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扭曲工程T4 DNA连接酶
拥挤的药物可在提高速度和效率的可选努力中使用了粘性拥挤剂，例如聚乙烯甘油（PEG），以增加底物的局部浓度并推动反应前进。但是，这种拥挤的代理可能会增加变异性或对于自动分配系统而言很难使用。此外，在克隆反应中使用拥挤剂需要在转换之前进行纯化步骤，这增加了动手的时间和处理。我们研究了在0％，2.5％和5％PEG 8000的情况下，各个连接酶对CFDNA底物的疗效。我们引用了电文件图的痕迹以识别3个连续的峰：底物，底物 + 1个适配器和底物 + 2个双侧适配器。如图5所示，扭曲工程的T4 DNA连接酶可以将大部分底物转换为所需的双连接峰独立于拥挤剂输入。
用于生产2-苯基乙醇的代谢和酶促工程方法
2-苯基乙醇以其玫瑰般的气味和抗菌活性而闻名，通过苯基丙酮酸脱羧酶（PDC）和醛还原酶的顺序反应通过外源苯基丙酮酸合成。我们首先靶向ARO10，这是酿酒酵母的苯基丙酮酸脱羧酶基因，并鉴定出合适的醛还原酶基因。大肠杆菌转化体中ARO10和YAHK的共表达在批处理培养中产生1.1 g/L的2-苯基乙醇。我们假设PDC活动可能有瓶颈。利用基于计算机的酶进化来增强产量。与野生型ARO10相比，在ARO10（ARO10 I544W）中引入氨基酸取代（ARO10 I544W）稳定了苯基丙酮酸底物的芳族环，增加了2-苯基乙醇的产量4.1倍。培养ARO10 I544W表达大肠杆菌的培养2.5 g/l的2-苯基乙醇，在72小时后，葡萄糖的产量为0.16 g/g。这种方法代表着显着的进步，迄今为止使用微生物从葡萄糖中获得了2-苯基乙醇的最高收率。培养ARO10 I544W表达大肠杆菌的培养2.5 g/l的2-苯基乙醇，在72小时后，葡萄糖的产量为0.16 g/g。这种方法代表着显着的进步，迄今为止使用微生物从葡萄糖中获得了2-苯基乙醇的最高收率。
工程化的胶结复合材料-PDF
通讯作者：Salim Barbhuiya（电子邮件：s.barbhuiya@uel.ac.uk）摘要：工程化的胶结复合材料（ECC）由于其出色的机械性能和耐用性，在建筑行业中引起了极大的关注。此彻底的评论对ECC研究的进度和前景进行了细致的分析。它是通过引入背景和基本原理来调查ECC的，同时概述了审查的目标。评论提供了对ECC的概述，包括其定义，特征，历史发展，组成和组成材料。重点是检查ECC的机械性能，特别是其弯曲行为，拉伸行为，抗压强度和对环境因素的抵抗力。此外，还讨论了ECC的流变特性，包括可加工性，流动性，自我修复，缓解裂纹，粘度和触变性。评论深入研究了纤维增强对ECC的影响，包括所用的纤维类型，它们对机械和结构特性的影响以及纤维分散和方向。此外，它探讨了ECC在各个领域的各种应用，例如结构应用和可持续建筑实践。与ECC相关的挑战和局限性，例如成本和可用性，以及对未来趋势和研究方向的探索。关键字：工程化的胶结复合材料（ECC），耐用性，可行性，裂纹缓解，纤维增强1.2023; Shumuye等。引言工程胶结复合材料（ECC）由于其在建筑行业中的独特机械性能和潜在的应用而引起了相当大的研究兴趣。ECC是一种纤维增强的胶结材料，具有特殊的拉伸应变能力，裂纹控制和耐用性。ECC的发展可以追溯到1990年代Victor C. Li及其研究小组的开创性工作（Li，1998）。进行了广泛的研究，以探索ECC的各个方面，旨在提高其机械性能，优化其矩阵设计并扩大其应用程序范围。研究研究了ECC的直接拉伸性质，重点是影响其行为和应变响应的因素（Yu等，2018； Li等，2001）。已经探索了不连续的微纤维作为延性ECC的内在加固，以增强其韧性和结构性能（Zhang等，2020）。聚乙烯醇（PVA）纤维由于其有利的分散特征和应变硬化行为而成为增强的流行选择（Lee等，2009）。研究人员还研究了ECC的矩阵设计，特别着重于实现防水性能并在恶劣的环境中增强其性能（Yu等，2017; Zhang et al。2023）。此外，已经针对促进环保建筑实践的ECC及其在基础设施中的可持续性及其应用程序（Li，2019; Zhu等人。2021; Mishra等。2023）。使用
