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World File Search System外植体
慢性，可重复使用的，多日神经质子录音在自由移动操作行为中
抽象的电生理记录是检查认知和行为的神经元底物的强大技术。神经蛋白探针提供了独特的能力，可以在许多具有高时空分辨率的大脑区域捕获神经元活动。神经质子也很昂贵且针对急性，固定的使用，这两者都限制了可以研究的行为和操纵的类型。最近的进步通过显示了慢性植入物，植物和神经质子探针的再利用来解决成本问题，但是这些方法尚未优化用于自由移动行为。有特定的需要改善电缆/连接稳定性。在这里，我们扩展了这项工作，以演示在完全自由移动的操作行为期间，在大鼠模型中演示慢性神经偶像记录，外观和重复使用。类似于先前的方法，我们将探针和媒体置于3D打印的外壳中，该外壳避免了将探针直接固定到头骨上的直接固定，从而实现了最终的外植体。我们展示了创新，以允许对环境因素的保护和更稳定的布线设置进行慢性逆流联系，以减少可能中断记录的张力。我们以执行两种不同行为任务的大鼠的方式来统治这种方法，在每种情况下显示：（1）在操作室中自由移动大鼠中的慢性单或双探针记录，（2）神经偶像可重复使用1.0探针1.0探针在回收后持续良好的单单单位产量持续良好的单一单位产量持续良好。因此，我们证明了在更广泛的物种和制剂范围内的神经偶像记录的潜力。
重复使用抗生素的病史导致微生物群 -
摘要的最新证据表明，重复使用的抗生素使用降低了微生物的多样性，并最终改变了肠道微生物群社区。然而，重复（但不是最近）抗生素使用对微生物群介导的粘膜屏障功能的生理影响在很大程度上尚不清楚。通过从深层表型的爱沙尼亚微生物组队列（ESTMB）中选择人类，我们在这里利用人类对小鼠的粪便微生物群移植来探索反复使用抗生素对肠道粘液功能的长期影响。虽然健康的粘液层可以保护肠上皮层免受感染和炎症的影响，但使用可行的结肠组织外植体的离体粘液功能分析，但我们表明，与健康对照组相比，与健康对照组相比，具有反复使用抗生素的人的史微生物群会降低粘液生长速率，并增加了粘液渗透率。此外，shot弹枪元基因组测序鉴定出抗生素形的微生物群落中的微生物群的明显改变，其中包括已知的粘液氧化细菌，包括粘膜粘膜粘膜粘膜和细菌菌属和细菌，脆弱的脆弱性脆弱的脆弱性，占主导地位。改变的菌群组成进一步以独特的代谢产物特征，这可能是由差异粘液降解能力引起的。因此，我们的概念证明研究表明，人类中的长期抗生素使用可能会导致微生物群落改变，该群落降低了肠道中保持适当粘液功能的能力。
利用 CRISPR 敲除八氢番茄红素去饱和酶基因
在新型植物育种技术 (NPBT) 中，CRISPR/Cas9 系统是用于靶基因编辑的有用工具，可快速改良植物的性状。该技术允许同时靶向一个或多个序列，以及通过同源定向重组引入新的遗传变异。然而，CRISPR/Cas9 技术对于某些多倍体木本植物来说仍然是一个挑战，因为必须同时靶向需要突变的所有不同等位基因。在这项工作中，我们描述了改进的方案，使用农杆菌介导的转化将 CRISPR/Cas9 系统应用于高丛蓝莓 (Vaccinium corymbosum L.)。作为概念验证，我们靶向编码八氢番茄红素去饱和酶的基因，该基因的突变会破坏叶绿素的生物合成，从而可以直观评估敲除效率。离体培养的蓝莓 cv. 的叶片外植体。 Berkeley 已用 CRISPR/Cas9 构建体进行转化，该构建体包含两个针对 pds 两个保守基因区域的向导 RNA（gRNA1 和 gRNA2），随后在富含卡那霉素的选择培养基中维持。在选择培养基中培养 4 周后，分离出卡那霉素抗性株系，并通过 Sanger 测序对这些株系进行基因分型，结果显示基因编辑成功。一些突变株系包括白化表型，即使两种 gRNA 的编辑效率都很低，gRNA1 的编辑效率在 2.1% 到 9.6% 之间，gRNA2 的编辑效率在 3.0% 到 23.8% 之间。这里我们展示了一种非常有效的高丛蓝莓商业品种“伯克利”的不定芽再生协议，以及在 Vaccinium corymbosum L. 中使用 CRISPR/Cas9 系统的进一步改进，为通过生物技术方法介导的育种开辟了道路。
个人，集体，文化和社会结构因素
