7.A.Instrument Compatibility................................................................................................................12 7.B.Interfering Compounds..................................................................................................................13 7.C.Handling and Disposal...................................................................................................................13 7.D.Tips for Pipetting Small Volumes.....................................................................................................14 7.E.缓冲和解决方案的组成..................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................... 14
。CC-BY-NC 4.0 国际许可,根据 提供(未经同行评审认证)是作者/资助者,他已授予 bioRxiv 永久展示预印本的许可。它是此预印本的版权持有者此版本于 2024 年 6 月 29 日发布。;https://doi.org/10.1101/2024.06.28.601124 doi:bioRxiv 预印本
计算样品浓度,按GO,使用向下箭头选择添加到测定管(通常为1 µL)的样品体积,然后按GO。样品的浓度将显示在屏幕上。手动记录样品浓度。
摘要 本应用说明展示了将 sgRNA 序列插入 9.5 kb 载体进行靶向 DNA 组装的便利性。与必须合成并重新退火两个寡核苷酸的传统克隆方法不同,此新方案提供了一种简单的方法来设计寡核苷酸并将其与所需载体组装。NEBuilder HiFi DNA 组装主混合物比传统方法有了显著的改进,特别是在节省时间、易于使用和成本方面。
摘要 本应用说明展示了将 sgRNA 序列插入 9.5 kb 载体进行靶向 DNA 组装的便利性。与必须合成并重新退火两个寡核苷酸的传统克隆方法不同,此新方案提供了一种简单的方法来设计寡核苷酸并将其与所需载体组装。NEBuilder HiFi DNA 组装主混合物比传统方法有了显著的改进,特别是在节省时间、易于使用和成本方面。
摘要 本应用说明展示了将 sgRNA 序列插入 9.5 kb 载体进行靶向 DNA 组装的便利性。与必须合成并重新退火两个寡核苷酸的传统克隆方法不同,此新方案提供了一种简单的方法来设计寡核苷酸并将其与所需载体组装。NEBuilder HiFi DNA 组装主混合物比传统方法有了显著的改进,特别是在节省时间、易于使用和成本方面。
参考文献1。Hahn BH。 抗DNA的抗体。 n Engl J Med。 1998; 338:1359-1368。 2。 tan em,Cohen AS,Fries JF,Masi AT,McShane DJ,Rothfield NF等。 1982年修订的全身性红斑狼疮分类的标准。 节炎。 1982; 25:1271-1277。 3。 Egner W.在SLE的诊断中使用实验室测试。 J Clin Pathol。 2000; 53:424-432。 4。 Smeenk R,van der LG,Aarden L.抗体对DSDNA的亲和力:在Crithidia luciliae,Farr Assay和Peg Assay上进行IFT的比较。 J immunol。 1982; 128:73-78。 5。 Smeenk RJ,Van Den Brink HG,Brinkman K,Termaat RM,Berden JH,Swaak AJ。 抗DSDNA:与临床价值相关的测定方法。 风湿性int。 1991; 11:101-107。 6。 Swaak T,SmeenkR。抗DSDNA作为诊断工具的检测:对441个非系统性红斑狼疮抗DSDNA抗体(抗DSDNA)的前瞻性研究。 Ann Rheum Dis。 1985; 44:245-251。 7。 Peng SL,Craft Je。 抗核抗体。 in:凯利(Kelley)和弗雷斯坦(Firestein)的风湿病教科书(第十版); Firestein GS,Budd RC,Gabriel SE,McInnes IB,O'Dell Jr,编辑。 Elsevier:2017; 817-830。 8。 Sebastiani GD,Morozzi G,Bellisai F,Bistoni O,MoscaM。检测抗DSDNA抗体的不同方法的比较:多中心分析。 临床和实验性风湿病学。 2015; 33(2):217-224。Hahn BH。抗DNA的抗体。n Engl J Med。1998; 338:1359-1368。 2。 tan em,Cohen AS,Fries JF,Masi AT,McShane DJ,Rothfield NF等。 1982年修订的全身性红斑狼疮分类的标准。 节炎。 1982; 25:1271-1277。 3。 Egner W.在SLE的诊断中使用实验室测试。 J Clin Pathol。 2000; 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Farr和Elisa Techniques进行的抗DSDNA抗体测试是不相等的。 j风湿病。 2006年9月; 33(9):1785-1788。2002; 61(5):474-476。10。Neogi T,Gladman DD,Ibanez D,Urowitz M. Farr和Elisa Techniques进行的抗DSDNA抗体测试是不相等的。j风湿病。2006年9月; 33(9):1785-1788。
双链DNA(DsDNA)分子在氧化石墨烯(GO)表面上的吸附动力学非常重要,对于在生物传感器,生物医学和材料科学中的DNA/GO功能结构的应用至关重要。在这项工作中,分子动力学模拟用于检查GO表面上不同长度DsDNA分子(从4 bp到24 bp)的吸附。dsDNA分子可以通过末端底部吸附在GO表面并站立在GO表面上。对于短dsDNA(4 bp)分子,双螺旋结构被部分或完全损坏,吸附动力学受到短dsDNA的结构漏气的影响,并且在GO表面上氧化基团的分布。对于长dsDNA分子(从8 bp到24 bp)的吸附是稳定的。通过非线性插入DsDNA分子和GO表面之间的接触角,我们发现,如果DSDNA分子的长度长于54 bp,则吸附在GO表面上的DSDNA分子可以平行于GO表面。我们将这种行为归因于dsDNA分子的灵活性。随着长度的增加,dsDNA分子的灵活性也会增加,并且这种增加的功能使吸附的dsDNA分子更有机会使用自由末端来达到GO表面。这项工作提供了DSDNA分子在GO表面上吸附的全部图片,对于DNA/GO基生物传感器的设计应该有益。
•抗DSDNA与可萃取的核抗原抗体(ENA)测试一起运行,但结果将在抗双滞留DNA测试下而不是在ENA测试面板中进行图表。•抗DSDNA单位将从平均荧光单元(MFU)变为KIU/L。•抗DSDNA测试的新下限为<1,新的上限> 30,000。•请参阅附录以获取新的参考间隔(RIS)。•由于抗DSDNA结果的差异和Luminex和Bioplex抗DSDNA方法之间的差异,已知加班的已知患者将需要重新降低贝线。所需的行动
Tristar 3和Tristar 5多模片读取器的高范围和低范围标准曲线如图2。所有曲线表现出极好的线性。对于Tristar 3的96孔微孔板中计算的检测极限为0.069 pg/µl dsDNA(13.8 pg/井),对于Tristar 5的Tristar 3和0.083 pg/µl dsDNA(16.6 pg/well)在384孔板中进行测量时,Tristar 3和0.110 pg/µl dsDNA(7.6 pg/well)计算出的检测限为0.272 pg/µl dsDNA(19.0 pg/well),对于Tristar 5。使用所使用的设置,可以在33秒内测量完整的96孔板。