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ArciTect™ Cas9-eGFP 核酸酶
ArciTect™ Cas9-eGFP 核酸酶是一种融合蛋白，由增强型绿色荧光蛋白 (eGFP) 和来自化脓性链球菌的野生型 Cas9 重组蛋白组成；它包含一个 C 端连接的 eGFP 分子。ArciTect™ Cas9-eGFP 核酸酶需要与向导 RNA（例如 ArciTect™ sgRNA（目录号 #200-0013）或由 ArciTect™ tracrRNA（目录号 #76016）和 ArciTect™ crRNA（目录号 #76010）组成的双链）结合，以形成核糖核蛋白 (RNP) 复合物。该 RNP 复合物在基因组中的位点特定位置产生双链断裂。 ArciTect™ Cas9-eGFP 核酸酶还在 N 端含有核定位信号，确保 RNP 复合物转位至细胞核，从而提高基因组编辑的效率。由于 RNP 复合物在转染后完全发挥作用，因此在转位至细胞核后可立即发挥作用。RNP 复合物在 48 小时内降解，为基因组编辑提供了充足的时间，同时减少了 RNP 复合物持续存在可能导致的脱靶效应。使用 RNP 系统还可以避免生成稳定的 Cas9 表达细胞系的繁琐过程，从而节省时间并降低由于可诱导表达系统泄漏而导致脱靶效应的风险。化脓性链球菌 Cas9 使用原间隔区相邻基序 (PAM) 序列 NGG（其中 N 可以是任何核苷酸）。如果靶序列下游没有基因组 PAM 位点，酶就不会裂解。
Lb Cas12a 核酸酶
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核酸酶和切口酶基因修饰的改进......
基因组编辑技术的进步使得利用酶的功能进行有效的 DNA 修饰成为可能，这对治疗人类遗传疾病具有巨大的潜力。已经开发出几种核酸酶基因组编辑策略来纠正基因突变，包括大核酸酶 (MN)、锌指核酸酶 (ZFN)、转录激活因子样效应核酸酶 (TALEN) 和成簇的规律间隔短回文重复序列-CRISPR 相关蛋白 (CRISPR-Cas)。CRISPR-Cas 已被进一步设计为创建切口酶基因组编辑工具，包括具有高精度和高效率的碱基编辑器和主要编辑器。在这篇综述中，我们总结了用于治疗遗传疾病的核酸酶和切口酶基因组编辑方法的最新进展。我们还强调了这些方法转化为临床应用的一些局限性。
Cas9 核酸酶 GFP NLS 蛋白
产品描述 成簇的规则间隔短回文重复序列 (CRISPR)/Cas9 系统是基因组编辑中最新的 RNA 引导核酸内切酶工具，可实现非常具体的基因组破坏和替换。Cas9 核酸酶 NLS 与 GFP 的融合可实现转染的视觉确认以及随后的 Cas9 从细胞中清除的验证。Cas9 核酸酶-GFP 也可用于 FACS 应用和筛选。Cas9 核酸酶-GFP NLS 在蛋白质的 C 端包含 SV40 T 抗原核定位序列 (NLS)。
我们愿意在 OMNITM 核酸酶方面开展合作……
成功的基因编辑需要针对每个目标基因和目标器官开发出经过精心优化的组合物。获得各种核酸酶和向导（具有高活性和特异性以及适用的 PAM）以及正确的递送工具是关键。不同的编辑目标需要特定的核酸酶特性，例如核酸酶大小或 PAM 使用，同时表现出极好的特异性。Emendo Biotherapeutics 开发了一种双平台技术，结合了发现流程和尖端蛋白质工程能力，并得到了广泛的计算和机器学习工具的支持。
工程化的 AsCas12a 核酸酶有助于快速...