灯具从荧光灯向发光二极管（LED）的过渡促使植物生物技术中的当前实践重新评估。农业 - IUM介导的转化对于大豆（甘氨酸最大）中的基因工程和基因组编辑至关重要。大豆转化的临界共培养步骤发生在光条件下。当前用于大豆转化中共培养的方案缺乏光强度的标准。在本研究中，目的是研究共培养过程中光强度对大豆转化效率的影响。在共培养的五天内实现了五种光强度：50、100、150、190μmol m-2 s-1的白色LED之外，除了荧光100μmolm-2 s-1外。共培养后，所有外植体在均匀条件下以选择压力，生根和适应性进行了芽感应和伸长。分别使用两个可选标记HPPDPF-4PA和BAR进行了实验，研究了潜在的光效应是否由于标记相关途径而变化。植根于体外植物的阳性PCR分析，在两个可选标记物中都在所有光处理中都达到了成功的转化事件，范围为2.4％至6.9％。在共同培养过程中增加LED光强度会导致两个可选标记之间的不同转化效率。在亮舌蛋白选择下的处理中未检测到转化效率的差异。结果表明，在共培养过程中增加光强度导致芽再生在4-羟基苯基 - 丙酮酸二氧酶（HPPD）抑制剂的选择下的变化效率。此外，当使用HPPD抑制剂发生选择时，在100μmolm-2 s-1处的荧光光和白色LED之间也观察到转化效率的变化。结果突出了研究光对转化效率的影响的智能和潜在应用。
比较转录组和功能分析提供了有关调节Highbush Blueberry
建立有效的植物再生系统是植物基因工程技术的关键先决条件。然而，再生率在基因型之间表现出很大的差异，并且基本的芽再生能力的关键因素在很大程度上难以捉摸。蓝莓叶外植体在富含细胞分裂素的培养基上培养的蓝莓叶植体没有明显的愈伤组织形成，表现出直接的射击器官，这有望加快遗传转化，同时最大程度地减少培养过程中的体细胞突变。这项研究的目的是阐明在Highbush蓝莓（vacinium corymbosum L.）中控制品种特异性芽再生潜力的分子和遗传决定因素。我们使用两种Highbush蓝莓基因型进行了比较转录组分析：“蓝色松饼”（“ BM”）显示出高再生速率（> 80％）和“ O'Neal”（“ ON”），其再生速率低（<10％）。发现揭示了许多与生长素相关基因的差异表达。值得注意的是，与“ ON”相比，“ BM”表现出更高的生长素信号基因表达。在拟南芥中涉及分生组织形成的转录因子的蓝莓直系同源物之间，芽再生的表达（VCESR）（VCESR），VCWUSCHEL（VCWUS）（VCWUS）和VCCUP形状的共叶叶叶2.1在“ BM”中相对于“ BM”的表现明显更高。生长素的外源应用促进了再生以及VCESR和VCWUS表达，而生长素生物合成的抑制产生了相反的作用。在“ BM”中的VCES过表达通过激活细胞分裂素和生长素相关基因的表达，在无植物激素条件下促进了芽的再生。这些发现为蓝莓再生的分子机制提供了新的见解，并对增强植物再生和转化技术具有实际意义。
细胞疗法
最受过临床试验的细胞，间充质基质细胞（MSC）现在已知主要通过包括外泌体的旁分泌分泌发挥其治疗活性。为了减轻对MSC外泌体制备的可伸缩性和可重复性的潜在调节问题，使用高度表征的MYC降低的单克隆细胞系产生MSC外泌体。这些细胞不会在无胸腺裸鼠或表现出与锚固无关的生长中形成肿瘤，并且它们的外泌体不携带MYC蛋白或促进肿瘤生长。与腹膜内注射不同，MSC在IMQ诱导的牛皮癣的小鼠模型中的局部应用减轻了白介素（IL）-17，IL-23和末端组合复合物，C5B9在牛皮乳肌皮中。应用于人类皮肤外植体时，从共价标记的荧光MSC外泌体的荧光渗透并持续在角质层中，大约24小时，而从角质层中忽略不计，将其从角膜层中忽略不计。作为牛皮癣的角膜层的特征在于活化的补充和Munro微鳞片，我们假设局部施用的外泌体渗透到牛皮癣的角膜层以抑制C5B9补体通过CD59抑制CD59，并且这种抑制作用抑制了中性粒细胞粒细胞的IL IL-17。与此相一致，我们证明了C5B9在纯化的人类嗜中性粒细胞诱导的IL-17分泌上的组装，MSC外泌体使这种诱导构成了这种诱导，这又被中和中和的抗CD 59抗体所消除。因此，我们确定了通过局部应用外泌体缓解银屑病IL-17的作用机理。由Elsevier Inc.出版©2023国际细胞和基因治疗学会。这是CC BY-NC-ND许可（http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/）下的开放访问文章
