用高吞吐量测量单细胞密度可以使免疫细胞和药物1的动态分析2 Weida Wu 1,2,Sarah H. Ishamuddin 1,Thomas W. Quinn 3,4 3,4,Smitha Yerrum 3,4,Smitha Yerum 3,4,Ye Zhang 1,Ye Ye Zhang 1,Ye Ye Ye Zhang 1,Yedie L. DeBaiz 5,3 pei-lun karie arie karie 3,4,du un kao 3,4,4,4,4,4 ,4,; Murakami 5 , Morvarid Mohseni 6 , Kin-Hoe Chow 3,4 , Teemu P. 4 Miettinen 1 , Keith L. Ligon 3,4,7,8,9,* , Scott R. Manalis 1,2,7,10,* 5 6 1 Koch Institute for Integrative Cancer Research, Massachusetts Institute of Technology, 500 Main St building 76, Cambridge, MA 02139, USA.7 2马萨诸塞州理工学院生物工程系,21 Ames ST#56-651,剑桥,马萨诸塞州02139,美国。然而,现有的密度测量缺乏21个精度或吞吐量,无法量化细胞状态的细微差异,尤其是在主要样本中。22在这里,我们提出了一种方法,可以通过将荧光排除显微镜与悬浮的24个微通道谐振器进行整合,以0.03%(0.0003 g/ml)的精度为0.03%(0.0003 g/ml)的密度。将这种方法应用于人淋巴细胞时,我们发现细胞25密度及其变化随着细胞从静止状态过渡到增殖状态而降低,26表明分子拥挤的水平会降低,并在进入细胞周期时受到更高的调节。使用胰腺癌患者衍生的异种移植模型,我们发现原发性肿瘤细胞对药物治疗的EX 28体内密度反应可以预测体内肿瘤生长29反应。45 46测量细胞密度的主要挑战是获得高采样吞吐量以及高47精度。8 3患者衍生模型中心,达纳 - 法伯癌症研究所,美国马萨诸塞州波士顿伯灵顿大街21号,美国马萨诸塞州02215,美国9 4病理学系,达纳 - 法伯癌症研究所,哈佛大学450 Brookline Avenue,波士顿,波士顿,波士顿,马萨诸塞州马萨诸塞州02215 02215, USA 11 6 Oncology Discovery, Bristol-Myers Squibb, 250 Water St, Cambridge, MA 02141, USA 12 7 Broad Institute of Harvard and MIT, 415 Main St, Cambridge, MA 02142, USA 13 8 Department of Pathology, Brigham & Women's Hospital, Harvard Medical School, 75 Francis St, Boston, MA 02215, USA 14 9 Department of Pathology,波士顿儿童医院,哈佛医学院,马萨诸塞州波士顿朗伍德大街300号,美国马萨诸塞州02115,美国15 10 Massachusetts理工学院机械工程系,马萨诸塞州33 Massachusetts Ave,Masbridge,MA 02139,USA,美国16 17 *通讯作者Keith_ligon@dfci.harvard.eduuuse; srm@mit.edu 18 19细胞密度,细胞质量与体积的比率是分子拥挤的指标,因此是细胞态和功能的20个基本决定因素。我们的方法揭示了细胞状态过渡30期间分子拥挤的意外行为,并将密度作为功能精确药物的新生物标志物。31 32 33细胞密度取决于细胞的干质量组成和水的细胞体积的比例,34反映其分子拥挤水平。尽管细胞质量和体积在增殖的35个细胞中可能会变化高达50%,但细胞密度受到严格调节,以保持最佳的分子拥挤水平1,2,3。使用流线型的音量传感单元,可以实现63环境36提示,例如养分耗竭和渗透压变化会改变分子拥挤,37个通过改变扩散率和蛋白质构象1,4,5来影响细胞生物化学。38个拥挤水平和细胞生理学之间的耦合使细胞密度成为表征基本细胞39过程的关键,例如增殖,凋亡,代谢转移和分化1,3,指出了其潜在的40个生物标记物,用于细胞适应性和药物反应。对细菌和酵母41等单细胞生物的研究报告说,在42种增殖和休眠之间的细胞状态过渡过程中,分子拥挤水平显着变化,并且人们认为密度被认为急性地反映了这些过渡5-8。在原发性哺乳动物细胞中是否存在密度和增殖之间的这种43连接尚不清楚,部分原因是44归因于现有密度测量方法的局限性。传统的梯度离心方法在人口水平上评估细胞密度,但速度为48,需要大量样本量,这限制了它们用于研究瞬态生物学过程的使用。单49个细胞测量结果揭示了人群内细胞密度的异质性,从而深入了解了密度50调节。磁悬浮方法通过平衡细胞的重力来确定单细胞的密度,而51浮力培养基9,10施加的浮力。方法检测干质密度(总数超过52体积的干质量),例如定量相显微镜(QPM)或与细胞体积53测量相结合的拉曼成像,提供替代密度测量值11,12,13,14,15,16。尽管这些方法提供了54个亚细胞分辨率和单细胞跟踪,但在测量细胞密度时,迄今为止使用哺乳动物细胞发表的实验含有55米至数百个单细胞。悬浮的微通道谐振器(SMR)56是一种微流体质量传感器,已用于通过测量两种类型的流体中的57个细胞的57个质量来测量单细胞密度,具有不同的密度为17,18-20。但是,这种方法的吞吐量为58限制为每个实验几百个单元,因为它要求细胞在两种类型的59种流体中进行顺序测量。60 61 SMR和QPM设备已经达到了每62个实验21-23的数十万个单元的吞吐量。
