C11D5.3是一种特异性BCMA的IgG1小鼠单克隆抗体,它是多发性骨髓瘤和淋巴瘤免疫疗法的靶标。C11D5.3 SCFVC11D5.3 SCFV
摘要 结直肠癌 (CRC) 是全球最致命的癌症之一,转移性病例的 5 年生存率仅为 12%。设计有针对性的有效治疗方法仍然是 CRC 治疗中未满足的主要临床需求。癌胚抗原 (CEA) 是一种在大多数结直肠肿瘤中过表达的糖蛋白,可能成为一种有前途的分子,用于产生用于 CRC 治疗的新型 CEA 靶向治疗策略。在这里,我们开发了一种智能纳米平台,该平台基于抗 CEA 单链可变片段 (scFv) MFE-23 与 PLGA-PEG 聚合物的化学结合,将标准 5-氟尿嘧啶 (5-FU) 化疗递送至 CRC 细胞。我们证实了开发的 CEA 靶向 NPs 对表达 CEA 的 CRC 细胞内化的特异性,细胞摄取增加了三倍。此外,在治疗 24 小时和 48 小时后,装载 5-FU 的 CEA 靶向 NP 在 CEA 表达细胞中诱导更高的细胞毒性,从而增强了靶向 NP 的特异性。最后,在供体分离的巨噬细胞中评估了装载 5-FU 的 CEA 靶向 NP 的安全性,对其代谢活性和极化没有相关影响。总之,这一概念验证支持 CEA 介导的靶向 NP 内化作为一种有前途的化疗策略,可在不同的 CEA 相关癌症和相应的转移部位进行进一步研究。关键词癌症治疗、癌胚抗原、药物递送、纳米医学、单链可变片段功能化、靶向治疗
项目描述该项目的目的是表征富含噬菌体和噬菌体的氨基酸序列(SCFV)靶向SARS-COV2抗原的物体。该项目是由IDP-MCST资助的加速项目的分支。我们通过噬菌体显示生物塑料生成了多克隆SCFV抗体群和单克隆抗体,这些抗体与SARS-COV-2 Trimer,S1,RBD或Zikav信封特异性结合。我们已经纯化了DNA,并将使用多克隆人群的牛津纳米孔技术进行长阅读的NG。Sanger测序也将用于单克隆A的身体。在此MSC期间必须设置编码SCFV的DNA序列的管道。
胆管癌(CCA)是一种致命的胆管癌,具有高耐药性和复发率,只有五分之一的患者有资格接受手术治疗。该疾病抵抗了标准的化疗,并且经常复发。嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法对血液学恶性肿瘤有望,但由于PD-L1表达等抗性机制,肿瘤用于逃避免疫系统,因此面临实体瘤的挑战。为了应对这一挑战,我们开发了针对整联蛋白αVβ6的第五代CAR T细胞,该细胞还分泌抗PD-L1单链可变片段(SCFV),以靶向肿瘤细胞和PD-1/PD-L1途径。我们在CCA细胞系和工程T细胞中检查了整联蛋白αVβ6和PD-L1的表达,以表达针对整联蛋白αVβ6(A20 CAR4 T细胞)的第四代CAR T细胞,或用抗PD-L1 SCFV分泌(A20 CAR5 T细胞)(A20 CAR5 T细胞)(A20 CAR4 T细胞)或第五代CAR T细胞(A20 CAR5 T细胞)。在体外,与A20 CAR4 T细胞相比,A20 CAR5 T细胞表现出更少的疲惫和长期功能。 在CCA的3D球体模型中,A20 CAR5 T细胞表现出增强的抗肿瘤活性,并更好地浸润到球体核心中。 这些发现表明A20 CAR5 T细胞在体内研究和临床试验中具有巨大的潜力,并需要进一步。在体外,与A20 CAR4 T细胞相比,A20 CAR5 T细胞表现出更少的疲惫和长期功能。在CCA的3D球体模型中,A20 CAR5 T细胞表现出增强的抗肿瘤活性,并更好地浸润到球体核心中。 这些发现表明A20 CAR5 T细胞在体内研究和临床试验中具有巨大的潜力,并需要进一步。在CCA的3D球体模型中,A20 CAR5 T细胞表现出增强的抗肿瘤活性,并更好地浸润到球体核心中。这些发现表明A20 CAR5 T细胞在体内研究和临床试验中具有巨大的潜力,并需要进一步。
背景:溶瘤腺病毒介导的基因治疗是一种新兴的癌症治疗策略。但溶瘤腺病毒主要在肿瘤部位局部给药。静脉注射溶瘤腺病毒进行癌症基因治疗是一个亟待解决的问题。方法:构建携带抗p21Ras scFv的重组溶瘤腺病毒KGHV500,利用CIK细胞递送KGHV500。采用TUNEL、划痕愈合、MTT和Transwell侵袭实验检测KGHV500对肝癌细胞的体外抗肿瘤作用。采用裸鼠异种移植模型检测CIK细胞联合KGHV500在体内的抗肿瘤作用。此外,检测KGHV500在不同器官中的蓄积以评估其安全性。结果:KGHV500抑制肝癌细胞的迁移、增殖、侵袭并诱导其凋亡。在裸鼠异种移植模型中,携带KGHV500的CIK细胞能够到达肿瘤部位,发挥比CIK细胞或单独的KGHV500更好的抗肿瘤效果。此外,我们在裸鼠的不同器官中检测到了KGHV500和抗p21Ras scFv,对器官的影响很小。结论:我们通过将CIK细胞与表达抗p21Ras scFv的溶瘤腺病毒相结合,开发了一种治疗Ras驱动的肝癌的新策略。体内静脉注射携带KGHV500的CIK细胞可显著抑制肿瘤生长,对正常器官的影响很小,并且相对安全。