体内哺乳动物干细胞中的G1/s转变自主受细胞尺寸的自主调节
＃相应的作者隶属关系：1联合和结缔组织疾病生物化学的部门，德国乌尔姆大学骨科系，骨科系：骨关节炎，鼻溶治疗，鼻溶治疗，衰老，衰老，dasatinib，dasatinib，dasatinib，dasatinib，dasatinib，dasatinib，dasatinib，烟素，槲皮素，脊髓素，小节型与老年人的相关性是扮演的较高的娱乐性，该效果是扮演的较高的病原体，是扮演较大的疾病，是扮演的较高的病原体，并且是缺陷的作用。骨关节炎（OA）。基于此，我们使用dasatinib（d）和槲皮素（Q）（Q）测试了鼻溶性组合疗法（Q），对年龄的人类关节软骨细胞（HAC）以及在OA影响的软骨组织（OARSI 1-2级）中测试了鼻溶治疗。用D+Q刺激在软骨外植体和孤立的HAC中选择性地消除了衰老细胞。此外，该疗法显着促进了软骨代谢，如COL2A1，ACAN和SOX9的基因表达水平增加，以及II型胶原蛋白II型和糖胺聚糖生物合成的升高所证明。此外，D+Q处理显着降低了SASP因子的释放（IL6，CXCL1）。RNA测序分析表明，合成代谢因子Inter，Inter，FGF18，IGF1和TGFB2的上调，以及对细胞因子和YAP-1信号传导途径的抑制作用，并解释了在治疗后软体动物促进的基础机制。因此，用D+Q处理的细胞的条件培养基对未处理的HAC刺激，同样诱导了软骨的表达。详细的分析表明，软骨代谢作用主要归因于dasatinib，而槲皮素或Navitoclax的单疗法应用并未促进软骨代谢。总体而言，D+Q治疗恢复了OA HAC中的软骨表型，最有可能通过减少SASP因子和增长因子上调来创建亲核代谢环境。因此，这种鼻溶性方法可能是一种有前途的候选者，可以作为一种疾病修饰骨关节炎药物。
2024年东南化学生物学和药物发现...
迫切需要具有增强效力和特异性的新型抗病毒药物来治疗水痘带状疱疹病毒 (VZV) 和单纯疱疹病毒 (1 和 2) 感染。L-BHDU（β-L-1-[5-(E-2-溴乙烯基)-2-(羟甲基)-1,3-(二氧杂环戊烷-4-基)]尿嘧啶）在培养细胞和人源化 SCID 小鼠中对水痘带状疱疹病毒 (VZV) 具有高度活性。此外，L-BHDU 对 HSV1 也具有高度活性，对 HSV2 具有中等活性（EC 50 7 µM）。我们采用前药方法合成了带有双（新戊酰氧甲基）基团的单磷酸盐前药 POM-L-BHDU-MP，以提高其药理特性，同时保留抗病毒活性（VZV EC 50 0.04 µM；HSV1 EC 50 0.03 µM；CC 50 >100 µM）。在体内实验中，我们在皮肤器官培养物和小鼠中评估了 POM-L-BHDU-MP 对抗 VZV 和 HSV1 的作用，并研究了其药代动力学和分布特性。可可脂中的 POM-L-BHDU（0.2% 顶部）可防止 VZV 或 HSV1 扩散，并且对人体皮肤外植体无毒。在 NuSkin 小鼠模型中，POM-L-BHDU-MP 可减少经皮下和口服途径的 VZV 扩散（45、22.4、11.3 mg/kg）并且耐受性良好。在 BALB/c 小鼠皮肤侧腹模型中，POM-L-BHDU-MP（22.4 mg/kg 口服）减轻了 HSV1 引起的体重减轻，更多研究正在进行中。给小鼠口服或静脉注射 POM-L-BHDU-MP，然后用 LC-MS/MS 分析其血浆和器官。POM-L-BHDU-MP 迅速转化为 L-BHDU，口服生物利用度高。血浆中的 L-BHDU（22.5 mg/kg 口服）达到 C max 为 10 ± 2.5 µg/mL，T max 为 0.85 小时；半衰期为 5-6 小时。L-BHDU 分布在小鼠器官中，包括大脑和脑脊液。 L-BHDU 的磷酸化代谢物在未感染的小鼠中是痕量的，而 L-BHDU 的二磷酸盐和三磷酸盐形式在 VZV 感染的人类皮肤异种移植中为 30-50 µM，超过了 EC 90 。总体而言，POM-L-BHDU-MP 是 L-BHDU 的强效前药，是一种有前途的核苷酸类似物，可用于治疗 VZV 和 HSV1 感染。
2024东南化学生物学和药物发现...
