在这里,我们展示了一种策略,以合理地编程toehold介导的DNA链置换反应的延迟发作。该方法基于阻断链,通过与靶DNA的toehold结构域结合来有效抑制链位移。特定的阻滞剂链的酶促降解随后实现了链位移反应。阻滞剂酶促降解的动力学控制了链位移反应开始的时间。通过改变阻滞剂链的浓度和酶的浓度,我们表明我们可以很好地调整并调节链位移反应的延迟开始。另外,我们表明该策略是用途广泛的,可以通过不同的酶正交控制每个酶,每个酶都专门针对不同的阻滞剂链。我们使用RNase H以及两个DNA修复酶FPG和UDG以及相应的阻滞剂设计并建立了三个不同的延迟链位移反应。可以使用动力学建模可以方便地预测所达到的时间延迟,而无需不需要泄漏,可以通过高灵活性进行编程。最后,我们表明,延迟的链位移反应可以耦合到下游过程,并用于控制从DNA纳米电视中的配体释放以及DNA Aptamer抑制蛋白质。
1 罗马涅肿瘤研究与治疗科学研究所 (IRST) IRCCS 医学肿瘤学系,Via Piero Maroncelli 40, 47014 Meldola,意大利; emanuela.scarpi@irst.emr.it (西班牙文); cristian.lolli@irst.emr.it (中文); giuseppe.schepisi@irst.emr.it (GS); tcursano@gmail.com(MCC); chiara.casadei@irst.emr.it (抄送); ugo.degiorgi@irst.emr.it (UDG) 2 意大利特伦托 38122 圣基亚拉医院肿瘤科; orazio.ca fffi o@apss.tn.it(OC); francesca.Maines@apss.tn.it (调频); Stefania.Kinspergher@apss.tn.it (SK)3 意大利国家癌症研究所基金会医学肿瘤学系,20133 米兰; pierangela.sepe@istitutotumori.mi.it (PS); Giuseppe.procopio@istitutotumori.mi.it (GP) 4 意大利比萨大学医院肿瘤中心肿瘤医学科 2,邮编 56126; lugal71@yahoo.it(LG); andreasbrana89@gmail.com (AS)5 意大利阿维亚诺肿瘤参考中心肿瘤医学系,33081 阿维亚诺-波代诺内; lfratino@cro.it 6 意大利莱切 73100 Vito Fazzi 医院肿瘤科; chiuriv@yahoo.it 7 意大利马切拉塔医院肿瘤科,62100 马切拉塔, mattymo@alice.it 8 意大利热那亚 IRCCS 圣马蒂诺综合医院肿瘤医学学术单位,16132; zanardielisa@yahoo.it 9 热那亚大学医学院内科和医学专科系(DIMI),意大利热那亚 16132 10 意大利博洛尼亚 40138 S.Orsola-Malpighi 医院肿瘤科; francesco.massari@aosp.bo.it 11 临床肿瘤学,Arcispedale Sant'Anna 大学医院,意大利费拉拉 44124; ilaria.toma88@gmail.com 12 意大利罗马生物医学大学肿瘤医学系,00128 罗马,意大利; d.santini@unicampus.it 13 联合医院帕多瓦 SUD,35043 帕多瓦,意大利; caterina.modonesi@aulss6.veneto.it * 通信地址:vincenza.conteduca@irst.emr.it;电话:+39-0543-739100;传真:+39-0543-739151
劳拉·霍伊加德(LauraHøygaard)的目的是研究与刑事案件有关的DNA证明的实际和法律限制。为了实现这一目的,在论文中,我检查了限制将影响DNA证据在法院证据中的作用的程度,以及对存储DNA时适用的限制的调查。据指出,不能基于DNA证书定罪,并且必须将DNA证据作为一定的时刻包括在全部证据评估中。通过对法院证书在法院的无罪释放或定罪的理由中发挥了至关重要的作用,我还可以得出结论,仍然有疑问,仍然有疑问,有多少进一步证据表明被告对被定罪所需的罪恶感。与此评估有关,法院强调了许多指定的情况。但是,可以得出结论,在犯罪证据中包括大量的DNA证据。通过考虑DNA作为刑事案件的证据是否引起了与丹麦国际义务有关的一些特殊法律安全考虑,可以得出以下结论:这并非没有违反《欧洲人权公约》(ECHR)第6(2)条。2关于纯真的估计,法院将被告的解释或被动性归因于提出的DNA证明任何证据,只要被告不仅仅是基于他的不信任或缺乏解释而被判刑。fsva。存储单元样本和有关DNA证书的信息,与遵守有关尊重隐私权的第8条第8条有关的特殊法律确定性是有一个特殊法律确定性的。欧洲人权法院(EMD)尚未明确决定是否适用有关DNA存储的丹麦法律是否会侵犯权利。但是,对EMD的做法的审查表明,成员国应特别注意许多情况,例如存储时间。