XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search SystemTLR3
一种新颖的定义TLR3激动剂为有效的疫苗佐剂
由Toll样受体3（TLR3）识别的合成双链RNA类似物是疫苗的有吸引力的辅助候选者，尤其是针对细胞内病原体或肿瘤，因为它们具有增强T细胞和抗体反应的能力。尽管Poly（I：C）是具有有效辅助性的代表性DSRNA，但由于异质分子大小，活性不一致，稳定性和毒性不一致，其临床应用受到限制。为了克服这些局限性，我们通过使用PCR偶联的双向体外转录开发了一种新型的基于DSRNA的TSRNA TLR3激动剂（NVT）。琼脂糖凝胶电泳和反相HPLC分析表明，NVT是一个单个275 kDa均匀分子。nvt似乎在6个月的加速存储条件下不受影响，因为其外观，浓度和分子大小不受影响。此外，在良好的实验室实践下对毒性的临床前评估表明，NVT是一种安全物质，没有任何严重毒性迹象。NVT刺激了TLR3，并增加了病毒核酸传感器TLR3，MDA-5和RIG-1的表达。当肌肉内注射到C57BL/6小鼠中时，椭圆蛋白（OVA）和NVT高度增加了树突状细胞（DC）的迁移（DC），巨噬细胞和中性粒细胞与单独使用OVA相比。此外，NVT基本上诱导了直流成熟和激活的表型标记，包括MHC-II，CD40，CD80和CD86以及IFN-B的产生。同时，NVT增加了Th1型T细胞的水平，例如IFN-G + CD4 +和IFN-G + CD8 +细胞，响应OVA刺激。此外，NVT表现出适当的辅助性，因为它升高了OVA特异性IgG，尤其是IgG2C（Th1-型）的较高水平，但IgG1较低（Th2-Type）。总的来说，我们建议具有适当安全性和有效性的NVT是一种新颖而有希望的辅助疫苗，尤其是那些需要T细胞介导的免疫力的疫苗，例如病毒和癌症疫苗。
全基因组 CRISPR 筛选确定 TLR3 信号通路的调控因子
摘要 TLR 的一个子集专门通过对内体进行核酸检测来检测进入的病原体。其中，TLR3 感知内体中双链 RNA 的异常存在，并通过激活 NF- j B 和 IRF3 启动强大的先天免疫反应。然而，控制 TLR3 调节的机制仍然不甚明了。为了确定参与 TLR3 通路的新分子参与者，我们使用 CRISPR/Cas9 技术进行了全基因组筛选。我们生成了携带 NF- j B 反应启动子的 TLR3 + 报告细胞，该启动子控制 GFP 表达。接下来用单向导 RNA (sgRNA) 文库转导细胞，用 poly(I:C) 进行连续刺激，并对 GFP 阴性细胞进行分类。通过深度测序估计的 sgRNA 富集确定了 TLR3 诱导的 NF-j B 激活所需的基因。在这些基因中，通过筛选确定了五个已知与 TLR3 通路密切相关的基因，包括 TLR3 本身和伴侣 UNC93B1，从而验证了我们的策略。我们进一步研究了前 40 个基因，并重点研究了转录因子芳烃受体 (AhR)。AhR 的消耗对 TLR3 反应有双重影响，消除了 IL-8 的产生并增强了 IP-10 的释放。此外，在暴露于 poly(I:C) 的原代人巨噬细胞中，AhR 激活增强了 IL-8 并减少了 IP-10 的释放。总体而言，这些结果表明 AhR 在 TLR3 细胞先天免疫反应中发挥作用。
LAMP3+树突状细胞与T
放射疗法（RT）触发的I型I型干扰素（IFN-I）产生的抽象背景癌症中型癌症主要取决于胞质双链DNA（DSDNA） - 介导的CGAS/STING信号传导，并提高癌症免疫原性，并增强对抗肿瘤免疫反应对治疗效率的提高。然而，结直肠癌（CRC）的CGA/刺伤缺乏可能会抑制RT诱导的抗肿瘤免疫力。因此，我们旨在评估RT在CRC患者中诱导的DSRNA介导的抗肿瘤免疫反应的重要性。通过基于细胞的测定（共培养测定，共聚焦显微镜，药理抑制和免疫荧光染色）和体内实验评估了胞质DSRNA水平及其传感器。收集了接受术前化学疗法（NEOCRT）的CRC患者的活检和手术组织，以进行多重细胞因子测定，免疫组织化学分析和SNP基因分型。我们还产生了癌症特异性腺病毒相关病毒（AAV）-IFNβ1构建体，以评估其与RT结合的治疗疗效，并通过流式细胞仪和RNA-SEQ分析了免疫谱。