迫切需要具有增强效力和特异性的新抗病毒药物来治疗水痘带状疱疹病毒（VZV）和单纯疱疹病毒（1＆2）感染。l-bhdu（β-L-1- [5-（E-2-溴叶烯基）-2-（羟甲基）-1,3-（二恶英-4-基）] uracil在培养的细胞和人型scid小鼠中对Vericella Zoster病毒（VZV）具有高度活性。此外，L-BHDU对HSV1也具有很高的活性，并且对HSV2（EC 50 7 µM）表现出了中等活性。使用前药方法，我们将单磷酸前药POM-L-BHDU-MP与BIS（Pivaloyloxymethyl）组合成，以改善其药理性能，同时保留抗病毒活性（VZV EC 50 0.04 µM; HSV1 EC 50 0.03 µm; HSV1 EC 50 0.03 µm; CC 50> 100> 100> 100> 100> 100> 100 µm）。在体内，对皮肤器官培养物和小鼠的VZV和HSV1评估了POM-L-BHDU-MP，并研究了药代动力学和分布性能。pom-l-bhdu（顶部为0.2％）可以防止VZV或HSV1扩散，并且对人皮外植体无毒。在Nuskin小鼠模型中，POM-L-BHDU-MP通过皮下和口服路线（45、22.4、11.3 mg/kg）降低了VZV扩散，并且耐受性良好。在BALB/C小鼠皮肤侧面模型中，POM-L-BHDU-MP（22.4 mg/kg PO）减少了HSV1诱导的体重减轻，并且正在进行更多的研究。小鼠口服或静脉注射POM-L-BHDU-MP，并通过LC-MS/MS分析其血浆和器官。POM-L-BHDU-MP迅速转化为L-BHDU，口服生物利用度很高。l-BHDU（22.5 mg/kg PO）达到10±2.5 µg/ml的C最大为0.85 h；半衰期是5-6小时。 L-BHDU分布在小鼠器官中，包括大脑和脑脊液。L-BHDU的磷酸化代谢产物是未感染的小鼠的痕迹，而L-BHDU的Di-和三磷酸形式为30-50 µm，在VZV感染的人类皮肤异种移植物中，超过EC 90。总体而言，POM-L-BHDU-MP是L-BHDU的有效前药，这是一种可用于治疗VZV和HSV1感染的有前途的核苷酸类似物。
生物技术在花卉特征改变中的作用
Yogita Jureshiya 和 Neel Kusum Tigga 摘要 生物技术有助于创造变异性、保护生物多样性和选择对有吸引力的植物生长至关重要的优良基因型。花卉产业要求观赏植物出现新的性状。然而，大多数观赏植物的遗传信息很少，杂合性很高，这阻碍了育种工作。因此，使用基因工程等生物技术方法提供了一种获得具有改变性状的花朵的不同方法。随着 CRISPR/Cas9 的发展，植物科学开辟了一个新的可能性领域，它在花卉栽培中有着广阔的用途。未来基因组编辑技术的进步将改变观赏植物的市场。传统育种技术和生物技术方法相结合，以改善花卉的颜色、外观和抗病性。关键词：生物技术、杂合性、CRISPR/Cas 9、基因组编辑、抗性介绍在被称为“花卉栽培”的园艺领域，观赏植物和花卉被种植、出售和展示用于商业目的。与大多数其他大田作物相比，商业花卉的单位土地产量潜力更大，从出口角度来看意义重大。由于基因工程扩大了花卉基因库，促进了切花创新品种的开发，全球花卉产业因创新而蓬勃发展。包括 RNAi、CRES-T 和 miRNA 在内的基因沉默方法改变了花朵的特性。与此类似，基因工程可用于解决花卉品质问题，例如花朵的颜色、气味、对生物和非生物胁迫的适应性以及收获后的存活率。转基因切花收获的效益可能会增加。生物技术方法 1. 微繁殖：无病花卉作物的快速繁殖和繁殖早已通过使用组织培养来实现。（Mousavi 等人，2012 年）[7]。基因型、培养基、碳水化合物、生长调节剂、外植体类型等都对组织培养繁殖的有效性有显著影响。 2. 体细胞克隆变异：在愈伤组织不定芽再生过程中，可能会发生体细胞克隆变异。自 20 世纪 70 年代发现体细胞克隆变异以来，其作为品种开发来源的前景一直存在争议。无论争论如何，体细胞克隆多样性确实是花卉栽培作物品种开发的关键因素。这种特定作物组的体外栽培产生的体细胞克隆变体可能是独一无二的，并且可以通过无性繁殖稳定下来。3. 多倍体育种：倍性操作被认为是改善观赏特性和促进育种计划的宝贵工具（Roughani 等人，2017 年）[9]。4. 突变：任何改良农作物的植物育种计划都必须考虑到遗传多样性。诱发突变已被用作产生变异和育种的工具。在所有诱变剂中，伽马射线被广泛有效使用。5. 基因改造：虽然基因改造为开发重要花卉植物的新品种提供了其他途径，但传统育种技术在生产新型花卉方面非常有效。