披露:本研究由美国环境保护署资助。我没有利益冲突需要声明。这只是一个科学演示。本演示中提供的部分或全部数据可能是初步的,可能会发生变化。本演示不代表 EPA 政策,提及的产品或商品名不构成使用或认可的建议。请勿引用或引述本演示。照片由 CCTE 的 Thresa Freudenrich 拍摄
人体体外组织是嵌入生物材料(通常是水凝胶)的人体细胞体外 3D 培养物,可重现人体的异质、多尺度和结构环境。3D 组织和器官工程中使用的现代策略整合了自动化数字制造方法的使用,例如 3D 打印、生物打印和生物制造。人体组织和器官及其生理内和生理间的相互作用特别复杂。因此,人们越来越关注材料科学、医学和生物学与艺术和信息学的交叉。本报告介绍了生物墨水聚合的计算建模及其与生物打印的兼容性的进展、数字设计和制造在流体培养设备开发中的应用,以及生成算法在模拟体外组织的自然和生物增强中的应用。作为未来的发展方向,我们讨论了使用串联体外组织作为人体模拟系统及其在药物药代动力学和代谢、疾病建模和诊断中的应用。
摘要基因治疗是通过破坏与疾病相关基因的表达或替换或纠正受影响细胞类型中突变的基因座的表达来治疗遗传性疾病,癌症或传染病。除了常规的基因转移方案外,设计器核酸酶(例如锌指核酸酶,故事核酸酶,巨核酸酶或CRISPR-CAS核酸酶)在该领域中越来越重要。使用设计师的核酸内切酶的使用使研究人员可以通过促进DNA双链断裂来校正有害突变。CRISPR-CAS技术被广泛用作强大的基因组编辑工具,因为它的简单性质由单个RNA分子引导到目标位点的核酸酶组成。尽管如此,主要问题之一是CRISPR-CAS系统的脱靶活动,该活动与特定的CRISPR-CAS核糖核蛋白(RNP)络合物针对基因组中其他序列的相似性有关。先前的研究表明,除了序列同源性外,靶向活性与细胞中的RNP浓度和基因组暴露于这些RNP的时间正相关。到目前为止,还没有执行很多测定,这些测定详细介绍了影响开目标和脱靶裂解动力学的参数。在我的主论文项目中,我开发了新颖的体外方法,以评估各种参数对靶向和脱靶裂解动力学和切割效率的影响。我的结果表明,CRISPR-CAS DNA裂解动力学在很大程度上取决于RNP,DNA靶位点和RNP脱靶结合位点的浓度。i发现,靶向裂解动力学和效率取决于(i)目标序列本身,(ii)RNPS和靶位点之间的比率,(iii)RNP的浓度,(iv),(iv)非目标裂解位点的浓度以及(v)(v)(v)off target结合位点的浓度。数据表明,单元格中的切割效率不仅取决于目标位点组成本身,而且还取决于脱靶裂解位点的数量,更重要的是 - 更重要的是 - 非目标结合位点的数量。
肾结石是由肾脏中结晶的矿物质和盐形成的固体肿块,由于饮食变化,肥胖症的增加和液体摄入量减少,其流行率在全球范围内上升。了解肾结石的病理生理学对于制定有效的预防和治疗策略至关重要。体外研究使研究人员能够研究在受控环境中导致石材形成的各种因素,从而更容易研究尿成分与晶体形成过程之间的复杂相互作用。本综述旨在对体外研究中使用的方法,与肾结石有关的重要发现以及它们对临床实践的影响进行深入研究。
传统上,采用多瘤病毒DNA复制分析的选择性低分子量DNA提取HIRT提取方法,一种多步骤,劳动密集型和耗时的程序。DNA复制结果在复制样品之间通常不一致。为了提高多瘤病毒DNA复制测定法的效率和可重复性,我们使用Qiagen自旋柱技术和HIRT提取技术比较了DNA质量和产量。在转染后第2、4和第6天收集了用SV40 DNA转染的CV-1细胞,并使用Qiagen自旋柱和HIRT提取方法提取DNA。使用32个P线性的全长SV40 DNA探针进行了南部杂交。病毒DNA复制进行定量,并比较了两个程序获得的结果。Southern印迹分析显示,使用Qiagen自旋柱技术恢复了一致和增强的SV40 DNA恢复,并且在6天期间的病毒DNA复制在一式三份样品中可重现。此外,Qiagen自旋柱技术减少了从24小时获得多瘤病毒复制测定的高质量DNA所需的时间。采用这种提取程序将改善多瘤病毒DNA复制活性的确定,同时减少研究者对有毒有机化合物的暴露和处置。©2004 Elsevier B.V.保留所有权利。