结果我们的研究表明，RT刺激DSRNA从癌细胞中自主释放，以激活TLR3介导的IFN-I特征，以促进抗肿瘤免疫反应。具有功能失调TLR3变体的患者的血清IFN-I相关细胞因子和肿瘤内CD8 +免疫细胞的血清水平降低，Neocrt治疗后无病的生存率较短。以癌症为主的构造AAV-IFNβ1显着改善了对RT的反应，从而系统地消除了远处的肿瘤，并在有缺陷的TLR3临床前模型中长期生存。结论我们的结果支持增加癌症的IFNβ1表达是一种免疫治疗策略，可增强患有功能功能功能性TLR3晚期CRC患者的RT诱导的抗肿瘤免疫反应。
通过RNA识别的先天免疫反应 - 生物化学
Tollike受体：对先天免疫的最新见解和观点。免疫，57，649 - 673。4）Rehwinkel，J。＆Gack，M.U。（2020）RIG-I样受体：它们在RNA传感中的调节和作用。nat。修订版免疫。，20，537 - 551。5）Venkataraman，T.，Valdes，M.，Elsby，R.，Kakuta，S.，Cace- Res，G.，Saijo，S.，Iwakura，Y。，＆Barber，G.N。（2007）DEXD/H盒RNA解旋酶LGP2的损失表现出不同的抗病毒反应。J. Immunol。 ，178，6444 - 6455。 6）Satoh，T.，Kato，H.，Kumagai，Y.，Yoneyama，M.，Sato，S.，Matsushita，K.，Tsujimura，T.，Fujita，T. （2010）LGP2是RIG-II和MDA5介导的抗病毒反应的积极调节剂。 proc。 natl。 学院。 SCI。 美国，107，1512 - 1517。 7）Bruns，A.M. （2014）先天免疫传感器LGP2通过调节MDA5 - RNA相互作用和弹性组件来激活抗病毒信号传导。 mol。 单元格，55，771 - 781。 8）乌鸦，Y.J. ＆Stetson，D.B。 （2022）I型干扰素：10年了。 nat。 修订版 免疫。 ，22，471 - 483。 9）村上，S。 （2022）mRNA中的隐藏代码：m（6）a对基因表达的控制。摩尔。 单元格，82，2236 - 2251。 10）Ablasser，A。 ＆Chen，Z.J。 （2019）CGA在行动中：在免疫和炎症中扩大角色。 Science，363，EAAT8657。J. Immunol。，178，6444 - 6455。6）Satoh，T.，Kato，H.，Kumagai，Y.，Yoneyama，M.，Sato，S.，Matsushita，K.，Tsujimura，T.，Fujita，T.（2010）LGP2是RIG-II和MDA5介导的抗病毒反应的积极调节剂。proc。natl。学院。SCI。 美国，107，1512 - 1517。 7）Bruns，A.M. （2014）先天免疫传感器LGP2通过调节MDA5 - RNA相互作用和弹性组件来激活抗病毒信号传导。 mol。 单元格，55，771 - 781。 8）乌鸦，Y.J. ＆Stetson，D.B。 （2022）I型干扰素：10年了。 nat。 修订版 免疫。 ，22，471 - 483。 9）村上，S。 （2022）mRNA中的隐藏代码：m（6）a对基因表达的控制。摩尔。 单元格，82，2236 - 2251。 10）Ablasser，A。 ＆Chen，Z.J。 （2019）CGA在行动中：在免疫和炎症中扩大角色。 Science，363，EAAT8657。SCI。美国，107，1512 - 1517。7）Bruns，A.M.（2014）先天免疫传感器LGP2通过调节MDA5 - RNA相互作用和弹性组件来激活抗病毒信号传导。mol。单元格，55，771 - 781。8）乌鸦，Y.J.＆Stetson，D.B。（2022）I型干扰素：10年了。nat。修订版免疫。，22，471 - 483。9）村上，S。（2022）mRNA中的隐藏代码：m（6）a对基因表达的控制。摩尔。单元格，82，2236 - 2251。10）Ablasser，A。＆Chen，Z.J。