出生物安全性且无副作用。这些刚刚开发的多功能外泌体（表示为Dox@iRGD-Exos-131I）为目前ATC的治疗提供了新的见解，并具有提高对多种整合素αvβ3过表达肿瘤的治疗效果的巨大潜力。关键词：外泌体，iRGD肽，放射性碘-131，未分化甲状腺癌，肿瘤靶向，联合治疗
2021 年年度报告 - 投资者关系 | NEMETSCHEK
2021 年，我们延续了 Nemetschek 集团的成功故事，并再次创造了辉煌的一年。收入、收益和盈利能力创下新高，我们甚至能够超越我们已经设定的 2021 财年目标。因此，Nemetschek 集团在过去一年也保持了长期增长势头。此外，我们继续加强和扩大我们作为 AEC/O 行业（建筑、工程、施工和运营）全球领先合作伙伴之一的市场地位。我们的解决方案涵盖了建筑物和基础设施的整个生命周期。此外，我们进一步发展和加强了我们在媒体和娱乐市场的地位。从我们的结果来看，这意味着：
2021 年年度报告 - 投资者关系 | NEMETSCHEK
2021 年，我们延续了 Nemetschek 集团的成功故事，并再次创造了辉煌的一年。收入、收益和盈利能力创下了新高，我们甚至能够超越我们已经设定的 2021 财年目标。因此，Nemetschek 集团在过去一年也保持了长期增长势头。此外，我们继续加强和扩大我们作为 AEC/O 行业（建筑、工程、施工和运营）全球领先合作伙伴之一的市场地位。我们的解决方案涵盖了建筑物和基础设施的整个生命周期。此外，我们进一步发展和加强了我们在媒体和娱乐市场的地位。从我们的结果来看，这意味着：
以 CRISPR-Cas9 破坏 TFAM 的 HEK293T 细胞作为线粒体调控的模型
1 圣保罗大学动物科学与食品工程学院兽医学系，圣保罗 13635-900，巴西；kroballo@vt.vcom.edu (KCSR)；clesio.gmm@usp.br (CGMJ)；sarahingrid@usp.br (SIPS)；fabianabressan@usp.br (FFB)；ceambrosio@usp.br (CEA) 2 爱德华维亚骨科医学院，弗吉尼亚州布莱克斯堡 24060，美国 3 弗吉尼亚理工大学弗吉尼亚-马里兰兽医学院生物医学科学与病理学系，弗吉尼亚州布莱克斯堡 24060，美国 4 圣卡洛斯联邦大学遗传与进化系，圣卡洛斯 13565-905，巴西； chiarattimr@gmail.com 5 默多克儿童研究所，皇家儿童医院，墨尔本 3052，澳大利亚；elena.tucker@mcri.edu.au 6 墨尔本大学儿科系，墨尔本 3010，澳大利亚 7 斯坦利曼恩儿童研究所，芝加哥 Ann & Robert H. Lurie 儿童医院，伊利诺伊州芝加哥 60611，美国； eridavis@luriechildrens.org 8 美国西北大学范伯格医学院儿科系，伊利诺伊州芝加哥 1900，美国 9 美国西北大学范伯格医学院细胞与发育生物学系，伊利诺伊州芝加哥 1900，美国 10 法国国家自然历史博物馆基因组结构和不稳定性实验室，INSERM U1154，CNRS UMR7196，75231 巴黎，法国；jean-paul.concordet@mnhn.fr * 通信地址：van.oliveira@usp.br 或 van.cristina.oliveira@hotmail.com
![技术数据表：293 [HEK-293] DCAS9-KRAB单元线](/simg/5/5845441ceb850691992d55c908fa0d66f7f3a759.webp)
技术数据表：293 [HEK-293] DCAS9-KRAB单元线
图2。在293 [HEK-293] DCAS9-KRAB细胞（ATCC®CRL-1573DCAS9-KRAB™）中对基因表达敲低的验证。抑制p53和setD9基因表达。表达靶向p53和setD9基因的GRNA的慢病毒分别用于感染293 [HEK-293] DCAS9-KRAB细胞。慢病毒没有GRNA表达作为对照。感染后24小时，将抗生素添加到培养基中，以富集抗生素耐药细胞。细胞颗粒并进行DDPCR基因表达定量分析。p53基因的表达（左）和setD9基因（右）在感染GRNA的细胞中受到了显着抑制。