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电池供电的便携式旋转实时荧光 qPCR，能耗低、成本低、通量高
摘要：针对传统qPCR仪器体积大、价格昂贵、携带不便等问题，本文报道了一种便携式旋转式实时荧光PCR（聚合酶链式反应），可在现场完成DNA的PCR扩增，并可实时观察反应过程。通过对目的基因pGEM-3Zf(+)的分析，将梯度扩增曲线和熔解曲线与商用设备进行对比，结果证实了本装置的稳定性。这是首次利用机械旋转结构实现与商用仪器相媲美的梯度扩增曲线和熔解曲线。本系统平均功耗约为7.6 W，是分流PCR实时荧光定量中能耗最低的，且自带锂电池供电，可现场使用。此外，由于通过机械位移控制系统取代了传统的TEC（热电致冷器）控温，整套设备成本仅约710美元，远低于商用PCR仪成本，且设备技术门槛低，可适应非专业场合，重复性强。
自适应进化：细菌和癌细胞如何生存...
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TET调节的表达和光学清除，用于遗传编码的嵌合DCAS9/荧光蛋白探针的体内可视化
摘要：Cas9（DCAS9）核酸内切酶的催化无效突变体具有多种生物医学应用，最有用的是转录的激活/抑制。dcas9家族成员也正在成为潜在的实验工具，用于在独立活细胞和完整组织的水平上进行基因映射。我们对CAS9介导的核室可视化的一组工具进行了初步测试。我们研究了doxycycline（DOX） - 可诱导（TET-ON）的细胞内分布，这些构建体的构造中编码DCAS9直系同源物（ST）（ST）和脑膜炎N.脑膜炎（NM）与EGFP和MCHERRY FOLORESCENT蛋白（FP）融合的人类A549细胞。我们还研究了这些嵌合荧光构建体的时间依赖性表达（DCAS9-FP）在活细胞中诱导中的诱导中，并将其与实验性DCAS9-FP表达的时间过程进行了比较灌注。在诱导后24小时内，肿瘤异种移植物发生了麦克利 - 奇氏菌表达的体内诱导，并通过使用皮肤的光学清除（OC）来可视化。OC通过局部应用Gadobutrol启用了肿瘤异种移植物中FP表达的高对比度成像，因为红色和绿色通道的FI增加了1.1-1.2倍。
项目研究科学家职位的公告-I ...
• Experience in mammalian cell culturing, maintenance and handling, UV/Vis and fluorescent spectroscopy, histology, immunohistochemistry, fluorescent microscopy, molecular biology techniques including agarose gel electrophoresis, western blotting, flow cytometry, RT-PCR, and related techniques - A proven record of scientific publications (as first author) applying the above said methods in在信誉良好的期刊中的博士/博士研究是必须的。
揭示环境因素与珊瑚免疫之间的联系：对Acropora cervicornis中荧光蛋白表达和苯酚氧化酶活性的研究
由于气候变化而导致的环境状况恶化，严重影响了全球珊瑚礁的健康。因此，了解珊瑚如何对温度和/或极端太阳照射的极端水平和/或太阳照射的响应将指导该宝贵生态系统的未来保护和恢复工作。在此，我们介绍了一项研究，濒临灭绝的珊瑚Acropora cervicornis对水温（WT），光强度（LI）和水深度的季节性波动的免疫反应。免疫反应，这是一种参与光保护蛋白黑色素的生物合成的酶。为了研究这些反应，在12个月的时间内以三个月的间隔测量了视觉健康的A. cervicornis片段，深度为12 m，GFP，CYPF和PO活性。在此期间，还测量了每个深度的海水温度和光强度。使用一般线性混合模型来确定WT，LI和水深对免疫蛋白的季节性变化的影响。GFP，CYFP和PO活动在随着时间的流逝差异很大 - 在夏末/秋季秋末/秋季较低，在冬季晚期/早春较低。同样，WT和LI显着影响GFP，CYFP和PO活动。另一方面，水深仅对荧光蛋白浓度有显着影响，而不是PO活性。我们的研究表明，珊瑚可以在自然季节性爆发中调节这些关键的免疫相关蛋白质。也就是说，在较高的热和光条件下增加的几个月，同时在轻度的热和光条件下减少了几个月。