（2019）CGA在行动中：在免疫和炎症中扩大角色。Science，363，EAAT8657。11）Ablasser，A。＆Hur，S。（2020）调节CGAS和RLR介导的对核酸的免疫力。nat。免疫。，21，17 - 29。12）Hopfner，K.P。＆Hornung，V。（2020）CGAS刺信信号传导的分子机制和细胞功能。nat。修订版mol。细胞生物。 ，21，501 - 521。 13）伦纳德（J.N.），吉兰多（R. （2008）TLR3通过合作受体二聚体信号形式。 proc。 natl。 学院。 SCI。 美国，105，258 - 263。 14） （2008）带有双链RNA的Toll样重复3信号传导的结构基础。 Science，320，379 - 381。 15）Bell，J.K.，Botos，I.，Hall，P.R。，Askins，J.，Shiloach，J.，Segal，D.M。和Davies，D.R。 （2005）Toll样受体3配体结合结构域的分子结构。 proc。 natl。 学院。 SCI。 美国，102，10976 - 10980。 16）Choe，J.，Kelker，M.S。和Wilson，I.A。 （2005）人Toll样受体3（TLR3）外生域的晶体结构。 科学，309，581 - 585。 17）塔布塔（K. （2004）Toll样受体9和3作为对小鼠巨细胞病毒感染的先天免疫防御的重要组成部分。 proc。 SCI。细胞生物。，21，501 - 521。13）伦纳德（J.N.），吉兰多（R.（2008）TLR3通过合作受体二聚体信号形式。proc。natl。学院。SCI。 美国，105，258 - 263。 14） （2008）带有双链RNA的Toll样重复3信号传导的结构基础。 Science，320，379 - 381。 15）Bell，J.K.，Botos，I.，Hall，P.R。，Askins，J.，Shiloach，J.，Segal，D.M。和Davies，D.R。 （2005）Toll样受体3配体结合结构域的分子结构。 proc。 natl。 学院。 SCI。 美国，102，10976 - 10980。 16）Choe，J.，Kelker，M.S。和Wilson，I.A。 （2005）人Toll样受体3（TLR3）外生域的晶体结构。 科学，309，581 - 585。 17）塔布塔（K. （2004）Toll样受体9和3作为对小鼠巨细胞病毒感染的先天免疫防御的重要组成部分。 proc。 SCI。SCI。美国，105，258 - 263。14）（2008）带有双链RNA的Toll样重复3信号传导的结构基础。Science，320，379 - 381。15）Bell，J.K.，Botos，I.，Hall，P.R。，Askins，J.，Shiloach，J.，Segal，D.M。和Davies，D.R。（2005）Toll样受体3配体结合结构域的分子结构。proc。natl。学院。SCI。 美国，102，10976 - 10980。 16）Choe，J.，Kelker，M.S。和Wilson，I.A。 （2005）人Toll样受体3（TLR3）外生域的晶体结构。 科学，309，581 - 585。 17）塔布塔（K. （2004）Toll样受体9和3作为对小鼠巨细胞病毒感染的先天免疫防御的重要组成部分。 proc。 SCI。SCI。美国，102，10976 - 10980。16）Choe，J.，Kelker，M.S。和Wilson，I.A。（2005）人Toll样受体3（TLR3）外生域的晶体结构。科学，309，581 - 585。17）塔布塔（K.（2004）Toll样受体9和3作为对小鼠巨细胞病毒感染的先天免疫防御的重要组成部分。proc。SCI。SCI。natl。学院。美国，101，3516 - 3521。18）Davey，G.M.，Wojtasiak，M.，Proietto，A.I.，Carbone，F.R。，Heath，W.R。，＆Bedoui，S。（2010）剪切边缘：CD8 T细胞免疫的启动：Surpes Simperx Simplex Virus 1型需要Cognate Tlr3在Vivo中的表达。