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全球LRP调节蛋白来自Haloferax Mediterranei
Haloferax Mediterranei是一种在高盐环境中蓬勃发展的极端卤素古老的考古，由于其在极端盐度条件下繁荣发展，因此在生物技术和生化研究中引起了人们的关注。转录因子在调节各种细胞过程中必不可少，已成为理解其适应性的焦点。这项研究深入研究了LRP转录因子的作用，探索了其通过β-半乳糖苷酶测定的体内GLNA，NASABC和LRP基因启动子的调节。值得注意的是，我们的发现提出LRP是氮代谢的开创性转录调节剂。这项研究表明其在激活或抑制同化途径酶（GLNA和NASA）中的潜在作用。LRP与这些启动子之间的相互作用使用电泳迁移率转移测定法和差异扫描荧光法分析，这突出了L-谷氨酰胺在稳定LRP -DNA复合物中必不可少的作用。我们的研究发现，在存在L-谷氨酰胺的情况下，卤素LRP形成八接结构。该研究揭示了使用X射线晶体学作为同型二聚体的三维结构，通过小角度X射线散射在溶液中证实了该状态。这些发现阐明了驱动HFX的复杂分子机制。地中海尼的氮代谢，提供有关其基因表达调节的宝贵见解，并丰富我们对极端生物学的理解。
CRISPR-Cas12a 辅助 Amycolatopsis mediterranei 基因组编辑
Amycolatopsis mediterranei U32 是利福霉素 SV 的工业生产者，其衍生物长期以来一直是抗分枝杆菌的一线药物。为了对这种重要的工业菌株进行基因改造，过去几十年来人们付出了很多努力，我们实验室成功开发了一种基于同源重组的方法，但该方法需要使用抗生素抗性基因进行正向选择，并且不支持方便的无标记基因删除。在本研究中，我们利用成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 系统在 A. mediterranei U32 中建立了基因组编辑系统。具体来说，土拉弗朗西斯菌亚种。 novicida Cas12a (FnCas12a) 基因首先整合到 U32 基因组中，在 CRISPR RNA (crRNA) 的指导下产生靶向特异性双链 DNA (dsDNA) 断裂 (DSB)。然后，DSB 可以通过非同源 DNA 末端连接 (NHEJ) 系统或同源定向修复 (HDR) 途径修复，分别在靶基因中产生不准确或准确的突变。除了 A. mediterranei 之外，本研究还可能为 Amycolatopsis 属其他物种中 CRISPR 辅助基因组编辑系统的开发提供启示。