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昆虫飞行：现场和未来方向
∗生物学学院，美国新布拉斯·林·科恩大学，美国东北68588，美国； †美国纽约州14627的Roc Hest Er的Bio Logy的Dep Artity，Roc Hest Er的Uni Versity； ‡美国纽约州伊萨卡市的生物学杂志和环境的生物学艺术； §美国加利福尼亚州Inst I t te t te t te t te t t te t te t te t t te t te t te t t t t te a saden a，美国加利福尼亚州91125，美国； ¶海洋生物学ICA L Labo Rato Ry，Wo O DS Hole，MA 02543-1050，美国； || Bio Logy，Uni Versi ty o f o ttawa，o ttawa ont art ar io k1n 6n5，加拿大; ＃普林斯顿神经科学Insti Insti Tu t e，Univer on Princet，Princet on，NJ 08544，美国； ∗ *生物学Dep Art Ment，Bowdoin College，Brunswick，ME 04011，美国； ††WY AMIN G，LA RA MIE，WY MIE，WY 82070，WY AMING UNISWERALIG和生理学艺术； ‡‡耶鲁大学，纽黑文，CT 06520-8109，耶鲁大学地球和行星科学; §§§人生科学学院，一家州立大学，美国坦佩，亚利桑那州85287-4501，美国； ¶¶BioLogy，Uni Versi ty of th carolin a，ch apel hi l l，NC 27599，美国； |||美国加利福尼亚州伯克·埃利（Berk Eley），美国加利福尼亚州94720的贝尔克·奥尼亚（CALIC ORNIA）的特里格拉（Tegra Tiv e B）美国宾夕法尼亚州公园，宾夕法尼亚州16803，宾夕法尼亚州立大学生物学的## Dep Art Ment; ** Heureka，芬兰科学中心，Vantaa 01300，芬兰； †††nat iona l生物学中心科学中心，tata Insti te t t t t t t t t t t t t in dia in rch，ba ngalore 560065，in dia; Bio log Ica l Sciences，GE Org ia t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t t in a in a in lant a，ga 30332，美国
人体测量学、人体生物力学的人体工程学模型...
人类因素委员会于 1980 年 10 月由国家研究委员会行为与社会科学和教育委员会成立。该委员会由海军研究办公室、空军科学研究办公室、陆军行为与社会科学研究研究所、国家航空航天管理局和国家科学基金会赞助。该委员会的主要目标是为理论和方法问题提供新的视角，确定扩大和加强人为因素科学基础所需的基础研究，并吸引该领域内外的科学家进行互动交流并开展所需的研究。委员会的目标是提供坚实的研究基础，作为有效人为因素实践的基础。人为因素问题出现在人类与技术社会产品互动的每个领域。为了有效地履行职责，委员会吸纳了来自各个科学和工程学科的专家。委员会成员包括心理学、工程学、生物力学、生理学、医学、认知科学、机器智能、计算机科学、社会学、教育学和人为因素工程等领域的专家。其他学科的代表也参加工作组、研讨会和专题讨论会。每个委员会的成员都应包括以下领域的专家：为提高人为因素的科学基础提供所需的基本数据、理论和方法。
限制摘要和琼脂糖凝胶电泳
T ECHNIQUES I N M OLECULAR B IOLOGY – R ESTRICTION D IGEST AND A GAROSE G EL E LECTROPHORESIS This lab will introduce you to DNA modification by restriction enzymes using the purified plasmids you prepared from your transformation.我们还将使用水平凝胶电泳对纯化的质粒和消化进行分析。您将对限制酶进行切割之前和之后对纯化的质粒进行凝胶分析。您将执行质粒的模拟（控制）摘要，一种具有两种不同限制酶和双重摘要的单个摘要。从中，您应该能够确定Qiagen微型制备质粒DNA的纯度，以及在PQE60载体中的WGMDH插入物。一定要阅读有关限制摘要（教科书读数）和琼脂糖凝胶（教科书和讲义）的信息，以了解每个概念的理论，并了解执行成功实验所需的细节。必需的视频 - 新英格兰Biolabs准备的网页上的限制酶链接。观看所需的最小视频是（具有限制性酶的消化，限制酶消化的标准协议和NEB限制酶Double Digigest协议视频）。在进行实验之前，您还应该查看其他几个。https://www.neb.com/applications/cloning-‐and-‐synthetic-‐ biology/dna-‐preparation/restriction-‐enzyme-‐digestion Practical notes on Restriction Endonucleases (RE) and Their Use Enzymatic Unit definition: 1 Unit = amount of enzyme necessary to digest 1 µg DNA in 1 hr (37°C, with适当的缓冲区）。glycerol Re Digests。确保您使用的是正确的缓冲液，酶与底物的正确比率（DNA和正确消化的条件）。Rextion缓冲每个限制酶具有一个缓冲液，其中最高活性（通常为10倍浓缩物）。某些酶具有共同的缓冲液，而其他酶则需要与独特的缓冲液一起使用以进行最佳活动。几家公司（以新英格兰的Biolabs为例）具有与多种酶合作的共同缓冲液。您的网站上有一个链接 - 探索几家公司以了解缓冲液和酶。存储条件RE通过反复暴露于较高的温度来对活动丧失敏感；使用库存以长期存储保持在-20°C，在使用时在〜0°C（在冰上）处于〜0°C（在冰上）。进行消化时，温育几个小时后，某些酶的活性就会损失。由于RE昂贵，因此必须谨慎处理库存。酶应在-20°C时不断存储在非冻结冰箱中。（无霜的冰柜定期在冰点上加热以限制冰的积累。）也最好将酶放在冰箱中的绝缘容器中，该酶在打开冰柜时会限制温度变化（如果存储在霜冻的冰柜中，这一点尤其重要）。为防止在-20°C下冻结，RE库存在含有50％甘油的溶液中。由于在存在> 5％甘油的情况下可以抑制或改变RE活性，因此应库存不超过10％的最终RE消化反应混合物。[A 1:10 RE的稀释度将50％的甘油含量为5％。]在不正确的缓冲液条件下或在存在> 5％甘油的情况下，RE的恒星（*）活性可以显示出改变的DNA裂解特异性，称为“恒星活性”。在这种情况下，酶可以识别出其正常6 bp识别位点的4个基对子集，因此将在比预期的更多位点上切割DNA。例如，熟悉的酶EcoRI因其在低离子强度溶液中的恒星活性而臭名昭著。
分子生物学中的技术 - 质粒DNA的方法...
