用于药物发现的加速血浆蛋白质组学:血浆蛋白质组学正在通过通过液体活检对血液中的循环蛋白进行全面分析,从而彻底改变了药物发现。这种方法确定了早期疾病检测的关键生物标志物,加速了新型药物靶标的发现,并提高了药物发育的效率。血液中的蛋白质分析支持个性化的医学,从而对个人对治疗的反应提供了见解。总体而言,血浆蛋白质组学具有更精确,更有效的药物疗法的新时代的希望,对改善患者预后产生了重大影响。研究人员可以利用Evosep独特的端到端样品制备工作流程和Thermo Fisher的最新最新的Thermo Scientific Orbitrap星体质谱仪功能来加快对临床相关生物标志物的识别和验证。
胎牛血清(FBS)Sigma Aldrich F74524 Hoechst 33258 Sigma Aldrich 861405人类细胞因子阵列R&D Systems ary005b L-谷氨酰胺Sigma Sigma aldrich aldrich aldrich aldrich g7513 lio bio-techne I bio-techne i bio-techne 3401020202020202020202 1x 1x 1x 1x 1x 1x 1x 1x 1x1x 1x 1x 1x 1x 1x 1x 1x。 Noggin Bio-Techne 3344-NG-050 Normal horse serum (NHS) Vector Laboratories S-2000 Normal goat serum (NGS) Dako X0907 Neurobasal medium ThermoFisher Scientific A1371201 Paraformaldehyde (PFA) ThermoFisher Scientific P/0840/53 Phosphate buffered saline Sigma Aldrich P4417-100TAB Poly-li-Ernithine Merck P3655-10MG SB431542 Miltenyi Biotech 130-106-275 SHH-C24II BIO-TECHNE BRIO-TECHNE 1845-SH-SH-025 SH-025 ALGINATE(Provona Slm 100)
Sequencing Method: in-house Genotypic antiretroviral resistance testingof HIV using Sanger sequencing (V7270) Nucleic acid extraction: BioMérieux EasyMag automated platform, with NucliSENS extraction reagents (as per manufacturer's instructions) Amplification: Bio-RAD Dyad DNA engine thermal cycler Gel electrophoresis and PCR cleanup using ThermoFisher exoSap-it(V7255)扩增子的定量:热泡量QUBIT 2.0荧光计(V7064)为抗病毒抗性测试(V7256)核酸序列数据制备Sanger测序反应
Wnt3a,R-Spondin1和Noggin(WRN)调节培养基。15在简短的L-WRN(ATCC CRL-3276)细胞中,在10 cm板上培养了带有培养基(Dulbecco修改的Eagle的培养基[DMEM,Fisher],0.5 mg/ml G418(Thermofisher),0.5 mg/ml hygromycin b(Hygrofomycin B(Hygroforisher),1%的(生命),(life offermin),/strimies contrymin和1%(life ottercin),(thermofisher)的0.5 mg/mL G418(Thermofisher),/STRECTCILIN(LIFERCTIN),症状(Themerofisher),/症胎牛血清)。在10%的L-WRL细胞(ATCC,CRL-3276)中已在10 cm板中播种在培养基中(没有G418和Hygromycin B),将细胞孵育3-4天。当细胞为80%-90%汇合时,将培养基替换为10 mL新鲜培养基,并将细胞孵育24小时。收集培养基,以1000×g离心4分钟,通过0.22-PM无菌过滤器,并存储在-80°C下。将另外10毫升的新鲜培养基添加到板上并在24小时后收集,以使用相同的步骤使第二批条件培养基。在使用前将第一,第二和第三批条件介质混合在一起,以制备100%WRN条件介质。
Agilent Novocyte Quanteon 4025 流式细胞仪 Azure biosystems c600 凝胶成像仪 ThermoFisher QuantStudio3 qPCR 系统 2x ThermoFisher SimpliAmp PCR 系统 Molecular Devices Spectramax Plus 384 UV-Vis 微孔板读数仪 多台离心机 Denovix Nanodrop 和细胞计数器 哺乳动物细胞培养室,配备 3 个 Heracell 160i CO 2 培养箱和 1 个三气 CO 2 /N 2 Tuttnauer 3870 ELV 高压灭菌器 4x -80c 超低温冰柜,配备 24 x 7 监控和发电机备用 各种冰箱、-20 冰柜和 4c 熟食箱 借出的个人实验室设备(天平、加热板、玻璃器皿、pH 计、电泳设备、涡旋器、移液器等) 配备蔡司 Axiocam 202 单色相机的 Olympus IX70 荧光显微镜
我们建议使用Qubit®DSDNABR分析(Q32850; Thermofisher Scientific)确定HMW DNA浓度。该测定法使用超敏感的荧光核酸染色来用标准的荧光计和荧光素激发和发射波长来量化双链DNA(dsDNA)。建议从顶部,中部和底部进行多次测量。
•Purecol®(CAT#5005)•干细胞•具有血清和抗生素的细胞培养基•细胞培养瓶•胰蛋白酶-EDTA(Fisher Scientific,Cat#25-200-114)•地塞米松(Dex)(Dex)(Sigma-Aldrich,CAT#D2915-100MG,CAT) -Aldrich,CAT#i5879-5g)•印霉素(IM)(Sigma -Aldrich,CAT#i7378-25g)•4%多羟基甲醛(Thermofisher,CAT#047392-9M) 0.22 µm过滤器•DI水•血细胞•细胞培养板•血清学移液器•Eppendorf Tubes
人类IPS细胞(1231A3)在Imatrix-511上保持了(CAT。编号np891-011) - 涂层板和在STEMFIT®培养基中生长(Cat。编号akn02)。细胞,并使用Tryple Select(Thermofisher)(热泡)将其分解为单个细胞,并进行洗涤和计数。然后将单细胞在补充10 µM Y27632的StemFit培养基中以10 5个细胞/ml的播种(Cat。编号04-0012),并以55 rpm的恒定旋转器搅动转移到能够的30 mL一次性生物反应器中。在第2天和第4天收获细胞,并被Tryple Select分散的球体分散,并用锥虫蓝色染色并计数。细胞,并被Tryple Select分散的球体分散,并用锥虫蓝色染色并计数。
2009 年,德国哈雷马丁路德大学的 Ulla Bonas、Jens Boch、Thomas Lahaye 和 Sebastian Schornack 首次在《科学》杂志上发表了 TAL 代码的发现。5 美国非营利组织 2Blades 基金会与科学家合作,监督专利保护以及研究和商业应用的许可。科学家和 2Blades 共同将生物医学商业化权利和所有研究和试剂使用权利独家授权给 Life Technologies(现为 ThermoFisher),而 2Blades 基金会则负责授权将 TALEN 用于农业植物。2