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CRISPR/Cas9 RNP 辅助验证 palmarumycin ...
Lophiotrema 属是 Lophiotremataceae 科中的一种子囊菌属真菌。该属的成员作为内生菌已被从多种宿主植物以及陆地和海洋生境中的植物碎片中分离出来，它们被认为在这些环境中起着腐生菌的作用。Lophiotrema sp. F6932 是从新加坡乌敏岛的白色红树林 (Avicennia officinalis) 中分离出来的。该真菌的粗提取物表现出强效抗菌活性，通过生物测定指导的生物活性成分分离和结构解析，分离出了 palmarumycin C 8 和一种新的类似物 palmarumycin CP 30 。全基因组测序分析鉴定出一种假定的 1 型迭代 PKS (iPKS)，该 PKS 推测参与了 palmarumycin 的生物合成。为了验证帕尔马霉素 (PAL) 基因簇参与这些化合物的生物合成，我们采用核糖核蛋白 (RNP) 介导的 CRISPR-Cas9 诱导 PAL 中酮合酶 (KS) 结构域的靶向缺失。KS 结构域上游和下游的双链断裂 (DSB) 之后进行同源定向修复 (HDR)，其中潮霉素抗性盒两侧有 50 bp 的同源性。与野生型菌株相比，所得的缺失突变体表现出完全不同的表型，因为它们具有不同的菌落形态并且不再能够产生帕尔马霉素或黑色素。因此，这项研究证实了 PAL 参与了帕尔马霉素的生物合成，并为实施类似方法表征这种研究不足的真菌菌株中其他感兴趣的基因簇铺平了道路。
表皮生长因子增强的新型转化生长因子：从非肿瘤组织中分离
摘要 表皮生长因子 (EGF) 可诱导非肿瘤大鼠肾成纤维细胞在细胞培养中发生转化表型，这些转化表型是从成年小鼠的许多非肿瘤组织（包括颌下腺、肾脏、肝脏、肌肉、心脏和大脑）中分离出来的。它们与之前描述的从肿瘤细胞中分离出来的转化生长因子 (TGF) 类似，具体如下：它们可通过酸/乙醇提取，并且是酸稳定的低分子量 (6000-10,000) 多肽，需要二硫键才能起作用，并且它们会导致非肿瘤指示细胞的锚定非依赖性生长，而这些细胞在没有它们的情况下不会在软琼脂中生长。从雄性小鼠的颌下腺中对这些 TGF 进行部分纯化，结果表明它们不同于 EGF。与之前描述的细胞外 TGF 不同，但与来自肿瘤细胞的某些细胞 TGF 一样，它们通过 EGF 增强其促进锚定非依赖性生长的能力。颌下腺 TGF 蛋白的等电点接近中性。在 Bio-Gel P-30 上进行色谱分析，然后进行高压液相色谱分析，总纯化率达到 22,000 倍。在 EGF 存在下进行测定时，最纯化的蛋白质在 1 ng/ml 的软琼脂中具有诱导生长的活性。这些数据进一步证明了肿瘤形成可能是由非肿瘤生化过程的定量而非定性改变引起的。我们最近描述了 (1) 从几种肿瘤小鼠组织（包括由莫洛尼肉瘤病毒 (MSV) 转化的成纤维细胞和最初由化学致癌物诱导的可移植膀胱癌）中分离和表征一组低分子量、酸稳定性多肽（称为转化生长因子 (TGF)）。这些多肽是可通过酸/乙醇提取的细胞内蛋白质。类似的细胞外转化多肽，称为肉瘤生长因子 (SGF)，是由 De Larco 和 Todaro (2) 从培养的 MSV 转化小鼠成纤维细胞的条件培养基中首次分离出来的。最近报道了几种其他细胞外转化多肽，它们来源于人类 (3) 和动物 (4) 来源的肿瘤细胞。所有这些多肽在应用于培养的未转化、非肿瘤指示细胞时都会引起以下一系列变化，这些变化为 TGF 提供了一个操作性定义：(i) 单层细胞密度依赖性生长抑制的丧失；(ii) 单层细胞过度生长；(iii) 细胞形状改变，导致指示细胞呈现肿瘤表型；(iv) 获得锚定独立性，从而能够在软琼脂中生长。未转化的非肿瘤细胞不会在软琼脂中形成逐渐生长的菌落，并且培养细胞的这种不依赖锚定的生长特性与体内肿瘤的生长具有特别高的相关性（5-7）。
ihumii sp。 11月，Varibaculum Vaginae sp。十一月。和tessaracoccus timonensis sp。十一月，从健康塞内加尔妇女的阴道拭子中分离出来 古老的牙纸浆：古团生物学的杰作组织
阴道是一种湿生物体，包括一个由几种类型的微生物定植的复杂生态系统[1]。döderlein杆菌或乳酸杆菌是育儿健康妇女的阴道菌群中的大多数细菌[2]。已经进行了许多研究，其中一些结论是，该综合生态系统主要由属于乳酸属的物种主导[3]。这种曲线的不平衡会导致阴道病[4]。细菌性阴道病首先由Schröder于1921年描述。他注意到营养不良的特征是乳脂核酸的降低，阴道粘膜的pH值增加以及主要是革兰氏阴性厌氧菌细菌（例如Gardnerella cardnerella cagnnerella cagnnerella cartnerella cartnerella cartnerellias cartnerella curnobobium paginae and Mobiluncus curtisii [5,5,6]）。人类阴道微生物群在
人工智能法律主体地位分析
人工智能在社会生活中的大规模应用，带来了权利归属、责任界定等新的法律问题，有必要对人工智能能否作为法律主体进行探讨。鉴于该问题现存的争议，需要从二阶观察的视角重新审视。人是主体机制的本源，具备理性与自由意志，为法律主体提供价值源泉，是法律主体的本源，在实体化过程中，法律主体从人格特征中分离出来，出现了作为派生法律主体的法律人。人工智能不具备成为本源法律主体的条件，但如果其作为法律主体能够满足人类的长远根本利益，仍有被制定为派生法律主体的可能性。
3nine rix——基于...的新型螺旋式撇油器
处理杂油的方法有很多，例如使用皮带、盘式或管式撇油器。这些技术通常不能提供足够的分离效果，因为它们不能分离出足够的杂油，或者会去除过多的切削液。新型螺旋式撇油器是一种专利解决方案，由日本的 RIX 公司制造，现在由 3nine 在欧洲销售。该技术利用油和切削液之间的粘度差异，粘度较大的油会粘附在旋转的螺纹装置上，然后从那里分离出来。专利的螺旋式撇油器由于维护成本低、效率高，已成为日本工厂的标准解决方案——现在它正在进入欧洲。
mRNA 体外选择的高通量测序...
诺贝尔化学奖。体外选择对物理生物化学特别有吸引力，因为它能够仔细控制选择环境，从而能够探测各种现象，包括分子相互作用、折叠行为和进化途径。在体外选择过程中，具有所需特性的功能分子从大量随机（或半随机）序列中分离出来。这是通过选择、扩增和诱变的迭代循环实现的，直到最终的池中富含表现出所需特性的变体（图 1）。虽然体外选择通常应用于核酸，但当与肽展示技术相结合时，可以识别感兴趣的功能肽。特别是，mRNA 展示被广泛用于此目的，这将是本期观点的重点。