凯利解释说,在SIT成员参加了一场题为“严重清洁伤口以最大程度地降低风险”的专题讨论会上,在2016年的英国年度会议上,该小组能够通过审查使用抗微生物溶液进行伤口清洁的潜力来解决这一问题。由马克·科利尔(Mark Collier)提出了研讨会,他根据自己在实践中使用Prontosan®(B。Braun)的经验提供了实践信息和指导,帕梅拉·霍弗(Pamela Hofer)概述了该产品的科学证据。开始将改进付诸实践,坐着审查了当前的文献和围绕抗菌伤口清洁解决方案的证据。国际伤口感染研究所(IWII,2016年)提出了两种靶向生物膜的选择:聚己二甲基甲基二圭奈德(PHMB)和八苯胺二羟基氯化物(OCT)。通过对菌落单位,毒性,洗涤剂,护肤和除臭剂以及可用证据的影响进行比较。PHMB和甜菜碱表面活性剂溶液,因为高级优质研究表明,其时间效率比OCT更高,毒性较低,表面张力降低,并且不需要额外的成分来保护皮肤或除臭。
tau(微管蛋白相关单位)是一种神经元蛋白家族,是通过单个基因的替代mRNA剪接产生的。TAU的功能受其磷酸化状态调节,而Tau在细胞中最明确的作用是t促进微管稳定性。5在神经退行性期间,异常磷酸化导致由Tau蛋白组成的细胞内神经原纤维缠结(NFT)的形成,该蛋白质的过度磷酸化并经历了高磷酸化的聚集体,该蛋白质的高磷酸化tau蛋白(称为磷酸tau(ptau)(ptau)。6,7
体外和体外农杆菌介导的毛状根转化 (HRT) 测定是植物生物技术和功能基因组学工具包的关键组成部分。在本报告中,使用 RUBY 报告基因优化了大豆的体外和体外 HRT。评估了不同的参数,包括农杆菌菌株、细菌细胞培养物的光密度 (OD 600 )、共培养基、大豆基因型、外植体年龄以及乙酰丁香酮的添加和浓度。总体而言,就毛状根和转化根(表达 RUBY )的诱导百分比而言,体外测定比体外测定更有效。尽管如此,体外技术被认为更快且方法更简单。在 cv 的 7 天大子叶上观察到了 RUBY 的最高转化。 Bert 用 R1000 接种 30 分钟,R1000 悬浮在 ¼ B5 培养基中,OD 为 600 (0.3),乙酰丁香酮含量为 150 µM。该测定的参数还通过两步体外毛状根转化获得了最高百分比的 RUBY。最后,使用基于机器学习的建模,进一步确定了两种测定的最佳方案。本研究建立了适用于大豆功能研究的高效可靠的毛状根转化方案。
背景:如果治疗不当,超广谱 β-内酰胺酶 (ESBL) 正在成为常见的院内病原体,并且是导致死亡和发病的重要原因。当务之急是找到有效的治疗方案来对付产生 ESBL 的细菌。本研究旨在评估超广谱 β-内酰胺酶的产菌对四环素类药物的体外敏感性模式。方法:这项描述性横断面研究在拉瓦尔品第国立科技大学陆军医学院微生物学系进行了 6 个月。本研究纳入了 78 个非重复分离株。使用 Jarlier 等人的方法进行 ESBL 检测。然后使用改良的 Kirby Bauer 纸片扩散法测试四环素类药物(如四环素、强力霉素、米诺环素和替加环素)的体外敏感性。在孵育期结束后测量抑菌圈,并根据 CLSI 和 FDA 指南进行解释。结果:分离株中大肠杆菌约占56.4%,肺炎克雷伯菌约占28.2%,肠杆菌属约占10.26%,产酸克雷伯菌和不动杆菌属各占2.6%。ESBLs对替加环素最敏感,对米诺环素的敏感性次之,对强力霉素和四环素的敏感性最差。结论:在四环素类中,替加环素对产ESBL的革兰氏阴性杆菌体外敏感性最好。关键词:超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),四环素,敏感性
我们还需要知道什么?与使用 CRISPR 相关的伦理问题包括获得充分知情同意的能力、基因编辑的潜在未来后果及其潜在的意外影响,以及基因编辑可能对后代产生的影响。基于 CRISPR 的疗法的长期影响目前尚不清楚。需要进一步研究新兴应用。对接受第一种基于 CRISPR 的疗法的患者进行长期跟踪将有助于了解这些治疗的安全性和有效性。虽然这些疗法中的第一个已经获得监管授权,但下一个可行的基于 CRISPR 的疗法仍处于早期开发阶段,关键临床试验预计至少要到 2027 年才能完成。
