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历史指南。乌克兰和东中欧
2022 年 2 月，当俄罗斯开始向基辅推进时，西方表现出了团结。强有力的经济制裁和大量武器交付，包括德国制造的防空系统、装甲车和重型火炮，表明欧洲和美国愿意支持乌克兰争取独立并保卫其北约东部侧翼。加强与俄罗斯、乌克兰和黑海地区直接接壤的联盟伙伴是当前联盟政策的重点。国防和联盟防御再次成为首要任务。未来，它还将塑造德国联邦国防军的军事组织、训练和装备。
BioXp® Select DNA 克隆试剂盒、Golden Gate 组装体...
图 1. BioXp 上的 Golden Gate 组装。Golden Gate 组装概览。要克隆的插入 DNA 带有侧翼 GG 酶识别位点（BsaI 和/或 BsmBI），可以作为合成基因片段或 PCR 扩增子（1A）和（1B）或预克隆载体格式（1C）获取。用户可以输入任何具有兼容 GG 突出端（以粉色和紫色显示）的所需目标载体（2）。用户在 BioXp 3250 上输入 96 孔板和 GG 克隆条（4）。GG 克隆产品在 BioXp 运行后作为输出交付（5）。
评估 CRISPR/Cas9 基因组编辑对小麦病原菌 Parastagonspora nodorum 的功效
摘要背景：基因组编辑工具 CRISPR/Cas9 提供了一种产生靶向突变的有效方法，彻底改变了基因操作。该技术利用 Cas9 内切酶和向导 RNA (sgRNA)，它们相互作用形成 Cas9-sgRNA 复合物，通过引入双链 DNA 断裂来启动基因编辑。我们测试了 CRISPR/Cas9 方法作为促进小麦致病真菌 Parastagonospora nodorum 中各种反向遗传方法的有效性。结果：用 Cas9 蛋白和 sgRNA 转化 Parastagonospora nodorum 原生质体，以 Tox3 效应基因为靶点的预组装核糖核蛋白 (RNP) 复合物的形式转化。随后对 P. nodorum 转化子的筛选表明，筛选出的突变体 100% 被编辑。我们进一步测试了 RNP 复合物与含有 1 kb 同源侧翼 DNA 的 Tox3 -同源定向修复盒共转化时的功效。随后对所得转化子进行筛选，结果显示同源重组效率超过 70%。使用含有 50 bp 微同源侧翼的可选择标记的 Tox3 -同源定向修复盒进一步转化也实现了 25% 的同源重组效率。这些同源定向修复方法的成功表明 CRISPR/Cas9 适用于其他体内 DNA 操作方法，例如插入 DNA 和产生点突变。结论：这些数据突出了 CRISPR/Cas9 在加速 Parastagonospora nodorum 中无转基因基因敲除以及促进其他基因操作方法方面的巨大潜力。使用这些工具将大大减少评估疾病基因需求和进行功能研究以确定其作用所需的时间。关键词：CRISPR/Cas9、基因编辑、核糖核蛋白复合物、Parastagonospora nodorum
病理RFC1重复扩张并不有助于炎症性神经病的发展
复制因子C亚基1（RFC1）中AAGGG重复的双重膨胀最近被描述为造成小脑共济失调，周围神经病和前庭症状症状综合征。这种遗传改变还允许多达三分之一患有特发性感觉神经病的病例中的遗传clas化。在这里，我们筛选了炎症性神经病患者的特征良好的同类rfc1重复扩张，以探索RFC1是否增加了背景速率，并且可能参与炎症性神经病的发病机理。使用短距离侧翼PCR和重复提交的PCR筛选了259名炎性神经病和243个健康对照的人。还测试了AAAGG和AAAAG重复单元的主要非致病性扩张，在侧翼PCR和阳性重复PCR上进行的情况。 所有患者均未显示RFC1的双重AAGGG膨胀，其AAGGG的载体频率分别与对照[n = 27（5.2％）和n = 23（4.7％）相当。 p> 0.5]。 数据表明，AAGGG重复的病理扩张并不有助于炎症性神经病的发展，也不会导致误诊病例。 因此，在该患者人群中未指示RFC1重复扩张的常规基因筛查。的情况。所有患者均未显示RFC1的双重AAGGG膨胀，其AAGGG的载体频率分别与对照[n = 27（5.2％）和n = 23（4.7％）相当。 p> 0.5]。数据表明，AAGGG重复的病理扩张并不有助于炎症性神经病的发展，也不会导致误诊病例。因此，在该患者人群中未指示RFC1重复扩张的常规基因筛查。
纳米孔测序作为一个可扩展的，具有成本效益的平台，用于分析临床T细胞疗法后多克隆矢量整合位点
