美国第五巡回上诉法院,编号21-40680 德克萨斯州;阿拉巴马州;阿肯色州;路易斯安那州;内布拉斯加州;南卡罗来纳州;西弗吉尼亚州;堪萨斯州;密西西比州,原告——上诉人,诉美利坚合众国;美国国土安全部部长 Alejandro Mayorkas;美国海关和边境保护局代理局长 Troy Miller;美国移民和海关执法局代理局长 Tae D. Johnson;美国移民和海关执法局局长 Ur M. Jaddou公民及移民服务局,被告——上诉人,Elizabeth Diaz;Jose Magana-Salgado;Karina Ruiz De Diaz;Jin Park;Denise Romero;安吉尔·席尔瓦;摩西·卡毛·切格;全孝媛;布兰卡·冈萨雷斯;玛丽亚·罗查;玛丽亚·迪亚兹;埃莉·马里索尔·埃斯特拉达;达尔文·委拉斯开兹;奥斯卡·阿尔瓦雷斯;路易斯·A·拉斐尔;南奇·J·帕拉西奥斯·戈迪内斯;金正宇;卡洛斯·阿吉拉尔·冈萨雷斯;新泽西州,介入者被告——上诉人。
美国第五巡回上诉法院,编号21-40680 德克萨斯州;阿拉巴马州;阿肯色州;路易斯安那州;内布拉斯加州;南卡罗来纳州;西弗吉尼亚州;堪萨斯州;密西西比州,原告——上诉人,诉美利坚合众国;美国国土安全部部长 Alejandro Mayorkas;美国海关和边境保护局代理局长 Troy Miller;美国移民和海关执法局代理局长 Tae D. Johnson;美国移民和海关执法局局长 Ur M. Jaddou公民及移民服务局,被告——上诉人,Elizabeth Diaz;Jose Magana-Salgado;Karina Ruiz De Diaz;Jin Park;Denise Romero;安吉尔·席尔瓦;摩西·卡毛·切格;全孝媛;布兰卡·冈萨雷斯;玛丽亚·罗查;玛丽亚·迪亚兹;埃莉·马里索尔·埃斯特拉达;达尔文·委拉斯开兹;奥斯卡·阿尔瓦雷斯;路易斯·A·拉斐尔;南奇·J·帕拉西奥斯·戈迪内斯;金正宇;卡洛斯·阿吉拉尔·冈萨雷斯;新泽西州,介入者被告——上诉人。
图 1. 在室温下保存在 Norgen 唾液 DNA 保存剂中超过 2 年的 DNA 稳定性。从众多捐赠者中收集唾液样本并混合,然后将等量的 Norgen 唾液 DNA 保存剂添加到唾液中。然后将保存的唾液在室温下保存长达 24 个月。随后在 4 个月、8 个月、16 个月和 24 个月时使用 Norgen 唾液 DNA 分离试剂盒 (Cat. RU45400) 从 0.5 mL 保存的唾液样本中分离唾液 DNA。为了进行目视分析,将 10 µL 纯化的 DNA 在琼脂糖 TAE 凝胶上运行。从中可以看出,唾液样本在 Norgen 唾液 DNA 保存剂中在室温下保存 24 个月后,没有 DNA 降解的迹象。此外,在整个 24 个月期间,DNA 的大小都保持在 24 kb 以上。M:Norgen 的 UltraRanger 1 Kb DNA Ladder(目录号 12100)。
美国第五巡回上诉法院,第 21-40680 号德克萨斯州;阿拉巴马州;阿肯色州;路易斯安那州;内布拉斯加州;南卡罗来纳州;西弗吉尼亚州;堪萨斯州;密西西比州,原告——上诉人,诉美利坚合众国;美国国土安全部部长 Alejandro Mayorkas;美国海关和边境保护局代理局长 Troy Miller;美国移民和海关执法局代理局长 Tae D. Johnson;美国公民及移民服务局局长 Ur M. Jaddou,被告——上诉人,Elizabeth Diaz;Jose Magana-Salgado;Karina Ruiz De Diaz;Jin Park;Denise Romero;Angel Silva;Moses Kamau Chege;Hyo-Won Jeon;布兰卡·冈萨雷斯;玛丽亚·罗查;玛丽亚·迪亚兹;埃莉·马里索尔·埃斯特拉达;达尔文·委拉斯开兹;奥斯卡·阿尔瓦雷斯;路易斯·A·拉斐尔;南奇·J·帕拉西奥斯·戈迪内斯;金正宇;卡洛斯·阿吉拉尔·冈萨雷斯;新泽西州,介入者被告——上诉人。
Michael L. Nosella, 1 , 2 , 7 Tae Hun Kim, 1 , 2 , 3 , 4 , 7 , 8 Shuya Kate Huang, 1 , 2 , 3 , 4 Robert W. Harkness, 1 , 2 , 3 , 4 Monica Goncalves, 5 Alisia Pan, 1 Maria Tereshchenko, 2 Siavash Vahidi, 5 John L. Rubinstein, 1 , 2 , 6 Hyun O. Lee,2 Julie D. Forman-kay,1,2 *和Lewis E. Kay 1,2,2,2,2,3,4,9,9, * 1分子医学计划,生病儿童医院,多伦多,多伦多,M5G 0A4,加拿大2,加拿大2,多伦多,多伦多大学,多伦多大学,M5S 1A8,M5S 1A8,CANACE 3,MI5 STRON,MI5 SORICL STRONT,ME5 ME5 STRONICK MIRECTO 1A8, Canada 4 Department of Chemistry, University of Toronto, Toronto, ON M5S 