产品描述Quick-DNA/RNA™病原体微型套件是从多种载体(蚊子,跳蚤,tick虫等)的病原体(病毒,细菌,原生动物)DNA和RNA的自旋柱纯化的和组织类型(哺乳动物,鸟类等)收集,运输并存储在DNA/RNA Shield™中。DNA/RNA Shield™用于病原体的核酸保存和灭活。该套件具有存储/裂解缓冲系统,可以与高密度ZR BashingBead™裂解管(*建议)结合使用,以促进难以溶解样品的完全均质化,以进行有效的核酸隔离。小(> 50 nt)和大(> 200 kb)的DNA和RNA与色谱柱结合,洗涤然后洗脱。分离的高质量核酸适用于所有下游应用,例如下一代测序,基于杂交和RT/QPCR检测。
如果300 µL细胞裂解溶液不足以覆盖头部,则必须将协议缩放以使用较大的体积。有关更多信息,请联系Qiagen技术服务(请参阅www.qiagen.com)。
产品说明Quick-DNA/RNA™病原体MagBead套件设计用于从多种载体(蚊子,跳蚤,tick虫等)的病原体(病毒,细菌,原生动物)DNA的病原体(病毒,细菌,原生动物)DNA和RNA的高通量纯化。和组织类型(哺乳动物,鸟类等)收集,运输并存储在DNA/RNA Shield™中。DNA/RNA Shield™用于病原体的核酸保存和灭活。该套件具有存储/裂解缓冲系统,可以与高密度ZR BashingBead™裂解管(*建议)结合使用,以促进难以溶解样品的完全均质化,以进行有效的核酸隔离。小(> 50 nt)和大(> 200 kb)的DNA和RNA与磁珠结合,洗涤然后洗脱。分离的高质量核酸适用于所有下游应用,例如下一代测序,基于杂交和RT/QPCR检测。
促使结合现有技术参考文献的原因是“Pertl 没有表达对细胞裂解会干扰其方法的担忧,也没有报告由于裂解而释放的背景 DNA 增加(与请愿人的断言相反)。”Id.at JA 67。委员会还得出结论,本领域的普通技术人员“会对将甲醛的使用范围扩大到涉及母体血浆中稀有循环无细胞胎儿 DNA 的应用产生重大且未解决的担忧,因为这种使用可能会损害样本本身中的 cffDNA 分析物。”Id.at JA 87。委员会相信专家的证词,“这种担忧会阻止 [本领域的普通技术人员] 使用 Granger 的甲醛修改 Pertl 的方法,正如 [Streck] 所建议的那样。”Id.Streck 及时提出上诉,我们根据 28 USC§1295(a)(4)(A) 拥有管辖权。
产品描述Quick-RNA™粪便/土壤微生物微型培养箱是一种创新产品,旨在快速隔离总RNA,包括小RNA(> 17 nt),从250毫克的土壤(污泥,沉积物等)和/或粪便样品(哺乳动物,禽类等)含有很难渗透的细菌,真菌,原生动物,植物,藻类,包括宿主在内的病毒。该套件包括独特的技术,例如ZR BashingBead™裂解管,并具有特殊配方的S/FRNA裂解缓冲液。Zymo-Spin™IIICG柱允许高容量核酸结合,随后的Zymo-Spin™IC柱有效吸附并浓缩总RNA。RNA洗涤,然后用DNase/RNase无水洗脱。用于去除抑制剂,可以通过将样品通过Zymo-Spin™III-HRC过滤器来处理洗脱的RNA。RNA在低至6 µL中洗脱,适用于包括RT-QPCR在内的后续程序。
淋巴机和其他身体组织,以及生存壁ch中的ADCC耐药性可能是由于多种因素引起的,包括低NK细胞频率和促进CLL细胞存活的抑制性基质环境。可以很好地确定,运动曲线会诱导NK细胞和B细胞的短暂迁移到外周血中,可以利用这些临时性,以通过将靶标细胞与血液中的利妥昔单抗一起重新定位,以增强利妥昔单抗在CLL中的疗效。在这项试验研究中,n = 20例未接受治疗的CLL患者完成了约30分钟的厌氧阈值15%的回合,并在运动前,后1小时收集了血液样本。流式细胞仪表明,运动在血液中的效应因子(CD3-CD56 + CD16 +)的NK细胞分别增加了254%,CD5 + CD19 + CD19 + CD20 + CLL细胞在血液中增加了67%(所有P <0.005)。nk-细胞是从前血液样本中分离出来的,并立即在运动后立即与主分离的CLL细胞一起孵育,有或不存在利妥昔单抗,以使用钙牛释放测定法确定特定的裂解。利妥昔单抗介导的细胞裂解增加了129%(p <0.001)。练习后,CLL细胞的直接NK细胞裂解(与利妥昔单抗无关)是没有变化的(p = 0.25)。我们得出的结论是,锻炼提高了利妥昔单抗介导的抗体依赖性细胞毒性对自体CLL细胞的细胞毒性,并提出应探讨运动作为增强接受抗CD20免疫疗法的患者的临床反应的一种手段。
