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CRISPR的发现允许特定地点的基因组修饰成为现实,现在该技术正在许多人类的临床试验中应用。迄今为止,这项技术在诊所表现出了令人印象深刻的效率,但仍有可能产生CRISPR核酸酶活性的意外在靶向效果的潜力。已经开发出了各种基于计算机的预测工具和经验得出的实验方法,以识别最常见的意外效果 - 与指南RNA同源的基因组位点的小插入和缺失。然而,最近报道了大规模的畸变,例如易位,倒置,缺失,甚至铬虫。使用当前的工作流,表明该领域的主要需求很难检测。在这篇综述中,我们总结了基于潜在的测序解决方案,这些解决方案即使在出现的低频下也可以检测到这些大规模效应。此外,使用CRISPR的许多当前临床试验涉及患者自己的干细胞的体内隔离,改良和重新置换。但是,对基因组编辑工具的直接,体内传递的兴趣越来越大。该策略有可能解决不适合过时操作的细胞类型中的疾病,但体内编辑只有一个预期的结果 - 在感兴趣的细胞类型中靶向编辑。CRISPR活性在意外细胞类型中(无论是在靶点还是靶点)中都是可实现种系传播的组织中的主要安全和道德关注。在这篇综述中,我们总结了当前编辑和交付工具的优势和劣势,以及对脱离目标和离组织CRISPR活动检测的潜在改进。我们还概述了潜在的缓解策略,这些策略将确保CRISPR的安全保持效率的步伐,如果该技术要实现其全部翻译潜力,这是必要的要求。

crispr核酸酶脱靶活动和缓解策略

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