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鸭肠炎病毒 UL21 是一种晚期基因，编码一种与 pUL16 相互作用的蛋白质
背景：pUL21 是 Alphaherpesvirinae 的保守蛋白，具有多种重要功能。该亚家族其他成员的 pUL21 的 C 端具有 RNA 结合能力；该结构域有助于伪狂犬病毒 (PRV) 体外和体内逆行轴突运输，并参与新复制的病毒 DNA 包装和细胞内病毒运输。然而，关于鸭肠炎病毒 (DEV) pUL21 的知识有限。结果：我们证实 DEV UL21 是一个编码结构蛋白的 γ 2 基因。此外，我们观察到 pUL21 定位于细胞核和细胞质中。DEV pUL21 与 pUL16 相互作用并在转染的人胚胎肾 (HEK) 293 T 细胞和 DEV 感染的鸭胚胎成纤维细胞 (DEF) 中形成复合物。这些结果通过 CO-IP 测定得到进一步证实。
具有提高AAV生产率的新的T抗原负HEK293细胞系
图1Hekexpress®细胞的基因型表征。（a）使用靶向T抗原编码序列的引物（集1）的引物，跨Hekexpress®基因组的TLA序列覆盖率。绘图表明质粒的积分位点位于3染色体等效物（CHR3）上。（b）使用针对T抗原编码序列（集1）或CHR3（集3和4）的引物（集3和4）的引物（集3和4）的引物，（b）在人类CHR3中整合基因座的TLA序列覆盖率。 集合1的覆盖范围表明，与人类HG38基因组相比，Hekexpress®基因组（绿色箭头）中的550 kb缺失。 集合3和4的覆盖范围确认了综合质量PRTAK的连接。 （c）PRTAK质粒图最初集成在Hekexpress®细胞系中。 大小的T抗原序列在橙色的基因中，在深紫色和grnas（grna_beginning和grna_end）中指示。 （d）Chr3等效（红色）的图与550 kb缺失以及包含T抗原序列的PRTAK质粒的整合。 由TLA证实的质粒 - 染色体连接均以蓝色指示。 Hek，人类胚胎肾； TLA，靶向基因座放大。（b）在人类CHR3中整合基因座的TLA序列覆盖率。集合1的覆盖范围表明，与人类HG38基因组相比，Hekexpress®基因组（绿色箭头）中的550 kb缺失。集合3和4的覆盖范围确认了综合质量PRTAK的连接。（c）PRTAK质粒图最初集成在Hekexpress®细胞系中。大小的T抗原序列在橙色的基因中，在深紫色和grnas（grna_beginning和grna_end）中指示。（d）Chr3等效（红色）的图与550 kb缺失以及包含T抗原序列的PRTAK质粒的整合。由TLA证实的质粒 - 染色体连接均以蓝色指示。Hek，人类胚胎肾； TLA，靶向基因座放大。
利用基因组编辑工具模拟聚谷氨酰胺疾病的进展
摘要：多聚谷氨酰胺 (polyQ) 疾病，包括亨廷顿氏病，是一组由 CAG 重复扩增引起的晚发型进行性神经系统疾病。尽管最近有许多研究调查了 polyQ 疾病的病理特征和发展，但仍有许多问题尚未得到解答。新基因编辑技术的进步，尤其是 CRISPR-Cas9 技术，对于生成相关的 polyQ 模型具有不可否认的价值，这为研究过程提供了实质性支持。在这里，我们回顾了如何使用这些工具来纠正致病突变或创建具有不同 CAG 重复数的同源细胞系。我们描述了各种细胞模型，例如 HEK 293 细胞、患者来源的成纤维细胞、人类胚胎干细胞 (hESC)、诱导性多能干细胞 (iPSC) 和使用基因组编辑技术生成的动物模型。
基于遗传编码的基于Xten的水凝胶具有可调粘弹性和可注射细胞疗法的可生物降解性
虽然直接细胞移植在治疗许多使人衰弱的疾病方面具有巨大的希望，但注射后细胞存活不良和植入的临床翻译有限。尽管可以保护膜破坏膜的扩展流量并提供体内支持性的3D环境，从而改善了细胞保留和治疗成本，但大多数是由合成或自然收获的聚合物产生的，这些环境是免疫原性和/或化学无限的。This work presents a shear-thinning and self-healing telechelic recombinant protein-based hydrogel designed around XTEN – a well-expressible, non-immunogenic, and intrinsically disordered polypeptide previously evolved as a genetically encoded alternative to PEGylation to “eXTENd” the in vivo half-life of fused protein therapeutics.