用于样品制备•8管条(Thermo Fisher Scientific,Cat。编号ab0264)或其他不含核酸酶的PCR级管条,固定在PCR架中,或已验证的96孔板,这些板已验证以与您的FACS仪器一起使用•Microplate Film(USA Scientific,Cat。编号2920-0010)用于分类之前的密封管/板•铝单选项卡箔封封(美国科学,猫。编号2938-4100)或帽条(Thermo Fisher Scientific,Cat。编号ab0784/ab0850)•用于96孔板或管条的低速台式离心机•合适的容器中的干冰,用于闪光灯冷冻电池•(可选的)BD FACS PRACES PRACES PRACES PRES pre-SORT SORT SORT BUFFER(BD BISCIENCES,BD BISCIENCES,CAT。编号563503)•(可选)智能seq ht套件裂解组件(cat。编号634439)或10x裂解缓冲液(Takara Bio,Cat。编号635013)用于排序额外的板
• 8 联管(Thermo Fisher Scientific,目录号 AB0264)或其他无核酸酶、PCR 级联管(固定在 PCR 架中)或 96 孔板(已验证可与您的 FACS 仪器配合使用) • 微孔板膜(USA Scientific,目录号 2920-0010),用于在分选前密封管/板 • 铝制单片箔密封(USA Scientific,目录号 2938-4100)或盖条(Thermo Fisher Scientific,目录号 AB0784/AB0850),用于在分选后密封管/板 • 用于 96 孔板或联管的低速台式离心机 • 适合容器中的干冰,用于快速冷冻细胞 • (可选)BD FACS 预分选缓冲液(BD Biosciences,目录号 563503) • (可选)SMART-Seq HT Kit 裂解组分(Takara Bio,目录号 634439)或 10X 裂解缓冲液(Takara Bio,目录号 635013)用于对额外的板进行分类
• 8 联管(Thermo Fisher Scientific,目录号 AB0264)或其他无核酸酶、PCR 级联管(固定在 PCR 架中)或 96 孔板(已验证可与您的 FACS 仪器配合使用) • 微孔板膜(USA Scientific,目录号 2920-0010),用于在分选前密封管/板 • 铝制单片箔密封(USA Scientific,目录号 2938-4100)或盖条(Thermo Fisher Scientific,目录号 AB0784/AB0850),用于在分选后密封管/板 • 用于 96 孔板或联管的低速台式离心机 • 适合容器中的干冰,用于快速冷冻细胞 • (可选)BD FACS 预分选缓冲液(BD Biosciences,目录号 563503) • (可选)SMART-Seq HT Kit 裂解组分(货号 634439)或 10X 裂解缓冲液(Takara Bio,货号 635013)用于对额外的板进行分类
下一代测序需要高质量的核酸,但是从植物组织中隔离DNA和RNA通常是具有挑战性的。尽管在各种试剂盒和试剂的开发方面取得了进步,但这些产品仅限于从模型植物物种中分离出核酸。在这项研究中,引入了通用裂解缓冲液,以分离核酸与广泛的植物物种的分离,以促进分子研究,例如定量PCR(QPCR),转录组学,全基因组测序等。裂解缓冲液由己二甲基三甲基铵(CTAB),氯化钠(NaCl),Tris碱,乙二胺二乙酸乙酸(EDTA)和β-苯二甲醇(βme)组成。这些成分的适当浓度可以同时从植物组织中分离出高质量的DNA和RNA。该方法的略有变化导致从同一组织中分离出纯DNA或RNA,从而实现了高通量测序。该方案很快,可以在不到一个小时内从不同植物物种中分离出核酸。