J. Immunol。 ，184，2243 - 2246。 19）Oshiumi，H.，Okamoto，M.，Fujii，K.，Kawanishi，T.，Matsu-Moto，M.，Koike，S。，＆Seya，T。（2011）TLR3/TICAM-1途径是对Poliovi-Rus Rus Infection的先天免疫反应的强制性。 J. Immunol。 ，187，5320 - 5327。 20）张，S.Y. （2007）疱疹患者的TLR3缺乏效率 -J. Immunol。，184，2243 - 2246。19）Oshiumi，H.，Okamoto，M.，Fujii，K.，Kawanishi，T.，Matsu-Moto，M.，Koike，S。，＆Seya，T。（2011）TLR3/TICAM-1途径是对Poliovi-Rus Rus Infection的先天免疫反应的强制性。J. Immunol。 ，187，5320 - 5327。 20）张，S.Y. （2007）疱疹患者的TLR3缺乏效率 -J. Immunol。，187，5320 - 5327。20）张，S.Y.（2007）疱疹患者的TLR3缺乏效率 -
危重 COVID-19 肺炎的人类遗传和免疫决定因素
SARS-CoV-2 感染在大多数个体中是良性的，但在约 10% 的病例中，它会引发低氧血症性 COVID-19 肺炎，在约 3% 的病例中会发展为危重。从儿童期开始，随之而来的死亡风险（约 1%）每五年翻一番，男性比女性高约 1.5 倍。危重 COVID-19 肺炎的分子和细胞决定因素是什么？约 1-5% 的 60 岁以下危重肺炎患者存在先天性 I 型 IFN 缺陷，包括常染色体 TLR3 和 X 连锁 TLR7 缺陷，老年患者中的比例较低。约 15-20% 的 70 岁以上危重肺炎患者存在中和 IFN- α 、- β 和/或- ω 的自身抗体，这些抗体在男性中比女性更常见，年轻患者中的比例较低。因此，至少 15% 的严重 COVID-19 肺炎病例显然可以得到解释。呼吸道上皮细胞和浆细胞样树突状细胞分别产生 TLR3 和 TLR7 依赖的 I 型干扰素，这对于宿主防御 SARS-CoV-2 至关重要。感染最初几天呼吸道 I 型干扰素免疫力不足可能是病毒传播的原因，导致肺部和全身炎症，其方式可能取决于年龄和性别。
将类似Toll样受体激动剂与免疫检查点阻断相结合会影响抗肿瘤疫苗功效
抽象背景T细胞检查点受体在激活T细胞时会表达，并且这些受体的表达或信号的调节可以改变T细胞的功能及其抗肿瘤功效。我们以前发现，用同源抗原激活的T细胞在PD-1的表达中增加了，并且在存在多个Toll-lik-Hodyor（TLR）激动剂的情况下会减弱这一点，尤其是TLR3 Plus TLR9。在当前报告中，我们试图研究将TLR激动剂与免疫检查点封锁相结合是否可以进一步增加鼠类肿瘤模型中疫苗介导的T细胞抗肿瘤免疫。方法TLR激动剂（TLR3 Plus TLR9）和免疫检查点抑制剂（靶向PD-1，CTLA-4，LAG-3，TIM-3或VISTA的抗体）与疫苗或疫苗激活的CD8+T细胞一起递送，并与e.g7-ova或myc-cap-cap tumor-tmore-tmore-ciace一起递送。肿瘤的生长，然后通过流式细胞仪收集和分析。结果与TLR激动剂和αCTLA-4共同施用的siinfekl肽疫苗的含有siinfekl肽疫苗的免疫相比，与单独使用TLR激动剂或单独使用αCTLA-4免疫相比，抗肿瘤功效更大。相反，当疫苗和TLR激动剂与αPd-1。TLR激动剂抑制了调节性T细胞（TREG）的PD-1表达，并激活了该人群。含有肿瘤小鼠中Treg的耗尽，即使在存在αPD-1的情况下，这种联合疗法也会引起这种联合疗法的抗肿瘤功效。将疫苗接种与TLR激动剂和αCTLA-4或αLAG-3结合使用，与与αIM-3或αVista的组合相比，抗肿瘤具有更大的抗肿瘤。结论TLR激动剂和αCTLA-4或αLAG-3的组合可以进一步提高癌症疫苗的疗效，当将αPD-1与TLR3和TLR9和TLR9激动剂组合时，由于Tregs激活Tregs，未观察到使用αPD-1的效果。这些数据表明，TLR激动剂和免疫检查点阻滞的最佳组合可能会提高人类抗癌疫苗的疗效。
