2024年7月30日(安大略省多伦多) - 细胞系公司Lineabio今天宣布启动其现成的诱导多能干细胞(IPSC)线路目录。根据良好的制造实践(GMP)制造的现成的IPSC线路将通过将时间加速到GMP增加12个月,并使细胞系开发成本降低60%,从而使细胞疗法开发人员能够促进细胞疗法开发人员。“与Lineabio的细胞系目录区别的是质量和透明度,” Lineabio首席执行官Mark Curtis说。“利用既定平台和IPSC专家团队,我们的IPSC系列都是从头到尾都符合GMP的制造,而没有妥协。通过为使用该机芯的行业访问用于药物制造的现成的IPSC线路,Lileabio的细胞系目录将有助于治疗开发人员削减GMP重新编程的成本和加速时间表,从而增加更多细胞治疗药物的可能性,以帮助患者提供诊所的需求。” Lineabio是由IPSC能力和平台开发的全球领导者CCRM以及以技术为中心的细胞和基因治疗临床和商业合同开发与制造组织(CDMO)创立的lineabio的专有GMP IPSC系列基于在CCRM上磨练的十多年的IPSC平台专业知识,其中包括重新编程200+ IPSC系列,其中许多是根据GMP符合GMP的客户研究新药(IND) - 增强的研究。此外,与Omniabio的隶属关系为开发人员提供了一条无缝的途径,可以通往主体和工作细胞库的制造,过程和分析开发,最终是临床和商业GMP药物。lineabio的IPSC系列使用一个平台,其中包括重新编程,克隆选择和银行业务,并使用具有完整可食性的GMP试剂符合GMP。LILEABIO将于8月推出其首个专有GMP IPSC系列,该产品将由今年提交的美国FDA药物主文件提供支持。
Isabel Lam,1,2,3,28 Alain Ndyisaba,1,2,2,2,3,4,28 Amanda J. Lewis,5 Yuhong Fu,6 Giselle T Jackson Sandoe,8 Ricardo L. Sanz,Ricardo L. Sanz,1,2,2,2,2,2,2 Ichihashi,13 Araati Tripathi,1,3 Nagendran Ramalingam,1,3,3 Charlotte Oettan-Suazo,1,2 Theresa Bartels,8 Manel Boussouf,1,2 Max Schch€Abinger,1 Max Schch€Abinger,1,2 15 Hiroyuki Hakozaki,15 Xiao Yu,1,2 Kelly Hyles,1,2 Chansaem Park,1,2 Xinyuan Wang,1,2,3 Thorold W. Thorold W. Theunisen,8 Haoyi Wang,8 Rudolf Jaenisch,8 Rudolf Jaenisch,8 Susan Lindquist,8,10,10,10,10,10,29。beth Steefa,3岁。 Gregor Wenning,4,29 Wilma D.J. div>van de Berg,16凯尔文·卢克(Kelvin C.约翰内斯·舒·内伯格(JohannesSchoéneberg
摘要 基于诱导性多能干细胞 (iPSC) 的细胞治疗应用看起来前景广阔,但同时也充满挑战。良好生产规范 (GMP) 法规在制造 iPSC 及其分化后代时对质量和一致性提出了必要但苛刻的要求。鉴于可用的 GMP iPSC 系稀缺,我们建立了相应的生产工作流程来生成第一组合规细胞库。因此,这些细胞系满足了一套全面的发布规范,例如,显示出较低的总体突变负荷,反映了它们的新生儿来源脐带血。基于这些 iPSC 系,我们还开发了一套与 GMP 兼容的工作流程,能够以大大提高的效率改进基因靶向并定向分化为关键细胞类型:一种用于生成视网膜色素上皮 (RPE) 的新方案具有高度的简单性和效率。源自 iPSC 的间充质基质细胞 (MSC) 表现出出色的扩增能力。完全优化的心肌细胞分化方案的特点是纯度高于 95% 时批次间一致性特别高。最后,我们介绍了一种通用免疫细胞诱导平台,可将 iPSC 转化为多能前体细胞。这些造血前体细胞可以选择性地被刺激成为巨噬细胞、T 细胞或自然杀伤 (NK) 细胞。NK 细胞分化后培养条件的转变会诱导数千倍的扩增,这为以不依赖饲养细胞的方法扩大这种关键细胞类型开辟了前景。综上所述,这些细胞系和改进的操作平台将在细胞治疗和基础研究中具有广泛的用途。
遗传性周围神经病(IPN)是一组与各种基因突变有关的疾病,在周围神经的发育和功能中具有基本作用。在过去的十年中,从细胞生物学研究和转基因型和啮齿动物模型中获得的轴突和髓磷脂变性的分子疾病机制方面的显着进步促进了有前途的治疗策略的发展。但是,迄今为止尚无临床治疗。这种缺乏治疗表明,迫切需要在生物学和临床上相关的模型概括IPN。对于神经发育和神经退行性疾病,患者特异性诱导的多能干细胞(IPSC)是疾病建模和临床前研究的特别强大的平台。在这篇综述中,我们提供了有关不同体外人类细胞IPN模型的更新,包括传统的二维单一培养IPSC衍生物,以及使用微流体芯片,器官和组装的更复杂的基于人IPSC的系统的最新进展。
