由于产品滴度相对较高且生产成本较低,杆状病毒/昆虫细胞表达系统被认为是生物制药行业的多功能生产平台。它在生产复杂的多聚蛋白质组装体(包括病毒样颗粒 (VLP))方面表现出色,而病毒样颗粒 (VLP) 被认为是对抗新出现病毒威胁的有希望的疫苗候选物,这使得该系统更具吸引力。然而,在 VLP 生产过程中芽生杆状病毒的共同形成对下游加工构成了严峻挑战。为了减少表达上清液中芽生杆状病毒的数量,我们开发了一种基于 CRISPR/Cas9 的可诱导敲除系统,并与两个杆状病毒载体共感染:一个携带 Cas9 核酸酶,另一个整合了 sgRNA 表达序列。使用我们的设置可以单独生成高滴度病毒,因为只有当两种病毒同时感染细胞时才会发生敲除。当芽生必需基因 gp64 和 vp80 被敲除时,我们测量到杆状病毒滴度降低了 90% 以上。然而,结果,我们还测定了较低的整体 eYFP 荧光强度,表明重组蛋白产量减少,这表明需要进一步改进工程和纯化,以最终最大限度地降低利用杆状病毒/昆虫细胞表达系统生产疫苗的成本和时间。
Wataru Akahata,博士 VLP Therapeutics,Inc. 704 Quince Orchard Rd. #110,Gaithersburg,MD 20878 电话:(240) 801-4456 电子邮件:wakahata@vlptherapeutics.com Hisashi Akiyama,博士 病毒学、免疫学和微生物学系 波士顿大学 Chobanian & Avedisian 医学院 650 Albany Street,X343B Boston,MA 02118 电话:(617) 358-1778 传真:(617) 638-4286 电子邮件:hakiyama@bu.edu
摘要:基于元基因组方法的应用,对人类病毒组的研究涉及克服一系列挑战和局限性,不仅是病毒的生物学特征,而且还涉及不同方法试图最小化的方法学陷阱。这些方法分为两个主要类别:散装 - 元素和病毒样粒子(VLP)富集。为了解决与常用的实验程序相关的问题,以评估可靠性,代表性和可重复性的程度,我们设计了一种适用于三种实验方案的比较分析,一种基于批量 - 元激素,两个基于VLP富集。这些方案应用于10名成年参与者的粪便样本,包括每个方案和受试者的两个复制品。我们不仅通过分析分类学分类和分子类型(DNA与RNA,单链与双链)分析了三种方法的性能,不仅是通过分类的组成,丰度和多样性来评估了病毒群的多样性,而且还根据对其他对用户的相同的相同的相同的相同。我们的结果突出了每种方法的优势和劣势,提供了有价值的见解和量身定制的建议,以根据特定的研究目标得出可靠的结论。
抽象背景是为了避免使用多轴伏锁板(VLP)进行远端半径骨折的骨质合成时,避免螺钉渗透到关节中,重要的是要注意,根据板位置,最佳螺丝插入角度。目的本研究的目的是2倍:第一,以评估最远端板块位置的差异,其中螺钉在三维(3D)半径模型中未渗透到关节中;其次,评估板位置与远端半径的横向直径之间的关系。患者和方法对健康手腕进行了30张普通X射线和计算机断层扫描(CT)扫描。横向直径在普通X射线上测量。3D半径模型是从CT数据中重建的。使用多轴VLP的3D图像研究在三个不同的螺钉插入角处最远端板块位置。测量了伏特关节边缘和板边缘之间的线性距离,并比较不同的螺丝插入角度。还评估了板位置与横向直径之间的相关性。另外,最远端螺钉位置和关节表面之间的关系与远端半径裂缝一起确定。结果,相对于中性的最佳位置在远端挥杆中为2.7 mm,在近端摆动中为1.9 mm。线性距离与每组的横向直径显着相关。这些结果可能是术前计划的参考。证据级别III。证实,最远端螺钉位置和关节表面之间的关系适用于实际情况。结论结果表明,多轴VLP的最远端位置取决于螺钉插入角,并且随着横向直径的增加而变得更加近端。