基于2- ...病毒17-00035（1）.pdf
摘要：共同19号死亡人数已达到700万，其中4％的死亡发生在儿童和青少年中。在巴西，大约有1500名11岁的儿童死于该疾病。儿童中最常见的症状是呼吸道，可能发展为严重疾病，例如严重的急性呼吸综合症（SARS）和MIS-C。研究表明，合并症和遗传因素，例如免疫反应基因中的多态性，可能会影响COVID-19的严重程度。这项研究研究了COVID-19患者先天免疫反应基因中单核苷酸多态性（SNP）的发生。从13岁以下的儿童中分析了七十三个样本，该儿童在Covid-19，在Jo-O Paulo II儿童医院住院。评估的SNP为TLR8（1）（rs3764879），TLR8（2）（RS2407992），TLR7（RS179008），TLR3（RS3775291），TIRAP（tirap），TIRAP（RS8177374）和MC MCP-1（RS8177374）和MCP-1（rs8177374）和102466666666666666（RS）（RS）中度，严重和关键的共同19岁。识别SNP，PCR和测序。与全球ALFA，全球1000个基因组，全局GNOMAD，American 1000基因组和美国GNOMAD数据库中描述的频率相比，获得的SNP的频率并不差异，除了TLR7中的SNP。将严重和关键病例与轻度和中度病例进行比较，我们发现与TLR8（1），TLR7，TLR3和TIRAP中突变有关的相对风险更高（P <0.05）。在TLR8（2）和MCP-1中没有发现SNP的关联。我们的分析表明，SNP与先天免疫反应基因中的相关性与COVID-19（或SARS-COV-2感染儿童）的症状严重程度之间的关系。
2025; 15（6）：2470-2486。 doi：10.7150/thno.100687研究论文poly（i：c）诱导的炎症需要激活Toll样受体3/Ca 2+
pannexin1（panx1）是一种糖蛋白，在整个脊椎动物组织中无处不在。在细胞膜中，它形成非选择性半通道（Panx1 HC），允许释放ATP。这种细胞外ATP触发与病原体（包括病毒）免疫反应有关的嘌呤能信号。虽然已知Panx1 HC的活性被某些病毒升高，但潜在的分子机制仍然难以捉摸。方法：在这项研究中，我们使用了poly（i：c），这是一种构成病毒感染标志的双链RNA类似物。腹膜巨噬细胞是从野生型和panx1敲除小鼠那里获得的。通过RT-QPCR定量促炎细胞因子的mRNA水平。我们还通过染料摄取测定评估了半通道活性，而使用Fura-2和GCAMP6研究了Ca 2+信号。PANX1-P2X 7 R相互作用通过接近连接测定研究。结果：PANX1表达和活性对于RAW264.7细胞和腹膜巨噬细胞中Poly（I：C）诱导的促炎反应至关重要。在用MPANX1（HELA-MPANX1）和RAW264.7细胞转染的HeLa细胞中，Poly（I：C）以浓度依赖性方式增加了PANX1 HC活性，这受到10 Panx1的抑制，这是一种选择性地阻止PANX1 HC的肽。此外，poly（i：c）诱导的PANX1 HC活性的上升与细胞内Ca 2+信号的迅速增加相关，这取决于TLR3和P2X 7 R活性。有趣的是，持续暴露于poly（i：c）促进了panx1-p2x 7 r复合物的相互作用和内在化，取决于CAMKII，PANX1 HC和P2X 7 R活性。通过使用BAPTA-AM，使用KN-62的CAMKII阻塞或使用DB-CAMP激活PLY（I：C）诱导的PANX1 HC活性的增加完全阻止了Ca 2+螯合。这些发现与来自Panx1突变体的数据一致，这些数据避免或模仿激酶靶位点的磷酸化。支持这一发现，我们证明了CAMKII活性对于巨噬细胞中聚（I：C）触发的炎症反应至关重要。结论：TLR3/CA 2+/CAMKII/PANX1 HC途径对于策划对病毒模式的细胞反应至关重要，并提出了预防感染和减轻与基于RNA的基于RNA的病毒感染的有害作用的潜在新型目标。
通过TRPM8 RNA依赖性TLR3-NF- ...
