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World File Search System可有可无
来自葡萄球菌基因组的强效 CRISPR-Cas9 抑制剂
抗 CRISPR (Acrs) 是抑制 CRISPR-Cas 酶的 RNA 引导 DNA 靶向活性的小蛋白。Acrs 由噬菌体和噬菌体衍生的细菌基因编码，可阻止 CRISPR 介导的噬菌体感染抑制，还可以阻止真核细胞中 CRISPR-Cas 介导的基因组编辑。为了确定能够抑制金黄色葡萄球菌 Cas9 (SauCas9)（最常用的基因组编辑蛋白化脓性链球菌 Cas9 (SpyCas9) 的替代品）的 Acrs，我们使用了自靶向 CRISPR 筛选和关联基因组搜索策略。在这里，我们描述了三种有效的 SauCas9 抑制剂，我们将其命名为 AcrIIA13、AcrIIA14 和 AcrIIA15。这些抑制剂具有一个保守的 N 端序列，该序列对于 DNA 切割抑制是可有可无的，并且具有不同的 C 端，在每种情况下，这些 C 端都是抑制 SauCas9 催化的 DNA 切割所必需的。在人类细胞中，我们观察到 AcrIIA13 对 SauCas9 诱导的基因组编辑具有强烈的抑制作用，而 AcrIIA14 和 AcrIIA15 则具有中等程度的抑制作用。我们还发现 AcrIIA13 – AcrIIA15 的保守 N 端结构域与这些 Acr 基因启动子中的反向重复序列结合，这与其预测的螺旋-转角-螺旋 DNA 结合结构一致。这些数据证明了一种有效的 Acr 发现策略，并确立了 AcrIIA13 – AcrIIA15 作为 SauCas9 的独特双功能抑制剂。
抗有丝分裂药物 PTC-028 和 PTC596 在多发性骨髓瘤临床前模型中表现出强效活性，但对 BMI-1 作为必需肿瘤基因的作用提出了质疑
多发性骨髓瘤 (MM) 治疗的未来进展需要表征该疾病的主要驱动因素，并采用新颖的创新方法来解决这些弱点。本研究重点关注一种新型药物 BMI-1 调节剂在 MM 中的临床前评估。我们在一系列体外和体内模型（包括耐药性和基质支持模型）中证明了 PTC-028 和 PTC596 的强效活性。用 PTC-028 和 PTC596 治疗 MM 细胞会下调 BMI-1 蛋白水平，发现这与药物活性相关。令人惊讶的是，BMI-1 对 BMI-1 调节剂的活性和 MM 细胞生长是可有可无的。我们的数据表明，有丝分裂停滞伴有髓细胞白血病-1 (MCL-1) 丢失是关键的抗 MM 机制，并揭示了由于 BMI-1 调节剂治疗导致 MYC 和 AKT 信号传导活性受损。此外，我们在 5TGM.1 体内模型中观察到 PTC596 治疗后 MM 完全消除，并将表观遗传化合物和 B 细胞白血病/淋巴瘤 2 同源域 3 (BH3) 模拟物定义为有希望的组合伙伴。这些结果对 BMI-1 作为必需 MM 基因的假定作用提出了质疑，并证实 BMI-1 调节剂是有效的抗有丝分裂剂，具有令人鼓舞的临床前活性，支持其快速转化为临床试验。
内分泌学杂志 - Bioscientifica
