塑料污染的威胁已成为环境的全球关注点,从而探索了可持续措施,从而减少了其不利影响。生物修复就是一种使用微生物降解土壤和水污染物的方法,它具有成本效益,环保且可再生。假单胞菌是一种普遍存在的细菌属,可用于几种塑料的生物降解。目前的研究集中于利用铜绿假单胞菌用于聚乙烯的生物降解。假单胞菌菌株。基于形态学,生理,生化和色素沉着转移分离的菌株被确定为铜绿假单胞菌。这种菌株能够在孵育的16天内降解聚乙烯材料,最高百分比降低了11.5%。
图2。用于这些研究的大肠杆菌生物孢子菌株的一般示意图和初始表征。A.LASR活性的大肠杆菌生物孢子蛋白生物孢子蛋白具有质粒PSC11-L,具有LASR诱导的P LASI启动子,融合到LACZ Reporter和质粒PJN105-L和阿拉伯糖诱导的LASR中。该菌株响应3OC12 -HSL和0.4%阿拉伯糖产生β-半乳糖苷酶。3OC12-HSL诱导是剂量反应,半最大浓度为65 nm。B.大肠杆菌菌株组成型表达LACZ的质粒PVT19与融合到本构APHA-3启动子的LACZ。在存在或不存在3OC12 -HSL的情况下,该菌株会产生β-半乳糖苷酶。结果是两个(a)或三(b)独立实验的平均值,误差线代表标准偏差。
图3。用大肠杆菌LASR和构成记者的甲醛活性。a。灰色线,甲醛依赖性生长抑制,占无甲醛的细胞的百分比。在大肠杆菌中与100 nm 3OC12-HSL的甲醛的剂量反应曲线在大肠杆菌培养物中具有阿拉伯糖诱导的LASR和LASR依赖性Lasi-Lacz Reporter(Black Line)或E. coli,或具有组成型APHA-3-LACZ RACZ REPORTER(RED RED REDERTER)。IC50值在表1中给出。结果显示,五个(LASR)或三个(LACZ控制)独立实验的平均值,误差线代表标准偏差。B.来自A的平均值(降低%降低%与Lasi-Lacz报告基因的抑制%),这些值用于确定Pearson的相关系数(R值)和显着性(P),并使用简单的线性回归模型生成拟合线。
摘要:过去已经研究了细菌的生长和行为,但是尽管对无数过程的影响,包括生物膜形成,但对船员健康的影响很少,但几乎没有将重点引向细胞大小。分析了在国际空间站(ISS)上培养在不同材料和媒体上培养的铜绿假单胞菌的特征上清液等分试样,作为太空生物膜项目的一部分。在该实验中,铜绿假单胞菌是在微重力的(与地球对照匹配的)中生长的,在改良的人工尿液培养基(Maumg-high Pi)或补充了KNO 3的LB Lennox中,并评估了其在六种不同材料上的生物膜形成。在孵育一二,两天和三天后,ISS船员通过固定在多聚甲醛中终止了实验的子集,并在此处介绍了上清液的等分试样进行浮游细胞尺寸研究。通过在油浸入下的相对造影显微镜,moticam 10+数码相机和斐济图像分析程序下使用相对造影显微镜,获得了飞行后的测量。统计比较,以确定使用Kruskal – Wallis和Dunn检验的哪些治疗方法在细胞尺寸上产生了显着差异。在LBK和Maumg-High Pi中,培养物中存在的材料存在统计学上的显着差异。与此一起,数据还按重力条件,培养基和孵育天数分组。总而言之,在微重力上生长的培养物上观察到较小的细胞,并且细胞大小随孵育时间的函数和培养物的生长而变化。在微重力中培养的浮游细胞的比较显示细胞长度降低(根据材料,从4%到10%)和直径(根据材料,根据材料的1%到10%)就其匹配的地球对照组而言,需要注意的是,在给定时间,培养物可能在其生长曲线上可能在不同的生长曲线上处于不同的位置。我们在此处描述了这些变化,以及在机组人员健康和潜在应用方面对人类太空旅行的可能影响。
1卫生和人畜共患系,曼苏拉大学兽医学院,曼苏拉大学35516,埃及; adelelgohary@yahoo.com(A.E.-G。); monamohy@yahoo.com(M.M.E.)2个人畜共患系,本ha大学兽医学院,埃及13518; dr_samarmohame@yahoo.com 3曼苏拉大学兽医学院食品卫生与控制系35516,埃及; radwa.reda@yahoo.com(R.S.); nahedkasem92@gmail.com(N.K.)4贾赞大学药学院临床药学系,贾赞82722,沙特阿拉伯; nrahman@jazanu.edu.sa(N.A。); sriyazahmad@jazanu.edu.sa(S.A.)5临床药学系,国王哈利德大学药学院,阿巴62529,沙特阿拉伯; ss.alqahtani@kku.edu.sa 6 6贾桑大学药学系,贾赞82722,沙特阿拉伯; msali@jazanu.edu.sa 7内科和传染病系,曼苏拉大学兽医学院,曼苏拉大学35516,埃及; Alzhraa.6712@gmail.com 8诊断射线照相技术,应用医学科学学院,贾赞大学,贾赞82722,沙特阿拉伯; hbahkiry@jazanu.edu.sa(H.S.E.-B。); rradwan@jazanu.edu.sa(r.m.r。)*信函:basma_moharam@mans.edu.eg(B.B.); mzakaria@jazanu.edu.sa(m.z.s.-a.)