重新审查合成ORF序列对工程线路1逆转录的影响
A.从左到右：每个构造的示意图，一个来自逆转录术539分析的代表性井以及相对于SML1的逆转录效率。L1SPA_DBL_SMBB包含L1SPA_DOBLE的ORF1和540 ORF2序列，在ORF1P启动密码子（如SML1），541），541和SML1结构的删除3'UTR上具有Kozak共识。Restore_3'utr等于l1spa_dbl_smbb，但完整的L1SPA 3'UTR恢复了Neo Cassette的上游542。grr_after_neo等效于543 L1SPA_DBL_SMBB，但与Neo 544盒的下游放置的L1SPA 3'UTR的G-RICH区域，并删除了人类L1 Polyadyenylation信号。直方图显示了三个545生物复制测定的平均值，每个测定法包括每个构造的三个技术重复。三角形，正方形，546和钻石形状表示每个生物学重复的个体值，误差线547代表生物学重复之间的标准偏差。548
生物化学年度评论 利用 CRISPR 相关 Tn7 样转座子进行天然和人工引导 RNA 定向转座
CRISPR-Cas（成簇的规律间隔的短回文重复序列 - CRISPR 相关核酸酶）防御系统已多次自然地用于指导 RNA 定向转座。在所有情况下，转座子 Tn7 相关的各种元件都参与了转座。Tn7 严格控制转座；只有当专用靶位选择蛋白识别特殊靶标时，转座酶才会被激活。Tn7 和与 CRISPR-Cas 系统合作的 Tn7 样元件进化出了互补的靶向途径：一条途径识别染色体中高度保守的位点，另一条途径靶向能够进行细胞间转移的移动质粒。Tn7 和 Tn7 样元件将单一整合传递到它们识别的位点，并控制整合事件的方向，为未来用作可编程基因整合工具提供了潜力。早期研究表明，引导 RNA 介导的转座系统可以适应不同的宿主，甚至在微生物群落内，这表明将这些系统设计为强大的基因编辑工具具有巨大的潜力。
工程化蛋氨酸腺苷转移酶级联用于活细胞中单个 DNA 甲基化的代谢标记
摘要：甲基化是一种广泛存在的天然修饰，具有多种调节和结构功能，由大量 S -腺苷-L -蛋氨酸 (AdoMet) 依赖性甲基转移酶 (MTases) 进行。AdoMet 辅因子由多聚体蛋氨酸腺苷转移酶 (MAT) 家族从 L -蛋氨酸 (Met) 和 ATP 产生。为了推进机制和功能研究，已经开发出重新利用 MAT 和 MTase 反应以接受来自相应前体的可转移基团的扩展版本的策略。在这里，我们使用结构引导的小鼠 MAT2A 工程，以便从合成的蛋氨酸类似物 S -(6-叠氮己-2-炔基)-L -同型半胱氨酸 (N 3 -Met) 生物催化生产扩展的 AdoMet 类似物 Ado-6-叠氮化物。三种工程化的 MAT2A 变体表现出对延伸类似物的催化能力，并且在没有和存在竞争性 Met 的情况下，都支持与 M. Taq I 和小鼠 DNMT1 的工程化变体在级联反应中进行 DNA 衍生化。然后，我们使用 CRISPR-Cas 基因组编辑将两种工程化变体作为 MAT2A-DNMT1 级联安装在小鼠胚胎干细胞中。所得细胞系在暴露于 N 3 -Met 且存在生理水平的 Met 时，保持正常的活力和 DNA 甲基化水平，并显示出 Dnmt1 依赖的 DNA 修饰和延伸叠氮化物标签。这首次展示了一种用于生物合成生产延伸 AdoMet 类似物的遗传稳定系统，该系统能够在活哺乳动物细胞中对 DNMT 特异性甲基化组进行轻度代谢标记。■ 简介