雄激素在斑马鱼雄性生殖发育和功能中的作用尚不清楚。为了研究这个主题，我们使用 CRISPR/Cas9 生成 cyp11c1（11 β-羟化酶）突变斑马鱼品系。我们的研究证实了最近发表的关于另一种 cyp11c1 − / − 突变斑马鱼品系的发现，并报告了 Cyp11c1 功能丧失导致的表型的新方面。我们报告称，Cyp11c1 缺陷斑马鱼主要表现出雌性第二性征，但可能拥有卵巢或睾丸。此外，我们观察到 cyp11c1 − / − 突变雄性斑马鱼严重缺乏雄激素和皮质醇。这些结果进一步证明，雄激素对于斑马鱼睾丸的形成是可有可无的，正如之前在雄激素缺乏和雄激素抗性的斑马鱼中证实的那样。在此，我们显示 cyp11c1 − / − 突变斑马鱼的睾丸表现出混乱的管状结构；并且首次证明连接睾丸和泌尿生殖口的精索管在雄激素缺乏的斑马鱼中严重发育不全。此外，我们还显示 cyp11c1 − / − 突变斑马鱼的精子发生和特征性繁殖行为受损。在 Cyp11c1 缺陷的斑马鱼的睾丸中，A 型精原细胞标记物 nanos2 的表达显著增加，而精子发生后期阶段的标记物的表达显著降低。这些观察结果表明在斑马鱼中，A 型精原细胞的产生不依赖于雄激素，但 A 型精原细胞的分化是一个依赖雄激素的过程。总体而言，我们的结果表明，虽然雄激素不是睾丸形成所必需的，但它们在决定第二性征、曲细精管的正确组织和男性生殖细胞的分化方面发挥着重要作用。
系统基因组学和基因组注释
基因组注释是一项具有挑战性的工作，其目的不仅是描述蛋白质编码和非编码基因目录，还包括参与基因表达调控、维持基因组完整性和跨代基因组传递的其他功能元件。最近的技术发展通过提供转录、翻译、染色质状态和三维构象等的大规模评估，极大地改进了注释过程。因此，可以轻松获得各种生化活动的全基因组图谱。然而，生化活性并不等同于生物功能，许多活性基因组元件实际上可能是可有可无的。基因组编辑技术可以更直接地测试生物功能，但仍然成本高昂、耗时，并且在很大程度上局限于可以在实验室中观察到的表型。在这种情况下，进化方法对于功能基因组注释来说是一项重要的资产，它可以识别在净化选择下保留现有功能的基因组区域，或在获得新生物学角色后在正向选择下保留的基因组区域。虽然进化分析无法确定精确的生物学功能，但它们可用于测试多个层面的功能，通过评估对初级 DNA 或 RNA 序列、二级 RNA 结构、转录水平或模式、转录因子结合位点等的选择压力。。。在这里，我回顾了系统基因组学方法对基因组注释的已证实和潜在贡献，重点关注如何将这些方法与分子生物学和遗传学的见解相结合，以提供功能基因组景观的全面图像。
凯恩斯与经济学
对凯恩斯来说，人是异质的——每个人的处境不同，每个人都有不同的品味、不同的能力和不同的信仰。然而，他们却组成了一个社会。将我们的推理从个体互动延伸到整个经济是误导。它犯了一种合成谬误。对于个人来说，从新奥尔良到巴吞鲁日最快的路线是 10 号州际公路；但这并不是让整个新奥尔良人到达巴吞鲁日的最快路线。经济学中的一个关键合成谬误是将基本交换错误地类比为整个经济。鲁滨逊·克鲁索面临着一个微观经济问题：如何利用稀缺资源做到最好。星期五的出现带来了一个新的但仍然是微观的经济问题。克鲁索和星期五不同的技能和不同的禀赋促成了互利的贸易，他们失业的唯一理由就是想享受睡眠、吃饭或游泳。相比之下，宏观经济学关注的是整个经济，比如星期五的部落，或者对凯恩斯来说，曼德维尔在《蜜蜂寓言》中抱怨的蜂巢。林肯航海家轿车或木兰烧烤餐厅的晚餐是一种可有可无的奢侈品，但如果我们中有足够多的人放弃这种奢侈品，汽车工人和餐馆服务员就会没有晚餐：“明天的同性恋者是绝对不可或缺的，为今天的坟墓提供了存在的理由”（凯恩斯[1936] 1973，105-6）。与鲁滨逊和星期五不同，复杂经济中的工人可能会失业；经济可能会以低于满负荷运转。凯恩斯敏锐地意识到，经济的复杂性取决于货币制度，它使我们能够从我们永远不会认识的人那里获得商品，他们过着我们难以想象的生活，在我们永远看不到的地方。鲁滨逊和星期五可能很自私，但从某种意义上说，他们显然是为彼此工作的。如果他们储蓄，他们就通过积攒储备来储蓄。我们也为彼此工作，但只是间接地。直接地，我们是为了钱而工作。当我们储蓄时，我们就是省钱，而不是要求别人工作。我节制消费导致别人收入损失，他节制消费导致别人收入损失……等等，这个过程就是凯恩斯著名的支出乘数。乘数
