植物雄性不育 (MS) 是指植物无法产生功能性花药、花粉或雄配子。开发 MS 系是植物育种计划中最重要的挑战之一,因为建立 MS 系是 F1 杂交生产的主要目标。出于这些原因,已在几种具有经济价值的物种中开发了 MS 系,特别是在园艺作物和观赏植物中。多年来,MS 已通过许多不同的技术实现,从基于交叉介导的传统育种方法的方法到基于遗传学和基因组学知识的先进设备,再到基于基因组编辑 (GE) 的最先进分子技术。GE 方法,特别是由 CRISPR/Cas 相关工具介导的基因敲除,已经产生了灵活而成功的战略思想,用于改变关键基因的功能,调节包括 MS 在内的许多生物过程。这些精准育种技术耗时较少,可通过积累有利等位基因加速新遗传变异的产生,能够显著改变生物过程,从而提高品种开发绕过有性杂交的潜在效率。本文的主要目的是概述植物雄性不育方面的见解和进展,重点介绍最近通过靶向特定核基因座诱导 MS 的新型育种 GE 应用。本文总结了近期 CRISPR 技术的潜在机制和主要作物和观赏植物的相对成功应用。本文将讨论 CRISPR/Cas 系统在 MS 突变体生产中的未来挑战和新潜在应用以及其他潜在机会,例如通过瞬时转化系统生成 CRISPR 编辑的无 DNA 和跨代基因编辑以引入所需等位基因和精准育种策略。
商业准备的培养基的最终用户应根据适用的政府监管机构进行质量控制测试,并符合认证要求。Hardy Diagnostics建议最终用户检查是否有污染和恶化的迹象,如果由实验室质量控制程序或法规决定,请执行质量控制测试以证明生长或积极的反应并表现出抑制作用或负面反应(如果适用)。Hardy Diagnostics质量控制测试记录在Hardy Diagnostics分析证书网站上的分析证书(COFA)上。还请参阅文档“成品质量控制程序”,以及有关商业准备的微生物培养基的CLSI文档M22-A3质量保证,以获取有关适当QC程序的更多信息。请参阅下面的参考文献。
图 2. 使用 MolYsis Complete5 试剂盒(A、B)和 DNeasy PowerSoil Pro 试剂盒(C、D)提取之前在 LOD 处加标的细菌和真菌样品的 C t 值。AB:巴西 A. ;CA:白色念珠菌;BS:枯草芽孢杆菌;CS:芽孢杆菌;PA:铜绿假单胞菌;SA:金黄色葡萄球菌。物种名称缩写后的数字表示在样品制备之前加标的滴度(以 CFU 为单位)。标有“+D”的样品包含含有 10 6 个 Jurkat 细胞的基质,这些细胞保存在冷冻保存介质中。
摘要:雄性不育在杂交制种中可降低成本、提高种子纯度,但目前雄性不育在番茄杂交制种中的商业化应用尚未得到广泛推广。CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术可加速雄性不育在杂交制种中的实际应用。本研究利用CRISPR-Cas9系统在两个番茄亲本中同时敲除雄性不育10(Ms10)和花青素缺失(AA)两个紧密连锁基因座下的DYSFUNCTIONAL TAPETUM1(SlDYT1)和谷胱甘肽S转移酶(SlGSTAA)。产生的dyt1gstaa双突变体因花青素缺乏而出现绿色下胚轴,并表现出稳定的雄性不育性。使用绿色下胚轴作为形态标记,雄性不育的选择效率高达 92%,此后,我们开发了一种借助形态标记选择的雄性不育高效稳定的繁殖策略。此外,我们还生产了 dyt1gstaa 衍生的杂交种子,发现其产量、重量和发芽率与相应的 WT 衍生 F1 种子相当。dyt1gstaa 系统不仅将杂交种子纯度提高到 100%,而且还有助于快速、经济高效地测定。此外,我们还发现该系统对重要的农艺性状没有明显的副作用。这项研究表明,我们利用 CRISPR/Cas9 创建的 dyt1gstaa 系统可以应用于番茄杂交种子生产。