基因修饰细胞中载体整合位点的抽象背景分析可以提供有关克隆性和对附近基因的潜在生物学影响的关键信息。当前的短阅读下一代测序方法需要专门的仪器和大批量运行。方法，我们使用纳米孔测序分析了由γ逆转录病毒载体转导的T细胞的矢量积分位点，SFG.ICASP9.2A。δCD19。DNA限制酶，用两个6个切割者NCOI和BSPHI消化；以及通过逆PCR或盒式连接PCR扩增的侧翼基因组DNA。嵌套PCR和条形码后，在牛津纳米孔平台上测序了扩增子。读取被过滤以质量，修剪和对齐。自定义工具的开发用于群集读取并合并重叠簇。结果逆PCR和盒式连接PCR都可以成功扩增侧翼基因组DNA，盒式连接PCR显示出较小的偏差。480万原始读数分为12,186个集群和6410个克隆。3'长末端重复（LTR） - 基因组连接可以在5-核苷酸跨度内解决大多数簇，并且在一个核苷酸跨度内，用于≥5个读取的簇。插入位点的染色体分布及其对接近转录起始位点的区域的偏爱与先前的γ逆转录病毒载体整合体的报告一致，该报告通过短阅读的下一代测序分析。结论我们的研究表明，使用纳米孔测序来绘制多克隆矢量积分位点是可行的。该测定是可扩展的，需要最低资本，这共同实现了具有成本效益和及时的分析。需要进一步的细化来减少扩增偏置并改善单核苷酸分辨率。
使用定量MRI脂肪分数分析评估颞下颌关节疾病患者的咀嚼肌 - 是否可以是生物标志物？
颞下颌关节疾病（TMDS）与咀嚼肌密切相关，但是缺乏评估肌肉的客观和定量方法。Ideas-IQ是一种化学移位编码的磁共振成像（CSE-MRI），可以量化脂肪差异（FF）。这项研究的目的是开发一种基于MR理想的IQ方法，用于TMD患者的定量肌肉诊断。回顾性地包括了65例接受3次MRI扫描（包括CSE-MRI序列）的患者。MRI诊断和临床数据进行了审查。正常组有19例患者，TMD组有46例具有单侧椎间盘位移的患者。TMD组被细分为具有和没有紧握的那些。在CSE-MRI上，两位口服放射科医生两次测量了咬肌，内侧和外侧翼状肌肉的左右FF值，并使用了平均值。使用CSE-MRI的FF测量结果表现出极好的观察内和观察者间一致性（两者的ICC> 0.889）。在咬合体，内侧翼状和翼展中，右侧和左FF值之间没有统计学上的显着差异（p> 0.05）。在TMD组中发现了统计学上的显着差异，而没有夹紧，其中咬合肌肉在椎间盘位移侧的统计学上的FF值明显低于正常侧的FF值（3.94±1.61）（4.52±2.24）（p <0.05）。CSE-MRI可以重复量化肌肉FF值，预计将是TMD患者的客观肌肉评估的生物标志物。与其他咀嚼肌相比，咬肌有望特别有用，但需要进行研究。
最大限度提高交战区域杀伤力 - 陆军大学出版社
1944 年冬天的寒风吹过前线。当班长跪在机枪队旁边，查看交战区域计划时，他听到一个非常熟悉的声音，让他紧张不安。两名从观察哨逃到他们面前的士兵证实了他的恐惧：“坦克！”他们喊道。突然，两辆 Sonderkraftfahrzeug 251 半履带装甲运兵车冲破了对方的树林，两辆 Panzer IV 坦克在两侧护卫。沿线的步枪手和机枪手惊恐地看着他们的 M1 步枪发射的 .30 卡宾枪子弹无助地从装甲上弹开，而连长则呼叫火箭筒手。这些勇敢的士兵冒着生命危险向前奔跑，或以一定角度奔跑，拼命试图击中 Panzer IV 的侧翼或半履带的平坦部分。
143例白质病变患者的视网膜评估
简介：注意/多动症（ADHD）是一种神经发育障碍，该障碍通常表现为fig虫，是一种非目标的摩托车作用。许多研究表明，在不同条件下，刺激变化是一种自我调节的机制，以认知要求任务期间注意力和机敏性。烦恼也与反应时间变异性有关。然而，缺乏定义和量化的标准变量可能会导致跨研究的数据和可解释性问题的差异。此外，与青年人相比，成年人的青少年知识尚不清楚。本研究旨在设计一个框架，以量化有意义的填充变量，并将它们应用于认知任务，在患有多动症的成年人中，在认知任务（侧翼）上进行填充和表现之间的关系。
最大限度提高交战区域杀伤力 - 陆军大学出版社
1944 年冬天的寒风吹过前线。当班长跪在机枪队旁边，查看交战区域计划时，他听到一个非常熟悉的声音，让他紧张不安。两名从观察哨逃到他们面前的士兵证实了他的恐惧：“坦克！”他们喊道。突然，两辆 Sonderkraftfahrzeug 251 半履带装甲运兵车冲破了对方的树林，两辆 Panzer IV 坦克在两侧护卫。沿线的步枪手和机枪手惊恐地看着他们的 M1 步枪发射的 .30 卡宾枪子弹无助地从装甲上弹开，而连长则呼叫火箭筒手。这些勇敢的士兵冒着生命危险向前奔跑，或以一定角度奔跑，拼命试图击中 Panzer IV 的侧翼或半履带的平坦部分。