(未经同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此预印本的版权所有者此版本于 2023 年 6 月 10 日发布。;https://doi.org/10.1101/2023.06.09.544431 doi:bioRxiv preprint
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摘要B -LACTAM抗生素已成功使用了数十年来与易感假单胞菌的铜绿假单胞菌作斗争,该抗生素具有众所周知的渗透外膜(OM)的臭名昭著。然而,对于完整细菌中B- lactams和B-乳糖酰酶抑制剂的青霉素结合蛋白(PBP)的目标位点渗透和共价结合缺乏数据。我们旨在确定完整和裂解细胞中PBP结合的时间过程,并估计目标位点penetra和PBP访问铜绿假单胞菌PAO1中的15种化合物。所有B-乳酰胺(在2 MIC处)在裂解细菌中有相当大的pbps 1至4。然而,完整细菌中的PBP结合大大减弱,但对于快速穿透B-乳酰胺而言,PBP结合的速度很慢。imipenem产生1.5 6 0.11 log 10在1H时杀死,而其他所有药物的杀戮为0.5 log 10。相对于imipenem,净插入率和PBP访问的速率为;多甲苯和美洲膜烯的慢2倍,阿维巴氏菌的7.6倍,头孢嗪速14倍,头孢菌素为45倍,硫酸盐为50倍,Ertapenem为72倍,; 249-用于哌拉西林和aztreonam的折叠,tazobactam的358倍; 547倍碳苯甲林和提卡林蛋白,头孢辛蛋白的1,019倍。在2 MIC时,PBP5/6结合的程度高度相关(r 2 = 0.96)与净插入率和PBP访问的速率,这表明PBP5/6的净率是诱饵靶标的,应通过缓慢穿透,未来的B -LACTACTAMS来避免。对完整和裂解的铜绿假单胞菌中PBP结合的时间过程的第一次全面评估解释了为什么只有imipenem迅速杀死。完整细菌中发达的新型共价结合分析构成了所有表达的恢复机制。
摘要:慢性铜绿假单胞菌感染的特征是生物膜形成,这是铜绿假单胞菌的主要毒力因子,也是广泛耐药性的原因。氟喹诺酮类药物是有效的抗生素,但与严重的副作用有关。两种细胞外铜绿假单胞菌特异性凝集素 LecA 和 LecB 是关键的结构生物膜成分,可用于靶向药物输送。在这项研究中,几种氟喹诺酮类药物通过可裂解的肽接头与凝集素探针结合,产生凝集素靶向前药。从机制上讲,这些结合物因此在全身分布中保持无毒,并且只有在感染部位积聚后才会被激活以杀死细菌。合成的前药在宿主血浆和肝脏代谢存在下被证明是稳定的,但在体外,在铜绿假单胞菌存在下,会以自毁方式迅速释放抗生素货物。此外,该前药在体外表现出良好的吸收、分布、代谢和消除(ADME)特性和降低的毒性,从而建立了第一个针对铜绿假单胞菌的凝集素靶向抗生素前药。■ 介绍
铜绿假单胞菌引起的慢性肺部感染是囊性纤维化 (CF) 患者发病和死亡的主要原因。针对铜绿假单胞菌群体感应 (QS) 系统的抗毒力药物作为抗生素替代品或佐剂得到了深入研究。之前在非 CF 铜绿假单胞菌参考菌株中进行的研究表明,旧药物氯硝柳胺和氯福克醇可以成功地重新用作分别针对 las 和 pqs QS 系统的抗毒力药物。然而,CF 肺中频繁出现的 QS 缺陷突变体破坏了 QS 抑制剂在 CF 治疗中的应用。在这里,我们在 100 个铜绿假单胞菌 CF 分离株中研究了 QS 信号的产生和对氯硝柳胺和氯福克醇的敏感性,旨在拓宽目前对抗 QS 化合物在 CF 治疗中的潜力的认识。结果表明,我们收集的 CF 分离株中分别有 85%、78% 和 69% 能够熟练使用 pqs、rhl 和 las QS 系统。氯硝柳胺和氯福克醇在体外抑制 QS 和毒力的能力差异很大且因菌株而异。氯硝柳胺的活性范围总体较低,其对 las 信号产生的负面影响与毒力因子产生的减少无关。另一方面,氯福克醇在 CF 分离株中表现出更广泛的 QS 抑制作用,从而降低 pqs 控制的毒力因子绿脓菌素。总体而言,这项研究强调了在进行进一步的临床前研究之前针对大量铜绿假单胞菌 CF 临床分离株测试新型抗毒力药物的重要性,并证实了先前的证据,即 CF 分离株中存在对 QS 抑制剂具有天然耐药性的菌株。然而,研究还表明,对 pqs 抑制剂的耐药性低于对 las 抑制剂的耐药性,从而支持开发 pqs 抑制剂用于 CF 的抗毒力治疗。