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不育夫妇中的生殖器菌群
Age (years) <25 Y 0 25-35 26 (40%) 36-40 27 (43%) >41 11 (17%) Type of sterility Primary sterility 55 (86%) Secondary sterility 9 (14%) Reason for sterility Tubal factor 5 (8%) Male factor 16 (25%) Endometriosis I/II 4 (6%) Endometriosis III/IV 4 (6%) Anovulation 4 (6%)特发性31（49％）反复植入失败4（6％）先前的流产12（19％）反复怀孕损失1（2％）243
生物疗法中不育和支原体测试的分析策略：从早期开发到生产规模
对生物产品的表征，包括确定产品安全性和杂质，对于监管依从性以及患者安全是必要的。细胞疗法工作流程是一个复杂的过程，它为制定分析策略来测试诸如支原体等杂质的分析策略可能具有挑战性。在开发早期选择分析测定时有几个关键的考虑：测定应符合或超过基于产品，过程和地区的监管指南；集成的样品到分析解决方案可以使实施更快，更高效，并优化例程；商业产品推出后，可伸缩性可以实现大规模的生产。本文将探讨如何利用快速的支原体和不育检测技术来通过帮助检测生产过程早期的潜在污染来提高对最终产品的信心。
玉米雄性不育和育性恢复现象的遗传基础——综述
摘要。高等植物的雄性不育现象是除雄蕊早熟、雌蕊早熟、异花柱（柱头不同）和自交不亲和性之外，迫使外部授粉的进化条件机制之一。由于消除了耗时且成本高的母系去雄过程，雄性不育系成为包括玉米在内的许多植物物种杂交品种种子生产中令人感兴趣的对象。使用雄性不育系进行杂交品种种子生产需要建立在不同环境下雄性不育的母系和具有育性恢复基因的合适父系。本文总结了玉米雄性不育和育性恢复遗传学方面的研究成果。
基于同源性的候选基因的候选基因，用于高地棉花中的男性无菌性编辑（gossypium hirsutum L.）
高地棉花（Gossypium hirsutum L.）占全球棉花生产的90％以上，为全球纺织品和油料种子工业提供了天然材料。提高高地棉花产量的一种策略是增加了杂种的采用。然而，棉花的灭绝是非常耗时的，棉花雄性不育的遗传来源受到限制。在这里，我们回顾了已知的植物核男性不育（NMS）的生物化学模式，通常称为植物遗传性不育（GMS），并将其表征为四组：转录调控，剪接，脂肪酸的运输和加工以及糖的运输和加工和加工。我们已经探索了30个单子叶植物（玉米，大米和小麦）和三个双子（拟南芥，大豆和番茄）的30 gms基因的蛋白序列同源性。我们已经分析了单子植物和双子DICOT GMS基因之间的进化关系，以描述这些基因鉴定的相对相似性和相关性。五个是较低的源物种，四种是单子叶植物独有的，五核，在所有物种中有14个高度保守，而另外则有两个。使用此源，我们已经在高地棉质基因组中鉴定了23个潜在的候选基因，用于开发用于杂交棉花育种的新雄性无菌种质。将基于同源性的研究与基因组编辑结合使用可以允许发现和验证GMS基因，这些GMS基因以前在棉花中未观察到多样性，并且可能允许在杂化棉产生中使用理想的雄性无菌突变体。
全基因组鉴定细胞色素p450超家族基因，靶向BNCYP704B1的靶向编辑赋予了Rapeseed
摘要：细胞色素P450（CYP450）单加氧酶超家族，它参与了许多主要和次级代谢物的生物合成途径，在植物生长和发育中起着重要作用。然而，先前未被发现了有关甘蓝纳普斯（BN-CYP450）中CYP450的全身信息，其生物学意义远未理解。氏族86 CYP450的成员，例如CYP704B，对于在植物男性繁殖中形成花粉外壳至关重要，并且已使用CYP704B基因的靶向诱变来在许多农作物中创建新的雄性无菌系。在本研究中，在甘蓝纳普斯品种“中舒安11”（ZS11）中鉴定了总共687个BNCYP450基因，其与拟南芥中的CYP450成员近2.8倍。与拟南芥相比，甘蓝纳普斯是一家具有较大基因组的四倍体油厂，因此可以理性地估计。将BNCYP450基因分为47个亚家族，并将其聚集成9个氏族。系统发育关系分析表明，CYP86家族由四个亚家族和109个BNCYP450组成。CYP86基因的成员在不同组织中显示出特定的表达曲线，并响应ABA和非生物胁迫。CYP704内CYP86氏族，BNCYP704B1A和BNCYP704B1B的两个BNCYP450S在MS26（男性无菌26，也称为CYP704B1）中显示出高的模拟性。这两个BNCYP704B1基因在年轻的芽中特异性表达。然后，我们同时通过簇状的定期间隔短的Palindromic重复序列/CRISPR相关的细胞蛋白9（CRISPR/CAS9）基因组工程系统来淘汰这两个BNCYP704B1基因。编辑的植物在成熟的花药中表现出无花粉的无菌表型，这表明我们在甘蓝乳胶中成功地再现了基因男性不育（GMS，也称为核男性无菌性）线。这项研究提供了BNCYP450S的系统性视图，并提供了一种策略，以促进CRISPR/CAS9系统的商业实用性，以通过敲除Rapeseed的Rapeseed快速生成GMS，通过敲除GMS控制基因。