与源自软骨寡聚基质蛋白衍生的自缔合线圈结构域进行，形成了单个成分的物理交联的水凝胶，表现出快速剪切稀疏和通过同质体系盘旋螺旋衬包的自我修复。 可变稳定线圈关联的个体和组合点突变，可以简单地对遗传编程材料进行粘弹性和生物降解性。 最后，这些材料可以通过培养，注射和经胸中植入小鼠中的培养基源性肾（HEK）和胚胎干细胞衍生的心肌细胞（HESC-CMS）保护和维持可行性。 这些基于XTEN的注射水凝胶对体外细胞培养和体内细胞移植应用都显示出希望。，形成了单个成分的物理交联的水凝胶，表现出快速剪切稀疏和通过同质体系盘旋螺旋衬包的自我修复。可变稳定线圈关联的个体和组合点突变，可以简单地对遗传编程材料进行粘弹性和生物降解性。最后，这些材料可以通过培养，注射和经胸中植入小鼠中的培养基源性肾（HEK）和胚胎干细胞衍生的心肌细胞（HESC-CMS）保护和维持可行性。这些基于XTEN的注射水凝胶对体外细胞培养和体内细胞移植应用都显示出希望。
文章利用 CRISPR-Cas9 技术生成亨廷顿氏病的新同源模型
摘要：亨廷顿氏病 (HD) 是一种致命的神经退行性疾病，由亨廷顿基因 (HTT) 外显子 1 的 CAG 重复扩增引起。尽管亨廷顿氏病具有单基因特性，但其发病机制仍未完全了解，目前尚无有效的治疗方法。基因组工程等新技术的发展为疾病建模领域带来了新机遇，并使得具有相同遗传背景的同源模型的生成成为可能。这些模型对于研究疾病的发病机制和药物筛选非常有价值。本文报告了一系列在 HTT 基因座上具有不同 CAG 重复数的纯合 HEK 293T 细胞系的生成，并展示了它们在测试治疗试剂方面的实用性。此外，利用 CRISPR-Cas9 系统，我们纠正了 HD 人类诱导多能干细胞中的突变并生成了 HTT 基因的敲除，从而为 HD 研究提供了一套全面的同源细胞系。
![COVID-19
阿斯利康生物多样性位置声明
vaxzevria，covid-19疫苗（chadox1-s [重组]）
临床试验附录Q1 2021结果更新
covid-19疫苗阿斯利康现实世界证据摘要
患者covid-19疫苗的信息...
呼吸与免疫学：新兴管道](/simg/g:\will\search\icon\source\0\0636dbb32367154c19fc9bee19b28023bcbe1f8e.webp)
COVID-19 阿斯利康生物多样性位置声明 vaxzevria，covid-19疫苗（chadox1-s [重组]） 临床试验附录Q1 2021结果更新 covid-19疫苗阿斯利康现实世界证据摘要 患者covid-19疫苗的信息... 呼吸与免疫学：新兴管道
covid-19疫苗阿斯利康1。药用产品的名称covid-19疫苗阿斯利康2。定性和定量成分一剂（0.5 mL）包含：covid-19疫苗（Chadox1-S *重组）5×10 10 10 10个病毒颗粒（VP） *重组，重复，再生缺乏缺乏的黑猩猩adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus vector编码SARS-COV-2 Spike-2 Spike（Spike）Spike（S）glycoprote。在转基因的人类胚胎肾（HEK）293个细胞中产生。该产品包含转基因的生物（GMO）。有关赋形剂的完整列表，请参见第6.1节。3。注射药物溶液。溶液无色至略带棕色，清晰至略微不透明，无粒子。4。临床细节4.1治疗指示COVID-19 COVID-viccine Astrazeneca用于主动免疫> 18岁以预防2019年冠状病毒病（COVID-19）。4.2 positaging odsaption posology covid-19 Covid-19疫苗阿斯利康疫苗接种课程由两种单独的剂量组成0.5 ml
利用 dCRISPR/Cas9 融合蛋白实现不依赖 DNA 甲基化的长期表观遗传沉默