摘要 目前的流感疫苗不能引发针对多种流感病毒株的广泛保护性免疫反应。因此,需要新的策略将体液免疫反应集中在流感抗原的保守区域,以便被广泛中和抗体识别。有人提出,具有识别保守表位的受体的 B 细胞将通过呈现多种形式的可变抗原的镶嵌颗粒的亲和力效应优先刺激。我们改造了基于 SpyCatcher 的平台、AP205 病毒样颗粒 (VLP) 和 mi3 纳米颗粒 (NP),以共价共展示来自不同流感病毒株的 SpyTagged 血凝素 (HA) 三聚体。在这里,我们展示了多达 8 种不同的 HA 三聚体与 VLP 和 NP 的成功同型和异型结合,并证明结合颗粒在数周的储存期内保持稳定。我们通过低温电子断层扫描对 HA-VLP 和 HA-NP 进行了表征,以得出结合 HA 的平均数量及其间隔距离,并比较了野生型小鼠中镶嵌型和同型颗粒的免疫接种情况。两种类型的 HA 颗粒均引发强烈的抗体反应,但镶嵌型颗粒并未持续引发更广泛的免疫反应。我们得出结论,共价连接当前流行的流感毒株的 HA 是目前年度流感疫苗策略的可行替代方案,但在没有进一步改进的情况下,不太可能成为制造通用流感疫苗的方法。关键词:流感病毒、血凝素纳米颗粒、血凝素 VLP、SpyCatcher、纳米颗粒疫苗、免疫接种、低温电子断层扫描
最近预估计的视觉语言(VLP)模型已成为许多下游任务的骨干,但它们被用作冷冻模型而无需学习。提示学习是一种通过在文本编码器的输入中添加可学习的上下文向量来改善预训练的VLP模型的方法。在下游任务的几次学习方案中,MLE训练可以导致上下文向量在训练数据中拟合占主导地位的图像特征。这种过度适应的可能会损害概括能力,尤其是在训练和测试数据集之间的分布变化的情况下。本文介绍了基于贝叶斯的迅速学习的框架,这可以减轻几乎没有射击的学习应用程序中的过度问题,并提高提示在看不见的情况下的适应性。具体来说,建模与数据相关的先验增强了文本特征的适应性,可用于可见的和看不见的图像特征,并在其之间取决于它们之间的折衷。基于贝叶斯框架,我们在估计目标后分布中利用了Wasserstein等级流,这使我们的提示可以灵活地捕获图像特征的复杂模式。我们通过与现有方法相比显示出统计学上显着的性能改善,证明了在基准数据集上的方法的有效性。该代码可在https://github.com/youngjae-cho/app上找到。
5. Wang C、Ávila BEF de、Mundaca-Uribe R、Lopez-Ramirez MA、Ramírez-Herrera DE、255 Shukla S、Steinmetz NF、Wang J:VLP 的主动递送可促进小鼠卵巢肿瘤模型中的抗肿瘤 256 活性。Small 2020, 16:1907150。257
7HPHO HOHNWURQLN GHYUHOHULQ \DSÕVÕ oDOÕúPDODUÕQGD HWNLOL RODQ IL]LNVHO LONHOHUL oDOÕúPD PHNDQL]PDODUÕ NDUDNWHULVWLNOHUL GDYUDQÕúODUÕ PRGHOOHUL YH ELOJLVD\DU VLP ODV\RQXQGD NXOODQÕODQ PRGHO SDUDPHWUHOHUL VÕQÕU GH÷HUOHUL KDNNÕQGD JHUHNOL WHPHO ELOJLOHUL ND]DQGÕUPDN WUDQVLVWRUOX WHPHO NXYYHWOHQGLULFL \DSÕODUÕQÕ |÷UHQPHN 双极晶体管,FET ¶ li 和 MOSFET ¶ li 开发者分析 |÷UHQPHN
“在实验室的某些条件下,结构表面蛋白能够将自身转化为 VLP。它们可以在实验室中利用细菌作为微型工厂来刺激这种转化。第二步是接种抗原,即 COVID-19 中的刺突蛋白。这简化了整个过程,使其更加灵活,并降低了开发疫苗的成本,”他说。
平台候选疫苗(编号and %) PS Protein subunit 47 33% VVnr Viral Vector (non-replicating) 20 14% DNA DNA 16 11% IV Inactivated Virus 21 15% RNA RNA 24 17% VVr Viral Vector (replicating) 4 3% VLP Virus Like Particle 6 4% VVr + APC VVr + Antigen Presenting Cell 2 1% LAV Live Attenuated Virus 2 1% VVNR + APC VVNR +抗原呈现细胞1 1%