2024 - 2026 年客户体验 (CX) 战略
简介和目的 我们的第一个客户体验战略的总体目的是制定一个框架来提供 One Manchester 的客户体验 (CX)，并在整个企业中嵌入客户至上的方法，将 CX 作为服务交付的核心，也是所有同事的责任。除了 One Manchester 成为真正以客户为先的组织、提供一流服务的愿望之外，该战略还考虑到我们必须在日益严格的监管和立法方面实现的目标。CX 是客户在与我们的每次互动中形成的一种对 One Manchester 的看法；它是客户在任何交易活动之外对我们的感受。CX 战略将确保这是我们提供的一切的核心，而不仅仅是“可有可无”的东西。如果不了解 CX，服务设计和服务交付可能会导致服务交付不佳、服务盲点和服务成本增加。了解并改进我们的 CX 可带来诸多积极效益，包括更加全面的服务、提高客户满意度 (CSAT)、减少投诉/投诉升级、降低客户工作量以及通过增加信任来提高参与度。我们在一个充满挑战的环境中运营。我们的客户仍然受到生活成本的影响，所有行业的客户满意度在过去 12 个月中都有所下降，但我们认为 CX 远不止“客户服务”；CX 的价值来自于确定影响整体客户体验的客户关键期望。设计和调整服务以确保满足这些期望，可以始终如一地为客户和组织带来价值。CX 是 One Manchester 每一位同事的责任，战略的成功依赖于所有同事的认同。从历史上看，CX 一直被视为由少数同事执行的一项独立职能，而不是他战略旨在解决的我们所做的一切工作不可或缺的一部分。我们承认，我们正处于客户体验之旅的起步阶段，需要与客户合作，共同创造客户想要的 CX，但我们确实从各种来源获得了丰富的见解，并将其融入关键战略原则
胶原蛋白 X 对于人类 iPSC 衍生软骨细胞的肥大性分化和软骨内骨化而言并非必不可少
摘要 X 型胶原蛋白是一种由肥大性软骨细胞产生的非纤维胶原蛋白，被认为与生长板软骨的钙化过程有关。然而，小鼠中 Col10a1 基因的纯合缺失对生长板形成或骨骼发育无显著影响。为了研究 X 型胶原蛋白在人类软骨细胞中的作用，我们使用双 sgRNA CRISPR/Cas9 系统建立了具有杂合（COL10A1 + / ）或纯合（COL10A1 / ）COL10A1 基因缺失的人类诱导多能干细胞 (hiPSC)。建立了几个突变克隆，并通过先前报道的 3D 诱导方法将其分化为肥大性软骨细胞。亲本与突变细胞系在分化过程中无明显差异，均分化为具有肥大性软骨细胞特征的细胞，提示X胶原蛋白对于人软骨细胞体外肥大性分化而言并非必不可少。为探究X胶原蛋白缺乏对体内的影响，将增殖期或肥大前期的软骨细胞颗粒移植到免疫缺陷小鼠体内。增殖期颗粒衍生组织显示软骨细胞呈带状分布，并转变为模拟生长板的骨组织，且骨的比例在 COL10A1 / 组织中趋于较大。肥大前期颗粒衍生组织产生具有软骨内骨化特征的骨小梁结构，亲本与突变体衍生组织之间无明显差异。对处于肥大期的软骨细胞颗粒进行转录组分析显示，与亲本细胞颗粒相比，COL10A1 / 颗粒中增殖期基因表达较低，钙化期基因表达较高。这些体外和体内数据表明，胶原蛋白 X 对于人类 iPSC 衍生软骨细胞的肥大分化和软骨内骨化是可有可无的，尽管它可能促进分化过程。因此，COL10A1 / iPSC 系可用于研究胶原蛋白 X 在软骨细胞分化中的生理作用。© 2023 作者。JBMR Plus 由 Wiley Periodicals LLC 代表美国骨矿研究学会出版。