优化电穿孔参数，使用 3 至 2000 kDA 的荧光葡聚糖将大分子有效递送至猪受精卵中
。CC-BY-NC-ND 4.0 国际许可证（未经同行评审认证）是作者/资助者，他已授予 bioRxiv 永久展示预印本的许可。
通过 CRISPR 生成具有遗传编码荧光电压指示剂的人类诱导多能干细胞系，用于心脏发生后的动作电位评估
通讯作者：Deborah K. Lieu，博士，加利福尼亚大学戴维斯分校，内科系，心血管医学科，再生疗法研究所 1616，2921 Stockton Blvd.，萨克拉门托，CA 95817，电话：916-734-0683，dklieu@ucdavis.edu。作者贡献 Sun：构思和设计，数据收集和汇编，数据分析和解释，手稿撰写 Kao：数据收集 Chang：数据收集 Merleev：软件开发和数据分析 Overton：数据收集 Pretto：数据收集 Yechikov：软件开发，数据分析和解释 Maverakis：软件开发和数据分析 Chiamvimonvat：数据分析和解释，手稿最终审定 Chan：提供仪器，手稿最终审定 Lieu：构思和设计，资金支持，数据分析和解释，手稿撰写，手稿最终审定
第12章：聚合酶链反应（PCR）概述
Amplification of DNA for: • Sequencing • Genotyping • Cloning • Pathogen detection Advantages • Increased dynamic range of detection • No post-PCR processing • Higher sensitivity and specificity • Closed system reduces the risk of contamination • An increase in reporter fluorescent signal is directly proportional to the number of amplicons generated • Shorter turnaround time • No post-PCR processing
CRISPR稳定的敲入细胞生产（CAT。C.C408）案例研究：使用CRISPR将红色荧光蛋白（RFP）基因敲入人类胚胎
图2 PCAS-GUIDE-AAVS1和PAAVS1-RFP-DNR的矢量图。pCAS指向AAVS1是哺乳动物细胞中SGRNA和Cas9共表达的多合一载体。SGRNA的表达是由强大的组成型Pol III启动子U6启动子驱动的。而CMV启动子则驱动CAS9酶的表达。paAVS1-RFP-DNR在CMV启动子下的PGK启动子和RFP基因下表达紫霉素的抗性标记。5'和3'AAVS1同源臂（“ aavs-right”和“ aavs-left”）为单元提供了一个用于同源性修复的模板。
原创研究 自组装荧光纳米粒子在癌症治疗中的自我监测和自我输送
目的：由于纳米载体的缺点，无载体纳米递送系统的开发在癌症治疗中受到越来越多的关注，但目前对无载体纳米系统能同时实现监测功能的研究较少。本文建立了一种负载姜黄素和盐酸伊立替康的多功能无载体纳米系统，用于胃癌的治疗和监测。方法：本研究制备了前期的盐酸伊立替康-姜黄素纳米系统（该体系命名为SICN）。基于姜黄素的荧光，利用流式细胞术、激光共聚焦显微镜和斑马鱼荧光成像技术研究了SICN在体内和体外的监测功能。此外，还利用HGC-27人胃癌细胞研究了SICN的细胞毒性。结果：流式细胞术和斑马鱼荧光成像监测结果显示，SICN的摄取率明显高于游离姜黄素，排泄率较低。 SICN在细胞和斑马鱼中具有更高的蓄积和滞留。激光共聚焦显微镜监测结果显示，SICN通过巨胞饮、caveolin、网格蛋白介导和非网格蛋白依赖的内吞等多种途径内化进入HGC-27细胞，并在细胞内分布于整个胞浆，包括溶酶体和高尔基体。体外细胞实验表明，SICN纳米粒子比单一组分毒性更大，微酸性条件下HGC-27细胞对纳米粒子的吸收更多，毒性更大。结论：SICN是一种很有前途的无载体纳米粒子，两种单组分联合治疗可发挥协同抗肿瘤作用。当暴露于肿瘤酸性环境中，SICN由于电荷转换而表现出更强的细胞毒性。更重要的是，纳米粒子的自我监测功能得到了发展，为肿瘤的联合治疗开辟了新的思路。关键词：无载体，盐酸伊立替康，姜黄素，多功能纳米粒子