• 建议戴上手套并使用无核酸酶试管和试剂以避免 RNase 污染。 • 始终保持无菌技术,并使用无菌过滤移液器吸头。 • 所有 EditCo 试剂应根据制造商的建议储存。 • 合成 sgRNA 应溶解在 TE 缓冲液中,并使用无核酸酶水稀释至工作浓度。请参阅 EditCo.com/resources 以查找与溶解和储存合成 sgRNA 相关的最佳实践。 • RNP 可直接在 Nucleofector™ 溶液中形成。 • RNP 复合物在室温下可稳定保存长达 1 小时(可在 4°C 下保存长达一周,或在 -20°C 下保存长达 1 个月)。请注意,在 4°C 下储存的 RNP 可能会在长时间后受到微生物生长的污染。
图1。核骨质表明802-30F细胞在基因组上是稳定的。*野生型802-30F细胞(通道19)的Karyostat结果表明基因组完整性已维持。全基因组视图以一个高级副本编号显示了所有体细胞和性染色体。平滑的信号图(右y轴)是log2比的平滑,它描述了微阵列上探针的信号强度。一个值为2表示普通拷贝数状态(CN = 2)。3的值代表染色体增益(CN = 3)。1的值表示染色体损失(CN = 1)。粉红色,绿色和黄色表示每个单独的染色体探针的原始信号,而蓝色信号表示用于识别副本数和畸变的归一化探针信号(如果有)。*改编自Thermo Fisher Scientific的描述。
人类诱导的多能干细胞衍生的心肌细胞(HIPSC-CM)已被广泛用于治疗缺血性心脏病。但是,仍然存在限制治疗功效的剩余问题,例如免疫排斥和HIPSC-CMS的保留率低。人类脂肪间充质基质细胞(HADSC)据报道能够调节免疫反应,促进血管生成并促进HIPSC-CMS的成熟。在这项研究中,我们在由可生物降解的聚(D,l-乳酸 - 乙醇酸)(PLGA)聚合物制成的纤维支架上共培养了几天,以开发合成的3D心脏组织板。正如预期的那样,与仅在PLGA纤维上培养的HIPSC-CMS相比,细胞形成231.00±15.14μm厚的组织,具有改善的组织,比对,ECM条件,收缩能力和旁分泌功能。此外,复合的3D心脏组织片显着促进了移植后的植入和存活。组合的3D心脏组织表也提高了心脏功能,减弱心室重塑,纤维化减少以及大鼠心肌梗死模型的血管生成增强,这表明该策略受伤是临床情况下的一种有希望的治疗选择。
我们证实,电刺激显着增强了IPSC-CM的成熟,改善了FFR,传导速度,cAMP浓度和药物反应等因素。此方法有效地检测了具有多种药理作用的化合物对心肌细胞收缩性的影响。但是,我们观察到某些化合物对IPSC-CM的影响少于预期。我们假设低基因表达水平,细胞内钙浓度不足和营地浓度不足可能导致化合物反应减少。进一步的研究对于促进有关形态学的IPSC-CM的成熟是必要的(肌原纤维比对,肌膜结构,t纤维组织等。),电生理学和钙处理。这些改进将使使用此评估系统更全面地评估具有更广泛作用的药物。
研究气道上皮中严重急性呼吸综合征2(SARS-COV-2)的感染机制,并制定针对感染的有效防御策略很重要。为实现这一目标,建立适当的感染模型至关重要。因此,各种体外模型,例如细胞系和培养物,以及涉及表现出SARS-COV-2感染和遗传性人类动物的动物的体内模型,已被用作动物模型。但是,尚未建立动物模型,该模型允许在气道上皮生理环境下对人类细胞进行感染实验。因此,我们旨在建立一种新型的动物模型,该模型可以使用人类细胞进行感染实验。使用了人类诱导的多能干细胞衍生的气道上皮细胞移植的裸鼠(HIPSC-AEC大鼠),并通过喷洒含有SARS-COV-2峰值蛋白质的慢病毒假病毒来进行感染研究。感染后,免疫组织化学分析揭示了上皮和粘膜下层中GFP阳性感染的移植细胞的存在。在这项研究中,建立了包括人类细胞在内的SARS-COV-2感染动物模型通过呼吸模仿感染,我们证明HIPSC-AEC大鼠可以用作基础研究的动物模型,并开发了人类特异性呼吸道治疗方法的治疗方法。
来自SCTI003-A细胞系的代表性图像。(a)Stemcell的HIPSC可以与肠球形区分开,并使用STEMDIFF™肠类动物试剂盒(目录#05140)嵌入Matrigel®Domes中,以使其成熟到人肠癌中。可以使用STEMDIFF™肠杆菌生长培养基(目录#05145)来传递和扩展成熟的类器官(在第13天显示)。(b)使用STEMDIFF™背前桥式分化试剂盒(Catalog#08620)(CatalDiff#08620),可以与SCTI003-A区分开染色的DAPI(蓝色),MAP2(MAP2(MAGENTA),NEUN(黄色)和GFAP(CYAN)的神经器官,并与SCTI003-A区分开,并维持STEMDIFF™Neural Organid Organid Organid Organid Orancecodeandenceant(Catean)。(c)hipsc衍生的小胶质细胞具有可见过程和较小的细胞质与核比率,可以通过造血祖细胞中间人使用STEMDIFF™造血量™造血™造血™造血基因(使用Catalog#05310),从而从Stemcell的HIPSC通过造血祖细胞中间产生(catalog#05310),并使用Stemdiff™microgiriation(Catalog#05310),并使用Stemdiff™MicrogliAD(catalog#05310)(Catalog#05310)。 #100-0019/100-0020)。(d)使用STEMDIFF™心室心肌细胞分化试剂盒(目录#05010),可以从SCTI003-A产生心室心肌细胞的单层培养。