炎症是前列腺组织的常见条件，其对癌变的影响是高度争论的。微生物定殖是较小比例的前列腺炎病例的有据可查的原因，但目前尚不清楚大多数无菌炎症报告的基础是什么。在这里，前列腺细胞中PSA表达的雄激素独立的浮动使我们确定了瞬态受体电位阳离子阳离子通道亚家族M成员8（TRPM8）基因在无菌弹药中的基因。前列腺细胞将TRPM8 RNA秘密地塞入细胞外囊泡（EV），在上皮癌细胞EV内吞作用后，Primes TLR3/NF-KB介导的炎症信号传导。此外，表达TRPM8 RNA的翻译缺陷形式的前列腺癌异种移植物在细胞外基质中含有较少的胶原蛋白I型I型I型I型I型，与对照组型相比，在纤维化NK细胞中的显着性NK细胞和更大的坏死区域的较大。这些发现意味着TRPM8的持续雄激素独立的表达构成抗癌先天免疫的影响，这可能构成影响前列腺癌预后的临床相关状况。
使用免疫信息技术对丙型肝炎病毒感染的多诊断疫苗的计算设计
乙型肝炎病毒（HCV）是一种血液传播的病原体，影响了全球约2亿个人。 针对丙型肝炎病毒的免疫接种旨在增强T细胞反应，并被确定为成功的抗病毒疗法的关键组成部分。 然而，尽管疫苗的进展令人满意，但试图介导人们临床相关的抗HCV活动的尝试主要失败。 在这项研究中，我们使用了一系列免疫信息方法来设计一种基于多焦肽的疫苗针对HCV，通过强调来自病毒蛋白NS5B的6种保守表位。 使用结构建模和表位 - 主持互动分析，检查了潜在的表位与GPGPG接头之间的可能抗原结合。 将辅助（β-防御素）引入N末端，以增加疫苗构建体的免疫原性。 分子动力学模拟揭示了疫苗的最稳定结构。 设计的疫苗本质上是潜在的抗原性，并且可以与受体TLR2和TLR3形成稳定且显着的相互作用。 还对疫苗构建体进行了硅内克隆，这证实了其在载体中的表达效率。 的发现表明，设计的多能量疫苗具有巨大的临床前和临床研究潜力，这是解决与HCV感染相关的问题的重要一步。乙型肝炎病毒（HCV）是一种血液传播的病原体，影响了全球约2亿个人。针对丙型肝炎病毒的免疫接种旨在增强T细胞反应，并被确定为成功的抗病毒疗法的关键组成部分。然而，尽管疫苗的进展令人满意，但试图介导人们临床相关的抗HCV活动的尝试主要失败。在这项研究中，我们使用了一系列免疫信息方法来设计一种基于多焦肽的疫苗针对HCV，通过强调来自病毒蛋白NS5B的6种保守表位。使用结构建模和表位 - 主持互动分析，检查了潜在的表位与GPGPG接头之间的可能抗原结合。将辅助（β-防御素）引入N末端，以增加疫苗构建体的免疫原性。分子动力学模拟揭示了疫苗的最稳定结构。设计的疫苗本质上是潜在的抗原性，并且可以与受体TLR2和TLR3形成稳定且显着的相互作用。还对疫苗构建体进行了硅内克隆，这证实了其在载体中的表达效率。的发现表明，设计的多能量疫苗具有巨大的临床前和临床研究潜力，这是解决与HCV感染相关的问题的重要一步。