CVM认为,安乐死产物和耳朵植入物免于对注射兽药的无菌性和热原需求,必须标记为非肉毒杆菌。原因是(1),除非另有告知,否则用户认为所有可注射药物都是无菌的,(2)与使用这些产品相关的耳部感染存在问题,其中一些可能是由于缺乏不育而不是植入技术引起的,(3)某些产品与抗生素有关,是由抗生素涂上的,是由抗生素涂有可能引起的,可能是由抗生素造成的,可能是通过这些药物产生的,并且可能会产生(4),并且可能是由这些药物造成的(4),并且可能是由这些产品产生的(4),并且可能是造成的(4)可能(4)。无菌。中心不愿对这些产品施加不育和热产生要求,因为这些要求可能对已经批准的产品产生的影响。但是,将这些产品标记为非遗物,会通知用户这些产品是通过非企业化过程制造的。
摘要 帽结合蛋白 eIF4E 通过与 eIF4G 相互作用构成 eIF4F 复合物的核心,该复合物在 mRNA 的环化及其随后的帽依赖性翻译中起关键作用。除了在 mRNA 翻译起始中的基本作用外,还描述或提出了 eIF4E 的其他功能,包括充当前病毒因子和参与性发育。我们使用 CRISPR/Cas9 基因组编辑生成了甜瓜 eif4e 敲除突变株系。编辑在甜瓜中有效,因为我们在 T0 代就获得了第一个 eIF4E 外显子中单核苷酸纯合缺失的转化植物。分离 F2 代的编辑和非转基因植物接种了摩洛哥西瓜花叶病毒 (MWMV);纯合突变植物表现出病毒抗性,而杂合和非突变植物被感染,这与我们之前对 eIF4E 沉默植物的结果一致。有趣的是,T0 和 F2 代的所有纯合编辑植物都表现出雄性不育表型,而与野生型植物杂交则恢复了育性,表明雄性不育表型的分离与 eif4e 突变的分离之间存在完美的相关性。对甜瓜雄花沿连续发育阶段的形态学比较分析表明,小孢子母细胞和绒毡层在减数分裂后发育异常,突变体和野生型的绒毡层降解时间明显不同。RNA-Seq 分析确定了花粉发育中的关键基因,这些基因在 eif4e/eif4e 植物的花中下调,并表明 eIF4E 特异性 mRNA 翻译起始是甜瓜雄配子形成的限制因素。
摘要细胞质男性不育(CMS)是一种母体遗传的性状,会导致花粉和花药发育中的功能障碍。cms是由核和线粒体基因组之间的相互作用引起的。通过线粒体基因组编码的引起CMS的基因的产物会影响线粒体功能和核基因的调节,从而导致雄性不育。相反,核基因组中生育基因(RF基因)的修复剂抑制了引起CMS的基因的表达并恢复男性生育力。同种质CMS系通常是由于核取代而繁殖的,这会导致去除功能性RF基因,并允许在线粒体中表达引起CMS的基因。CMS/ RF系统是理解植物中线粒体和核基因组的遗传相互作用和合作功能的绝佳模型,并且也是杂交种子生产的农艺上重要特征。在这篇评论文章中,描述了CMS,CMS相关的线粒体基因,RF基因的花粉和花药表型以及引起花粉流产的机制及其对水稻的农艺应用。
农杆菌。我们再生了 76 株独立的转基因植物,并检查了单个花序的育性(补充图 1)。八株转基因植物产生了突变花。根据表型,突变花可分为两种类型:花瓣状雄蕊型(PST),具有花瓣状雄蕊和异常花药,以及败育雄蕊型(AST),花丝缩短,花药开裂异常(图 1c)。与野生型花相比,通过 TCC 染色和随后的显微镜观察,PST 和 AST 花的花粉数量较少,且活力为零(图 1d)。在 8 株发生突变花的转基因植株中,4 株(Nmu44、Nmu52、Nmu70 和 Nmu80)表现出正常花和 PST 花,2 株(Nmu43 和 Nmu46)表现出正常花和 AST 花,这 6 株均为嵌合突变体,而 2 株(Nmu58 和
摘要。本文提供了基于膜的不育测试过程的详细说明,这是在地平线主持项目中选择的用例TraceBot,以证明在实验室环境中敏捷机器人的好处及其对制药行业的兴趣。基于人类操作员手动执行不育测试过程的视频,我们详细介绍了其不同的步骤,从人类的角度开始,以更具机器人的方式,并突出了机器人在手头执行该过程的主要原子功能。以及对行动过程流的分析,我们还列出了所涉及的所有要素/对象,并分析此过程及其应用环境以及一般药品过程中的技术和科学挑战。最后,为了让社区与我们的用例研究进行协作和利用,完整的流程说明可以在网站上提供,以及相关的数据,例如对象的网格和ROS环境中的通用机器人设置。