Cas12a 特异性的参考文献：Kim 等人。Nat Biotech 2016，Kleinstiver 等人。Nat Biotech 2016，Strohkendl 等人。Mol Cell 2018，Swarts 等人。Biochem Soc Trans 2019
重组NLS-SPCAS9-NLS（CAS9）核酸酶解决方案
产品描述：Akron的重组NLS-SPCAS9-NLS（CAS9）核酸酶解决方案均遵循所有相关的辅助材料指南。下游纯化过程使用多步矫正方法，不使用亲和力标签，以最大程度地减少外源杂质，并确保提供高度纯化和活性的物质以进行进一步的制造应用。Akron的Cas9核酸酶是单链，162 kDa，非糖基化的DNA核酸内切酶，在大肠杆菌中表达。氨基酸序列来自链球菌链球菌，蛋白质结构已通过在蛋白质的N-和C-末端添加核定位序列（NLS）改变了蛋白质结构。将NLS添加到蛋白质结构中确保您的RNP复合物有效地导入细胞核。
crispr核酸酶脱靶活动和缓解策略
CRISPR的发现允许特定地点的基因组修饰成为现实，现在该技术正在许多人类的临床试验中应用。迄今为止，这项技术在诊所表现出了令人印象深刻的效率，但仍有可能产生CRISPR核酸酶活性的意外在靶向效果的潜力。已经开发出了各种基于计算机的预测工具和经验得出的实验方法，以识别最常见的意外效果 - 与指南RNA同源的基因组位点的小插入和缺失。然而，最近报道了大规模的畸变，例如易位，倒置，缺失，甚至铬虫。使用当前的工作流，表明该领域的主要需求很难检测。在这篇综述中，我们总结了基于潜在的测序解决方案，这些解决方案即使在出现的低频下也可以检测到这些大规模效应。此外，使用CRISPR的许多当前临床试验涉及患者自己的干细胞的体内隔离，改良和重新置换。但是，对基因组编辑工具的直接，体内传递的兴趣越来越大。该策略有可能解决不适合过时操作的细胞类型中的疾病，但体内编辑只有一个预期的结果 - 在感兴趣的细胞类型中靶向编辑。CRISPR活性在意外细胞类型中（无论是在靶点还是靶点）中都是可实现种系传播的组织中的主要安全和道德关注。在这篇综述中，我们总结了当前编辑和交付工具的优势和劣势，以及对脱离目标和离组织CRISPR活动检测的潜在改进。我们还概述了潜在的缓解策略，这些策略将确保CRISPR的安全保持效率的步伐，如果该技术要实现其全部翻译潜力，这是必要的要求。
YM1蛋白晶体促进2型免疫力
群集定期间隔短的短质体重复序列（CRISPR）相关的核酸内切酶已彻底改变了生物技术，因为它们是可编程基因组编辑者的潜力。然而，大多数天然核酸酶及其变体都有局限性。在这里，我们报告了由祖先序列重建（ASR）设计的完全合成的CRISPR-核酸酶（CAS）核酸酶（CAS）核酸酶（CAS）核酸酶（α-Syncas），该核酸酶（ASR）显示出一组可靠且独特的靶向特性，在任何其他已知的CRISPR-CAS Cass 2 System中都找不到。我们表明α-同步是一种无PAM的核酸酶，能够催化DSDNA，ssDNA和SSRNA的RNA引导，特定的裂解。合成酶也能够通过补充DSDNA，ssDNA和SSRNA靶标激活DSDNA，SSDNA和SSRNA的序列非特异性降解。此外，α-同步在人类细胞和细菌中表现出强大的基因组编辑活性。α-同步三元和第四纪复合物的冷冻电子显微镜结构提供了一个框架，以了解其扩展的酶促活性的结构基础。几乎任何核酸序列的可编程多模式靶向的能力将α-同步区分开，这是扩展基于CRISPR的技术的有希望的新工具。
最小可编程核酸酶 TnpB 的快照发布
“刚刚发表的《自然》新论文是长期不懈努力的结果，展示了立陶宛科学家在生命科学领域的潜力以及他们成为该领域领军人物的能力。这项研究揭示了 TnpB 基因剪刀的结构和机制，为进一步针对性地改造 TnpB 复合物以将其转化为治疗遗传疾病的治疗工具奠定了基础，”V. Šikšnys 教授说。