t eChniquers i n M Olecular b Iology - 用于P LASMID DNA I求解DNA分离的方法：分子生物学技术在复杂基因组分析中的应用取决于准备纯质粒DNA的能力。大多数质粒DNA隔离技术有两种口味，简单 - 低质量的DNA制剂，更复杂，耗时但高质量的DNA制剂。对于许多DNA操作，例如限制酶分析，亚克隆和琼脂糖凝胶电泳，简单的方法就足够了。大多数DNA测序，PCR操作，转换和其他技术都需要高质量的制剂。大多数方法都以大量细菌细胞开头，这些细菌细胞包含选择的质粒并离心至颗粒。然后，细胞在基本条件下通过洗涤剂钠硫酸盐（SDS）的混合物裂解，或添加蛋白酶（溶菌酶）以削弱和破坏宿主细胞壁。这两种方法的结果都导致紧凑型超螺旋质粒DNA分子释放到溶液中。下一个问题是将RNA，基因组DNA和其他细胞成分与细胞分开。如何完成此操作取决于所使用的方法。碱性裂解制剂是隔离少量质粒DNA的最常用方法，通常称为小型质子。此方法将SDS用作弱洗涤剂，以在NaOH存在的情况下使细胞变性，该清洁剂可将细胞壁和其他细胞分子水解起来。高pH值通过添加乙酸钾进行中和。这将质粒DNA和RNA留在溶液中。钾对样品有额外的影响。钾离子与SD相互作用，使其成为不溶性的洗涤剂。SD会很容易沉淀，并且可以通过离心分离。这样做的不溶性SDS会捕获较大的基因组DNA并将其从上清液中清除。通常通过添加RNASEA消化去除RNA。这仅留下溶液中的蛋白质，碳水化合物和RNA核苷单体。原发性醇（例如乙醇或丙醇）用于沉淀DNA。这是通过对水的重新排序来实现的，使DNA聚集体并变得不溶性。结果是一种纯净的DNA颗粒，可以重悬于温和缓冲的溶液或水中。建议使用大量培养物中煮沸的微型REIPREP来制备少量的质粒DNA。虽然此方法非常快，但产生的DNA质量低于碱性裂解小型培训的质量。在碱性裂解小型方法中，溶菌酶用于水解负责使细菌细胞壁具有其强度的广泛交联蛋白。然后将细胞煮沸以进一步使蛋白质结染并破坏细胞壁。然后用酒精沉淀质粒DNA。这两种方法都将仅产生几µg质粒DNA。对于纯度较高的较大数量，需要许多其他步骤。通过在非常高的重力力下在氯化丘密度梯度中离心，根据其密度分离其密度。氯化剖腹梯度产生的高质量质粒DNA不含大多数污染物，但使用溴化乙锭来识别DNA（潜在的诱变剂），并且需要长时间的超级离心运行以建立密度梯度。该方法是通过使用碱性裂解方法裂解细胞的，并在350,000 x g下离心14小时。首先，将CSCL梯度在小管中制成，并用溴化乙锭添加DNA。在旋转时，DNA将向下迁移，直到达到与质粒相同的CSCL的密度。因此，较大的DNA将与紧凑的质粒DNA分离。用紫外线可视化质粒带，用针切除，然后重复该过程。您可以看到，这是一种非常复杂且乏味的方法，用于隔离DNA，通常不经常在柱分离的出现中使用。现在存在一种更流行的方法，它利用了质粒DNA的物理特性和碱性裂解方法中发现的污染物的差异。核酸是负电荷的，因此可以使用阴离子交换