通过 ddRAD-seq 和重测序分析检测生菜中的候选基因 LsACOS5 并开发雄性不育的 InDel 标记
利用雄性不育性进行 F 1 杂交的新育种方法将为自花授粉作物莴苣育种开辟一个令人兴奋的新领域。雄性不育性是 F 1 杂交育种的一个关键性状。绘制利用雄性不育性的致病基因图谱至关重要。“CGN17397”的 ms-S 雄性不育 (MS) 基因通过 ddRAD-seq 定位到连锁群 (LG) 8，并使用两个 F 2 群体将其缩小到两个标记之间。该区域跨越约 10.16 Mb，其中根据莴苣参考基因组序列（版本 8 来自“Salinas”）注释了 94 个基因。 MS 系“CGN17397-MS”和雄性不育 (MF) 系“CGN17397-MF”的全基因组测序表明，只有一个基因在 Lsat_1_v5_gn_8_148221.1 区域有所不同，该基因是酰基辅酶 A 合成酶 5 (ACOS5) 的同源物，并且在 MS 系中被删除。据报道，ACOS5 是花粉壁形成所必需的，并且 ACOS5 的无效突变体在某些植物中完全是雄性不育的。因此，我得出结论，指定为 LsACOS5 的 Lsat_1_ v5_gn_8_148221.1 是 ms-S 基因座的生物学上合理的候选基因。利用 LsACOS5 的结构多态性，开发了 InDel 标记来选择 MS 性状。这里获得的结果为生菜的基因雄性不育提供了有价值的信息。
CRISPR/Cas9 介导破坏精液蛋白 Sfp62 诱导家蚕雄性不育
简单总结：在雌雄同体动物中，精液蛋白对雄性生育至关重要。在本研究中，我们利用 CRISPR/Cas9 系统研究了鳞翅目模式昆虫家蚕精液蛋白 Sfp62 的功能。Sfp62 突变导致雄性不育并且可以稳定遗传。该突变不影响生长发育和雌性生育能力。这些数据表明 Sfp62 是不育昆虫技术 (SIT) 的理想靶标，在该技术中，转基因昆虫被大规模释放以与野生型昆虫交配，以减少甚至消灭目标害虫。有效实施 SIT 的决定因素包括转基因个体的强大竞争力和突变产生的多代效应。Sfp62 符合这些标准，因此是生物害虫防治的一个有希望的靶标。
将RNAi与OSMYB76R用作候选基因的记者可以有效地创建和验证水稻中的男配子型男配子型
配子型男性无菌性（GMS）在对粘性核雄性无菌线的花粉发育和种子传播中对杂交水稻繁殖的环境条件不敏感的种子传播起着重要作用。由于GMS的固有表型和遗传特征，因此很难找到并识别GMS突变体。然而，由于基因转录数据的丰度，已经发现了大量花粉特异性基因，其中大多数可能与GMS有关。为了促进对花粉发育和杂种利用中这些基因的研究，在这项研究中，使用RNAi和OsmyB76R作为报告基因建立了一种简单而有效的创建和识别GMS的方法。首先，修改了参与花青素合成的OSC1 / OSMYB76基因，我们已经验证了修改后的OSMYB76R与预先模拟的OSMYB76基因相同。然后，使用RNAi驱动器驱动子驱动子，导致了异常的花粉管生长，使用RNAi抗坏血酸氧化酶基因OSPTD1。最后，RNAi元素与OSMYB76R相关联并转化为OSMYB76突变体，并在T 1和F 1代发现了紫色颜色分离的变形。这表明OSPTD1 GMS已成功制备。与当前方法相比，此方法有几个优点。首先，将时间保存在材料制备中，因为比在常规方法中比较一代人需要比较一代，因此可以避免突变筛选。最后，结果更准确，背景效果要低得多，并且对植物没有损害。此外，对于识别，成本较低；不需要PCR，电泳和其他过程；并且不需要昂贵的化学药品或仪器。结果是准备和识别GMS基因的简单，有效，低成本和准确的方法。
一种小分子方法可恢复果蝇（Drosophila suzukii）的归巢抑制基因驱动所针对的雌性不育表型
基于 CRISPR 的基因驱动为控制疾病传播媒介和农业害虫提供了良好的前景。成功的抑制型驱动面临的一个重大挑战是抗性等位基因的快速进化。减轻抗性发展的一种方法是使用多个 gRNA 靶向功能受限区域。在本研究中，我们构建了一个 3-gRNA 归巢基因驱动系统，该系统针对臭名昭著的水果害虫果蝇 (Drosophila suzukii) 的隐性雌性生育基因酪氨酸脱羧酶 2 (Tdc2)。我们的调查显示，生殖系中的归巢水平较低，但喂食章鱼胺可恢复 Tdc2 突变雌性的产卵缺陷，与其他抑制驱动目标相比，它更容易维持品系。我们在果蝇中测试了类似系统的有效性，并通过引入启动子-Cas9 转基因来构建额外的分裂驱动系统，以提高归巢效率。我们的研究结果表明，野生种群的遗传多态性可能限制基因驱动等位基因的传播，而位置效应对 Cas9 活性有深远的影响。此外，这项研究凸显了有条件地挽救基因驱动引起的雌性不育症的潜力，为基因驱动转基因昆虫的工业规模生产提供了宝贵的工具。