摘要电池/超级电容器(SC)混合储能系统(HESS)在近年来由于混合系统而广泛应用于电动汽车(EV),该系统结合了两种设备的好处。本文提出了电池/SC HESS的自适应电源分配方案,以根据其存储的能量和负载电流最大化SC的使用情况。在方法中,使用自适应算法开发低通滤波器,以计算合适的截止频率,以分配电池和SC之间的功率需求。该方法可以调整截止频率,但不能更改控制系统的结构,因此其简单实现和稳定性的原始属性不会受到影响。全面的仿真研究验证了电池/SC HESS中提出的自适应发电方案的有效性,并使用Lyapunov方法进一步验证了其稳定性。结果表明,自适应方法的性能优于传统控制系统,在操作过程中,电池能量吞吐量降低了20%–40%,并且可以根据SC的能量能力来调整HESS的动态响应,以进一步提高系统效率。已验证了建议的自适应发电计划,能够在电动汽车应用程序中延长HESS系统的使用寿命。
摘要:随着元信息开始发现工业应用,有必要开发可扩展且具有成本效益的制造技术,这些技术可提供低于100 nm的分辨率,同时提供高吞吐量和较大的面积图案。在这里,我们证明了使用UV纳米印刷光刻和深层反应离子蚀刻(Bosch和低温)的使用。可靠的过程,用于制造高模式有限的硅矩形支柱。证明了结构的质量,跨表镜的质量,这些镜头表明了衍射有限的聚焦,并接近NIR波长λ∈(1.3 µm,1.6 µm)的理论效率。我们演示了一个过程,该过程消除了博世过程的特征性侧壁表面粗糙度,从而使90度垂直侧壁光滑。我们还证明,在Bosch侧面表面粗糙度(或45 nm的压痕(或扇贝))的情况下,元表面镜头的光学性能不会受到不利影响。为实现全晶片覆盖而定义了下一步的开发步骤。
在一种方法中,MS 1完全扫描和基于PRM的实验均以量化小鼠粪便样品中的胆汁酸,旨在提高注释率和准确的定量。基于RP-LC的方法表现出较高的灵敏度(对于大多数分析的胆汁酸,柱上的LOQ 12.7 fmtololes)和一个线性动态范围,跨越了5个数量级,图6A。同位素标记的胆汁酸被用作内部标准标准(IS),以确保精确的定量并评估数据质量,可靠性和测量鲁棒性,并评估了保留时间,质量准确性和信号响应等指标。最小的色谱移动和一致的信号响应,这是样品重复的变化系数较低,而在整个采集期间,所有内部标准均始终达到可再现的峰面积,图6B。
具有工程背景的本科生将有助于实施新的平台功能。原型设备是一种能够将单个细胞分配到基板上以准备测序的喷墨jet射手。TS1将有机会与工程博士生一起工作,以支持设备计算元素的实现。TS1将有助于提高机器学习能力,例如在捕获和标记培训数据和实施不同的神经网络体系结构中。目标是提高系统的当前功能以及扩展分类类别(例如细胞与样品中细胞外碎片的分化)。TS1将有机会使用不同的机器
在本应用注释中,我们展示了如何进一步用于净化质粒DNA和PCR产物,这是体外转录的mRNA生成工作流程的第一步。为此,我们收集了一种大型细菌培养物,该培养物包含质粒DNA,含有多功能相关的转录物靶基因lin28a,该基因在ShakerInnova®S44I中生长。转子R9A2用于细菌3 L(2 x 1.5 L)的细菌培养物。使用转子R15A的组合形成了从一个1.5 L瓶(1500pp瓶)获得的整个细菌颗粒的DNA纯化,该组合可容纳高达10 x 50 ml和10 x 15 ml,以及可容纳最多可容纳30 x 2 ml的转子R22a4。由于其高容量,这种组合允许旋转数量减少。最后,我们表明高质量的转录过程可以通过体外转录(IVT)5,6来促进mRNA。
使用加速吞吐量包(ATP)升级Nexsys®TPPL电池,以提高充电性能和热管理。此可选升级可提高能量吞吐量能力,以帮助您的设备在高批量应用中的生产力。
可以根据吞吐量和单一排放因子进行简单估算。但在大多数情况下,可能会有更详细的信息,应采用 SNAP 代码 40100 下的《联合 EMEP/CORINAIR 指南》(1996 年)或此处以下部分中概述的更详细方法。这考虑了炼油厂中发生的实际过程以及原油和产品的吞吐量。虽然排放率取决于炼油厂的具体工艺和设备、其维护状态以及原油的含硫量,但可以仅根据原油吞吐量和简单排放因子进行非常简单的估算。默认排放因子如表 1-65 所示。
该实验的结果证明了Liteq 500工具在置换和旋转中检测,测量和纠正大偏移的能力,在与当前工业标准保持一致的同时,提供了亚微米的准确性。分析表明,可以通过优化对齐过程来实现吞吐量的重大改进。计划进行其他实验,以验证覆盖性能,并在Liteq 500上使用重建晶片进行叠加诊断的能力。初步估计表明,当覆盖要求不太严格时,可以实现更快的吞吐量。在未来的工作中,我们计划研究当前FO-WLP过程中所需的覆盖精度级别可实现的吞吐量。
使用Proteome Discoverer 3.2软件和Sequest®HT搜索算法进行数据分析。肽的修饰包括用于HELA的氨基甲基甲基化(C)的动态修饰,用于蛋白质混合物的羧甲基化(C),TMTPRO标签(N-末端,K)和MET氧化。FDR阈值在渗透剂节点中设置为1%,以识别肽和蛋白质鉴定的高置信度。在报告基因离子量化器节点中指定了11 ppm的记者离子峰积分耐受性,并使用新的集成的报告频道控制通道范围的范围范围范围进行了剥离和非剥离的控制通道,对剥离和非置换通道组的归一化进行了归一化。