1A8, Canada 5 Department of Molecular and Cellular Biology, University of Guelph, Guelph, ON N1G 2W1, Canada 6 Department of Medical Biophysics, University of Toronto, Toronto, ON M5S 1A8, Canada 7 These authors contributed equally 8 Present address: Department of Biochemistry, School of Medicine, Case Western Reserve University,克利夫兰,俄亥俄州44106,美国9铅联系 *通信:forman@sickkids.ca(j.d.f.-k.),lewiskay@utoronto.ca(l.e.k.)https://doi.org/10.1016/j.molcel.2023.12.019
图1。有效的宿主基因组DNA去除,而无需降低噬菌体DNA产量。 使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从四个富集的噬菌体培养物中分离总DNA。 在添加提供的裂解之前,进行了DNase I预处理。 布里液,将20单位的DNase I添加到1 ml富集的噬菌体培养物中,并将混合物在室温下孵育20分钟。 DNAase I处理后,遵循该过程。 作为对照,使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从相同4个培养物的等分试样中分离DNA,而无需进行DNase I处理。 进行DNA分析,将10 µL的每50 µL洗脱加载到1x TAE琼脂糖凝胶上。 可以看出,噬菌体DNA被其外套蛋白安全地保护了DNase I治疗,而宿主基因组DNA则被DNase I有效降解。 因此,DNase I预处理导致最终噬菌体洗脱中的宿主GDNA污染较少,而不会影响总噬菌体DNA产量。 车道M是Norgen的Highranger 1 Kb DNA梯子(Cat。 11900)。有效的宿主基因组DNA去除,而无需降低噬菌体DNA产量。使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从四个富集的噬菌体培养物中分离总DNA。在添加提供的裂解之前,进行了DNase I预处理。布里液,将20单位的DNase I添加到1 ml富集的噬菌体培养物中,并将混合物在室温下孵育20分钟。DNAase I处理后,遵循该过程。作为对照,使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从相同4个培养物的等分试样中分离DNA,而无需进行DNase I处理。进行DNA分析,将10 µL的每50 µL洗脱加载到1x TAE琼脂糖凝胶上。可以看出,噬菌体DNA被其外套蛋白安全地保护了DNase I治疗,而宿主基因组DNA则被DNase I有效降解。因此,DNase I预处理导致最终噬菌体洗脱中的宿主GDNA污染较少,而不会影响总噬菌体DNA产量。车道M是Norgen的Highranger 1 Kb DNA梯子(Cat。11900)。
图1。有效的宿主基因组DNA去除,而无需降低噬菌体DNA产量。 使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从四个富集的噬菌体培养物中分离总DNA。 在添加提供的裂解之前,进行了DNase I预处理。 布里液,将20单位的DNase I添加到1 ml富集的噬菌体培养物中,并将混合物在室温下孵育20分钟。 DNAase I处理后,遵循该过程。 作为对照,使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从相同4个培养物的等分试样中分离DNA,而无需进行DNase I处理。 进行DNA分析,将10 µL的每50 µL洗脱加载到1x TAE琼脂糖凝胶上。 可以看出,噬菌体DNA被其外套蛋白安全地保护了DNase I治疗,而宿主基因组DNA则被DNase I有效降解。 因此,DNase I预处理导致最终噬菌体洗脱中的宿主GDNA污染较少,而不会影响总噬菌体DNA产量。 车道M是Norgen的Highranger 1 Kb DNA梯子(Cat。 11900)。有效的宿主基因组DNA去除,而无需降低噬菌体DNA产量。使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从四个富集的噬菌体培养物中分离总DNA。在添加提供的裂解之前,进行了DNase I预处理。布里液,将20单位的DNase I添加到1 ml富集的噬菌体培养物中,并将混合物在室温下孵育20分钟。DNAase I处理后,遵循该过程。作为对照,使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从相同4个培养物的等分试样中分离DNA,而无需进行DNase I处理。进行DNA分析,将10 µL的每50 µL洗脱加载到1x TAE琼脂糖凝胶上。可以看出,噬菌体DNA被其外套蛋白安全地保护了DNase I治疗,而宿主基因组DNA则被DNase I有效降解。因此,DNase I预处理导致最终噬菌体洗脱中的宿主GDNA污染较少,而不会影响总噬菌体DNA产量。车道M是Norgen的Highranger 1 Kb DNA梯子(Cat。11900)。