动态全球植被模型二氧化碳去除的工程解决方案
这项工作是根据劳伦斯·利弗莫尔国家实验室（Lawrence Livermore National Laboratory）根据合同DE-AC52-07NA27344进行的。
结合工程化的 FnCas9 和扩展的 gRNA，实现 PAM 灵活、稳健且核碱基特异性的编辑和诊断
CRISPR 疗法的临床成功取决于 Cas 蛋白的安全性和有效性。来自新凶手弗朗西斯菌 (FnCas9) 的 Cas9 对错配底物的亲和力可以忽略不计，这使得它即使在结合水平上也能以非常高的精度区分 DNA 中的脱靶。然而，它的细胞靶向效率很低，限制了它在治疗应用中的使用。在这里，我们合理地设计了蛋白质以开发增强的 FnCas9 (enFnCas9) 变体，并将其细胞编辑活性扩展到以前无法访问的基因组位点。值得注意的是，一些变体释放了从 NGG 到 NGR/NRG 的原间隔区相邻基序 (PAM) 约束，使其在人类基因组位点上的可访问性增加了约 3.5 倍。enFnCas9 蛋白在体外和细胞中都具有单一错配特异性，从而扩大了基于 FnCas9 的 CRISPR 诊断的靶标范围，用于检测点突变和致病 DNA 特征。重要的是，它们在编辑效率、敲入率和脱靶特异性方面比其他经过设计的 SpCas9 高保真版本（SpCas9-HF1 和 eSpCas9）更胜一筹。值得注意的是，enFnCas9 变体可以与延长长度的 gRNA 结合使用，在 PAM 约束的规范碱基编辑器无法访问的位点进行强大的碱基编辑。最后，我们展示了使用 enFnCas9 腺嘌呤碱基编辑器完全纠正患者衍生的 iPSC 中的疾病特异性视网膜色素变性突变，突出了其在治疗和诊断中的广泛应用。
涉及基因工程玉米（MX-USA ...
17。此外，在USMCA中阐述的临时措施仅在没有足够的科学证据进行风险评估的情况下才允许。这里并非如此。对GE植物和动物衍生食品商品的风险评估通常由国家监管机构（包括墨西哥）经常监督。墨西哥自己的监管机构 - 反对卫生风险保护的联邦委员会（“ Cofepris”）授权大约100种玉米玉米品种用于食品和饲料中，并在其中评估了过敏性，毒性和营养问题的潜力。这些是墨西哥现在在多年后声称，由于科学证据不足，它必须制定临时措施。墨西哥立刻认为，新发表的研究使过去的评估过时了，但也声称可用的证据不足。6墨西哥尚未阐明为什么可用的科学证据不足以审查已经评估的这些产品，而现实是这种证据不存在。7
使用混合深钢筋学习
摘要 - 在越野环境中旋转的未拧紧地面车辆（UGV）的准确路径跟踪面临着源于操作条件的多样性引起的挑战。用于Ackermann转导车辆的传统基于模型的控制器具有良好的（无防滑）路径跟踪的穿孔，但性能会以越来越不平坦的地形和更快的遍历速度下降。本文介绍了一种新颖的方法，一种混合深化增强学习（HDRL）控制器，利用了线性二次调节器（LQR）的优势和深钢筋学习（DRL）控制器，以增强Ackermann steceered ugvs的增强路径跟踪。DRL控制器主要弥补地形条件和未知车辆参数的不确定性，但训练在计算上可能很昂贵。LQR控制器在初始训练阶段指导DRL控制器，从而确保更稳定的性能并在早期迭代中获得更高的回报。这样做，这种混合方法提供了有望克服基于模型的控制器的局限性以及常规DRL方法的样本信息的局限性。在手稿中显示的初步结果显示了HDRL控制器的希望，表现出比无模型的DRL和常规反馈控制器更好的性能。