已经开发了创造性的方法来实现此属性。[1,2]在许多早期的概念验证研究中,BSAB是通过使用双功能交联试剂对两种不同的IgG或Fab进行化学交联产生的,这些试剂与抗体的硫醇和原发胺群特异性反应。[3,4]尽管以这种方式制备的几个BSAB已促进了临床试验,但[5-7]当前开发的绝大多数BSAB是通过重组抗体工程产生的。超过100种不同格式的多特异性抗体(MSAB)是基于免疫球蛋白G(IgG)或其成分进行了设计的(在参考文献[1]),有些包含FC,而另一些则没有。众所周知的无FC格式示例是串联单链可变片段(SCFV)[8]和串联纳米词。[9]中,由串联抗CD19和抗CD3 SCFV(blinatumomomab)组成的双特异性T细胞Endager(咬)是第一个FDA认可的BSAB,用于治疗急性淋巴细胞性白血病。[10,11]含有FC的天然IgG是对称的。向IgG引入双特异性或不对称性能,已经开发了各种方法来有利于异二聚体重型链配对。一些突出的例子是旋钮孔,[12]基于结构性的诱变,[13]和骨膜转向[14],这些诱变有利于异二聚体或脱离FC的同构化。此外,将旋钮孔和附加IgG的两个臂之一与另一个SCFV或FAB相加的一个允许组装Tristexific抗体。[15]
T细胞激活所需的。使用慢病毒或复古病毒载体将所得的汽车结构永久整合到患者T细胞的基因组中,从而导致汽车在转导的T细胞上永久表达。然后将细胞送回患者(自体疗法) - 降低淋巴结障碍的预处理方案(图2)。CAR -T细胞具有其抗原特异性 - 有效地重定向,现在通过SCFV以主要的兼容性非依赖性方式通过SCFV实现了抗原识别。在与靶细胞表面表达的Cognate抗原接合后,CAR -T细胞会经历抗Gen特异性激活,增殖,细胞因子促进和细胞毒性。现在已经证明了使用慢病毒和逆转录病毒技术生成犬T细胞的可行性,并证实了它们在体外经历抗原特异性T细胞激活和效应子功能的能力。2–6个优化的制造方案现已发布针对犬T细胞,在几个重要方面与人类CAR-T细胞的制造有所不同,包括
新的免疫检查点正在出现,以提高对免疫药物的反应率。由于参与肿瘤微环境的免疫抑制,腺苷A 2A受体(A 2A R)被提议作为免疫发育的靶标。封锁2A R可以恢复肿瘤免疫力,从而改善患者的预后。在这里,我们描述了通过噬菌体显示的人A 2A R(HA 2A R)的有效,选择性和抑制肿瘤抗体拮抗剂的发现。We con- structed and screened four single-chain variable fragment (scFv) libraries—two synthetic and two immunized—against hA 2A R and antagonist-stabilized hA 2A R. After biopanning and ELISA screening, scFv hits were reformatted to human IgG and triaged in a series of cellular binding and functional assays to identify a lead candidate.铅候选者TB206-001散布了HA 2A R-Over表达HEK293细胞的纳摩尔结合;与小鼠和cynomolgus a 2a r的交叉反应性,但不是人类A 1,2b或3受体; HA 2A R在HA 2A R-r-evercress表达HEK293细胞和外周血单核细胞(PBMC)中的功能拮抗作用;结肠肿瘤的HUCD34-NCG小鼠中的肿瘤抑制活性。鉴于其治疗特性,TB206-001是将其纳入下一代双特异性免疫治疗药的良好候选者。
折叠式和展开的分子选择用于热力学稳定性的选择是最新的发展是使用噬菌体显示器来选择具有改善热力学性能的蛋白质。通常,蛋白质稳定性是生物技术应用中的关键因素,无论是在升高温度还是在37°C下在生物医学应用中延长持续时间,并且通常与蛋白质搁板寿命相关。只有只有正确折叠的完整分子,因此功能结合位点才能与固定的配体相互作用,只要非本性蛋白质典型的非特异性相互作用可以有效地选择,则该形式可以通过噬菌体显示。在这些条件下,只要没有其他突变改变结合位点,功能性配体结合的选择有利于在噬菌体上更高的多肽突变体,即噬菌体,即较高百分比的分子位于本地状态的多肽突变体。作为一个序列,使用噬菌体显示的“正常”选择始终包括正确折叠的库成员的固有选择,因此在可接受的总体属性中选择了“复合”选择。有几位研究者[16-18]指出了这种观察结果,并在一项研究[19]中进行了系统的测试并证明,其中最佳折叠和最稳定的SCFV(单链抗体片段)可以从具有识别结合常数的一组SCFV中选择,但具有不同的热力学和折叠性和折叠性质。
blcl = b淋巴细胞细胞系; Bli =生物发光成像; CAR =嵌合抗原受体; EBV =爱泼斯坦 - 巴尔病毒; HLA =人白细胞抗原; IFN-γ=干扰素伽马; IL-4 =白介素4; IL-5 =白介素5; IL-6 =白介素6; ITAM =基于免疫受体酪氨酸的活化基序; ln =狼疮肾炎; MS =多发性硬化症; ntd =未转导的; PBMC =外周血单核细胞; PHAB,PHA爆炸; SCFV =单链变量片段; SLE =全身性红斑狼疮; TCR = T细胞受体; th2 = t助手2; tm-ic =跨膜构成细胞; TNF-α=肿瘤坏死因子α; VCN =矢量复制号。