Arnaud Rouget 也提供了必要的协调支持。报告的其他主要 IEA 作者包括:Julien Armijo(氢能)、Yasmine Arsalane(电力、经济负责人)、Blandine Barreau(新冠疫情影响、恢复计划)、Emi Bertoli(数字化)、Olivia Chen(就业、可负担性负责人)、Trevor Criswell(水电)、Daniel Crow(气候、空气污染负责人)、Hind Couzin(基础设施、政策)、Davide D'Ambrosio(数据科学负责人)、Amrita Dasgupta(氢能、关键矿物)、Michael Drtil(电力)、Darlain Edeme(政策)、Víctor García Tapia(建筑)、Timothy Goodson(建筑负责人)、Emma Gordon(投资、金融负责人)、Bruno Idini(交通)、Jinsun Lim(气候、恢复力)、Hyeji Kim(可负担性)、Tae‐Yoon Kim(燃料供应、关键矿物负责人)、Martin Kueppers(行业、GiS 分析), Luca Lo‐Re(国家自主贡献、碳信用)、Kieran McNamara(电力)、José Bermúdez Menéndez(氢气)、Rebecca Schulz(甲烷、石油和天然气)和 Gianluca Tonolo(能源获取负责人)。Marina Dos Santos 提供了重要支持。
Arnaud Rouget 也提供了必要的协调支持。报告的其他主要 IEA 作者包括:Julien Armijo(氢能)、Yasmine Arsalane(电力、经济负责人)、Blandine Barreau(新冠疫情影响、恢复计划)、Emi Bertoli(数字化)、Olivia Chen(就业、负担能力负责人)、Trevor Criswell(水电)、Daniel Crow(气候、空气污染负责人)、Hind Couzin(基础设施、政策)、Davide D'Ambrosio(数据科学负责人)、Amrita Dasgupta(氢能、关键矿物)、Darlain Edeme(政策)、Víctor García Tapia(建筑)、Timothy Goodson(建筑负责人)、Emma Gordon(投资、金融负责人)、Bruno Idini(交通)、Jinsun Lim(气候、恢复力)、Hyeji Kim(负担能力)、Tae‐Yoon Kim(燃料供应、关键矿物负责人)、Martin Kueppers(行业、GiS 分析)、Luca Lo‐Re (国家自主贡献、碳信用)、基兰·麦克纳马拉(电力)、何塞·贝穆德斯·梅内德斯(氢气)、丽贝卡·舒尔茨(甲烷、石油和天然气)和詹卢卡·托诺洛(能源获取负责人)。玛丽娜·多斯桑托斯提供了重要支持。
Christopher Melani, MD 1 , Rahul Lakhotia, MBBS 1 , Stefania Pittaluga, MD, Ph.D. 2 , James D. Phelan, Ph.D. 1 , Da Wei Huang, MD 1 , George Wright, Ph.D. 3 , Jillian Simard, MD 1 , Jagan Muppidi, MD, Ph.D. 1 , Craig J. Thomas, Ph.D. 4 , Michele Ceribelli, Ph.D. 4 , Frances A. Tosto, MS 4 , Yandan Yang, Ph.D. 1 , Weihong Xu, MS 1 , Theresa Davies-Hill, BS 2 , Svetlana D. Pack, Ph.D. 2 , Cody J. Peer, Ph.D. 5 , Oluwatobi Arisa, Ph.D. 5 , Esther Mena, MD 6 , Liza Lindenberg, MD 6 , Ethan Bergvall 医学博士 6、Craig A. Portell 医学博士 7、Rafic J. Farah 医学博士 8、Seung Tae Lee 医学博士、哲学博士 9、Amynah Pradhan、CRNP 1、Candis Morrison、哲学博士、CRNP 1、Atekelt Tadese、PA-C。 1、Anna Marie Juanitez,RN 1、Crystal Lu,药学博士10,Allison Jacob,理学硕士11,Heidi Simmons,博士。11,William D. Figg,药学博士。 5 , Seth M. Steinberg 博士 12 , Elaine S. Jaffe 医学博士 2 , Mark Roschewski 医学博士 1 , Louis M. Staudt 医学博士 1 , Wyndham H. Wilson 医学博士 1