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使用CRISPR-CAS9，单链DNA寡核苷酸和原生质体再生
基因组编辑需要将DNA序列插入特定位置。涉及定期间隔短的短文重复序列（CRISPRS）和CRISPR相关（CAS）蛋白质的方案依赖于同源性维修，需要费力的矢量构造，并且效率低。DNA寡核苷酸可以通过非同源末端连接用作靶向插入的供体。我们的简单协议通过使用聚乙烯乙二醇将非修饰的单链DNA DNA寡核苷酸和CRISPR-CAS9核糖核蛋白输送到原生质体中，从而消除了对昂贵的设备和矢量结构的需求。，我们在烟草本尼亚娜纳（Nicotiana Benthamiana）中实现了高达50.0％的靶向插入频率，而无需抗生素选择即可快速循环胸腺橄榄石。使用每个同源臂中包含27 nt的60 nt供体，22个再生植物中有6个显示出靶向插入，其中1个包含6 bp Eco RI位点的精确插入。全基因组测序表明，DNA仅插入靶向位置，遗传分析表明，插入到下一代的插入序列。
通过基因打靶和随后的单链退火介导的标记基因切除，在植物中对 miRNA 靶位进行精确的基因组编辑
基因打靶 (GT) 能够使用供体 DNA 作为模板进行精确的基因组修饰（例如，引入碱基替换）。结合用于选择 GT 细胞的选择标记的干净切除，GT 有望成为一种标准的、普遍适用的碱基编辑系统。之前，我们展示了通过 piggyBac 转座子从水稻中 GT 修饰的位点进行标记切除。然而，piggyBac 介导的标记切除的局限性在于它只能识别 TTAA 序列。最近，我们提出了一种新颖的通用精确基因组编辑系统，该系统由 GT 和随后的单链退火 (SSA) 介导的标记切除组成，原则上不受靶序列的限制。在本研究中，我们将碱基替换引入了 OsCly1 基因的 microRNA miR172 靶位点，OsCly1 基因是参与闭花授粉开花的大麦 Cleistogamy1 基因的直系同源物。为确保有效的 SSA，GT 载体在选择标记的两端都含有 1.2 kb 的重叠序列。使用带有重叠序列的载体进行正负选择介导的 GT 的频率与使用不带重叠序列的 piggyBac 介导的标记切除载体的频率相当，在 T 0 代中，SSA 介导的标记切除频率计算为 ∼ 40%。这个频率被认为足以产生无标记细胞，尽管它低于使用 piggyBac 介导的标记切除的频率（接近 100%）。到目前为止，使用碱基编辑器和基于 CRISPR/Cas9 的 prime 编辑系统在目标基因的不连续多个碱基中引入精确替换已经相当困难。在这里，利用 GT 和我们的 SSA 介导的标记切除系统，我们成功地在 OsCly1 基因的 miR172 靶位点上不仅实现了单个碱基的精确替换，而且还实现了人工不连续的多个碱基的精确替换。
向无碳经济转型过程中的搁浅资产
由于可再生能源技术的意外突破，以及各国政府在巴黎承诺将全球变暖限制在 1.5 或 2°C 的背景下加强气候政策，化石燃料行业的资产面临着失去市场价值的风险。搁浅资产的出现是因为对这两类事件的未来时间的不确定性，以及巨大的跨期和跨部门投资调整成本。资产搁浅主要影响 20 家最大的石油、天然气和煤炭公司，自 1965 年以来，它们至少对全球变暖的三分之一负有责任，但它也影响碳密集型行业，如钢铁、铝、水泥、塑料和温室园艺。向无碳经济的无序过渡将导致搁浅资产和法律索赔。机构投资者应该意识到这些金融风险。搁浅资产的更宽泛定义还包括依赖化石燃料出口的国家和拥有特定技术技能的工人。
响应CRISPR/CAS9引起双重链断的方法，有利于同源指导的维修选择
摘要：精确的基因编辑是 - 或很快就会用于多种疾病的临床用途，并且正在开发更多应用。由单个诱导RNA（SGRNA）导演的可编程核酸酶CAS9可以在基因组DNA的靶位点中引入双链断裂（DSB），这构成了使用这种新技术的基因编辑的初始步骤。在哺乳动物中，两种途径占主导地位的DSB修复 - 非同源末端连接（NHEJ）和同源指导的修复（HDR） - 基因编辑的结果主要取决于这两个修复途径之间的选择。尽管HDR以其高度有吸引力，但在生物学环境中，修复途径的选择是有偏见的。哺乳动物细胞优先通过多种机制利用NHEJ：NHEJ在整个细胞周期中都活跃，而HDR仅限于S / G2阶段； NHEJ比HDR快。 NHEJ抑制了HDR过程。这表明可以通过操纵细胞修复途径的选择来实现对编程DNA病变结果的明确控制。在这篇综述中，我们总结了DSB修复途径，基于DNA切除的选择选择的机制，并在研究策略中取得了进展，该策略基于操纵修复途径的选择以增加哺乳动物细胞的HDR频率，从而有利于Cas9介导的HDR。还讨论了提高HDR效率的其余问题。本评论应促进CRISPR / CAS9技术的开发，以实现更精确的基因编辑。
巴基斯坦有可能在长期产能过剩和昂贵的电力进口煤炭和液化天然气发电厂的风险中，根据新的电力计划
巴基斯坦先前被确定为热煤出口商的最后几个剩余增长市场之一，随着较成熟的主要煤炭进口商离开化石燃料，需要支撑需求。印度尼西亚资源部长 - 全球最大的热煤出口国 - 最近表示，该国将寻求扩大向巴基斯坦，孟加拉国和越南的出口，以此作为其最大的中国和印度等最大市场的出口。14孟加拉国现在正计划通过取消13GW的煤炭电力项目，从而大大削减其煤炭电源的建设。15同时，越南面临越来越多的困难，因此为其煤炭电力计划筹集资金。越南国家电力开发指导委员会建议将15GW的煤炭发电厂报废。16随着巴基斯坦的转移，潜在的增长市场似乎越来越有可能使煤炭出口商失望。
航空航天工程学科和标准
推断推进系统参数的变化如何影响性能。解释模型火箭发动机推力的测量值。设计稳定的模型火箭。收集与模型火箭发射相关的性能数据，例如最大飞行高度。使用火箭发动机测试数据和间接高度测量计算最大高度。根据每个组件的特性选择航天器组件。根据每个组件的特性选择航天器着陆系统。