可编程的 CRISPR/Cas9 DNA 核酸酶是一种多功能的基因组编辑工具，但它需要宿主细胞 DNA 修复机制来改变基因组序列。这一事实导致切割位点的基因组发生不可预测的变化。因此，人们迫切需要能够改变基因组而不会导致 DNA 双链断裂的基因组编辑工具。在这里，我们表明，启动子相关短向导 (sg) RNA 与融合到 Krüppel 相关框域 (KRABd) 的死 Cas9 (dCas9) 以及甲基 CpG 结合蛋白 2 (MeCP2) 的转录抑制域的表达可导致小鼠胚胎干细胞和人类胚胎肾 (HEK) 293 细胞中的持续基因沉默。令人惊讶的是，这种效果在 DNA（胞嘧啶-5）-甲基转移酶 3A 和 3B（Dnmt3A 2 / 2 、Dnmt3b 2 / 2 ）耗尽的细胞中是可以实现的，甚至会增强。我们的结果表明，dCas9-KRABd-MeCP2 融合可用于长期表观遗传基因沉默，可用于细胞生物学，并可能用于治疗环境。
碱基编辑作为脊髓性肌萎缩症的基因治疗方法
图 1. 开发腺嘌呤碱基编辑来纠正 SMN2 外显子 7 C6T。a、未受影响个体和脊髓性肌萎缩症 (SMA) 患者的 SMN1 和 SMN2 示意图。SMN1 中的突变会导致 SMA，因为 SMN 蛋白会消耗，而这可以通过编辑 SMN2 来恢复。b、与 SMN1 相比，SMN2 外显子 7 C 到 T (C6T) 多态性的示意图，其中有碱基编辑器 gRNA 靶位及其估计的编辑窗口。cd、当使用由腺嘌呤脱氨酶结构域 ABEmax 33,38、ABE8.20m 35 和 ABE8e 36 与野生型 SpCas9（面板 c）或 SpRY 37（面板 d）融合的 ABE 时，对 SMN2 C6T 靶向腺嘌呤和其他旁观者碱基进行 A-to-G 编辑，通过靶向测序进行评估。 e，使用 SpRY 或其他宽松 SpCas9 PAM 变体 43 对 SMN2 外显子 7 中的腺嘌呤进行 A 到 G 编辑，通过靶向测序进行评估。图 ce 中的数据来自 HEK 293T 细胞中的实验；n = 3 个独立生物学重复的平均值、sem 和单个数据点。
纳米DNA疫苗编码弓形虫的贡二酮组蛋白脱乙酰基酶SIR2小鼠的保护性免疫
摘要：弓形虫病的病原体，弓形虫弓形虫（T. gondii），是一种人畜共患的原生动物，可以影响包括人类在内的温血动物的健康。到目前为止，一种具有完全保护的有效疫苗仍然无法访问。在这项研究中，构建了编码T. gondii组蛋白脱乙酰基酶SIR2（PVAX1-SIR2）的DNA疫苗。用于增强效能元，壳聚糖和poly（D，l-乳酸 - 糖 - 糖）酸（PLGA）用于设计带有DNA疫苗的纳米球，称为PVAX1-SIR2/CS和PVAX1-SIR2/CS和PVAX1-SIR2/PLGA纳米球。将PVAX1-SIR2质粒转染到HEK 293-T细胞中，并通过激光扫描共聚焦显微镜评估表达。然后，在实验室动物模型中评估了PVAX1-SIR2质粒，PVAX1-SIR2/CS纳米球和PVAX1-SIR2/PLGA纳米球的免疫保护。体内发现表明PVAX1-SIR2/CS和PVAX1-SIR2/PLGA纳米球可以产生混合的Th1/Th2免疫反应，如受调节的抗体和细胞因子的受调节的产生所示，成熟和组成（MHC）的表达（MHC）的表达（MHC）的表达（dccompositience）的表达（dcandrien）的表达（dcandrien）是dccompositient的表达。增殖和CD4 +
基因组编辑细胞的简化选择方法
在过去十年中，转录激活因子样效应核酸酶和基于 CRISPR 的基因组工程彻底改变了我们的生物学方法。由于其高效性和易用性，现在几乎每个实验室都能够开发定制的敲除和敲入动物或细胞模型。尽管如此，产生转基因细胞通常需要一个选择步骤，通常通过抗生素或荧光标记来实现。选择标记的选择基于可用的实验室资源，例如细胞类型，还应考虑时间和成本等参数。在这里，我们提出了一种称为磁激活基因组编辑细胞分选的新型快速策略，根据磁性分选 Cas9 阳性细胞中存在的表面抗原（即 tCD19）的能力来选择转基因细胞。通过使用磁激活基因组编辑细胞分选，我们成功生成并分离了基因改造的人类诱导多能干细胞、原代人类成纤维细胞、SH-SY5Y 神经母细胞样细胞、HaCaT 和 HEK 293T 细胞。我们的策略扩展了基因组编辑工具箱，提供了一种快速、廉价且易于使用的替代现有选择方法的方法。