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深入了解奇异球菌中微生物色素的合成、设计和功能
奇异球菌能够在高辐射、极端温度和干燥等恶劣环境中生存，主要归因于其能产生独特的色素，尤其是类胡萝卜素。尽管这些细菌产生的天然色素数量有限，限制了它们的工业潜力，但代谢工程和合成生物学可以显著提高色素产量，扩大其应用前景。在本研究中，我们回顾了与这些色素相关的关键酶和基因的性质、生物合成途径和功能，并探索了通过基因编辑和优化培养条件来提高色素产量的策略。此外，研究还强调了这些色素在抗氧化活性和抗辐射性方面的独特作用，特别强调了奇异球菌中脱黄素的关键功能。未来，奇异球菌细菌色素将在食品工业、药物生产和太空探索中具有广阔的应用前景，它们可以作为辐射指示剂和天然抗氧化剂，保护宇航员在长期太空飞行中的健康。
伯克霍尔德菌选择性琼脂
伯克霍尔德菌琼脂以 PC 培养基为基础，该培养基最初由 Gilligan 发明。研究发现，这种培养基比麦康凯琼脂更适合伯克霍尔德菌的生长。培养基中的酪蛋白糖和酵母提取物提供碳、氮、长链氨基酸、维生素 B 源和其他必需营养素。结晶紫和抗菌剂用作选择剂。结晶紫和万古霉素可抑制革兰氏阳性球菌，包括肠球菌和葡萄球菌。多粘菌素 B 和庆大霉素等抗生素可抑制革兰氏阴性细菌。伯克霍尔德菌代谢丙酮酸形成碱性终产物。蔗糖和乳糖是可发酵碳水化合物。酚红指示剂在碱性 pH 下从粉橙色变为粉红色。如果出现带有黄色晕圈的绿褐色菌落或被粉红色区域包围的白色菌落，则可能存在伯克霍尔德菌。
技术数据
苯酚红肉汤培养基按照Vera（1）制定，并建议确定碳水化合物的发酵反应以分化微生物（2-4）。推荐FDA BAM（5）。苯酚红色肉汤培养基具有各种添加的碳水化合物，可以通过发酵特定碳水化合物的能力来帮助分化各种物种和属，并产生酸或酸和气体（6）。苯酚红肉汤碱是一种完整的培养基，没有添加的碳水化合物，可与添加5-10％的所需碳水化合物一起使用。它用作研究发酵或添加碳水化合物的基础的阴性对照。蛋白酶肽和HM肽B充当碳和氮的来源。氯化钠是渗透稳定剂。苯酚红是pH指示剂，它在酸性pH下变黄。在达勒姆管中看到气体形成。所有肠杆菌科在这种介质中生长良好。除了产生pH颜色转移外，混合酸的产生，尤其是丁酸酸性，通常会导致培养基的刺激性，臭味（7）。
MIL-PRF-32033A
ASTM B117 - 操作盐雾（雾）仪器的标准规范 ASTM D91 - 润滑油沉淀数的标准试验方法 ASTM D92 - 克利夫兰开口杯试验器测定闪点和燃点的标准试验方法 ASTM D97 - 石油产品倾点的标准试验方法 ASTM D130 - 用铜片试验测定石油产品对铜的腐蚀性的标准试验方法 ASTM D445 - 透明和不透明液体运动粘度的标准试验方法（和动态粘度的计算） ASTM D972 - 润滑脂和油蒸发损失的标准试验方法 ASTM D974 - 用颜色指示剂滴定法测定酸值和碱值的标准试验方法 ASTM D1152 - 甲醇（甲醇）的标准规范。ASTM D1500 - 石油产品 ASTM 颜色标准测试方法（ASTM 颜色标度） ASTM D1748 - 金属防腐剂在湿度柜中防锈的标准测试方法 ASTM D4172 - 润滑油防磨损特性的标准测试方法（四球法） ASTM D4636 - 液压油、航空涡轮发动机润滑油腐蚀性和氧化稳定性的标准测试方法，
MRS 琼脂，改良型（乳酸杆菌异型筛选琼脂）
原理和解释 蛋黄酱、类似蛋黄酱的熟淀粉基调料和可倒出的调料是可用的沙拉酱类型。沙拉酱中的微生物来自生产设备的成分和空气。导致沙拉酱变质的微生物群似乎非常有限，由少数乳酸杆菌、酿酒酵母和接合酵母组成。APHA (1) 推荐的改良 MRS 琼脂（乳酸杆菌异型筛选琼脂）用于从沙拉酱中分离和培养乳酸杆菌种（2）。改良 MRS 琼脂是 deMan 等人的 MRS 培养基的改良版（3）。蛋白胨和葡萄糖提供乳酸杆菌生长所必需的氮、碳和其他元素。聚山梨醇酯 80 是一种油酸酯混合物，可提供乳酸杆菌所需的脂肪酸。柠檬酸铵、乙酸钠、2-苯乙醇和环己酰亚胺可抑制革兰氏阴性菌、霉菌和某些革兰氏阳性菌。某些酵母菌也因环己酰亚胺的存在而受到抑制。溴甲酚绿是 pH 指示剂，在酸性条件下，颜色会从绿色变为黄色。
揭开利用光学的大脑的复杂性...
图2。从复杂媒体社区中常用的工具的代表性进步，以应对大脑光学探测中的挑战。（a）深度：使用计算技术的散射和像差补偿，以通过活小鼠脑114中的头骨增强皮质髓磷脂的反射成像。之前：通过小鼠头骨的常规反射显微镜。左图：之后：计算偶联的自适应光学校正后的反射显微镜通过头骨在小鼠脑中的皮质髓磷脂。右图：通过头骨重建无标签结构信息的3D重建。比例尺：40μm。（b）速度：快速3D体积成像，具有标记为钙指示剂（GCAMP6F）的小鼠皮层中的神经元的靶向照明，以增加记录的神经元的信号。以前：用电透镜和反卷积后提取的痕迹的常规容积钙成像。之后：靶向的体积钙成像和反卷积30后提取的痕迹。比例尺50μm。（c）生物相容性：上图：增强信号给定相同的激光功率，由自适应光学功能启用54。之前：海马中荧光标记的神经元的低信噪比背景约1 mm深度通过常规的三光子荧光显微镜经经经经颅的1 mm深度成像。之后：自适应光学元件成像的海马中的高信噪比神经元。比例尺：20μm。比例尺：30μm。右：异常校正的相模式。较低面板：使用基于多模纤维的内窥镜结合使用遗传编码的钙指示剂GCAMP6标记的深层皮层神经元的脑成像，并结合了波前形状，用于微创成像115。（d）视场：与没有结合的计算自适应光学元件相比，计算共轭自适应光学元件（以后）启用了具有衍射限制的高分辨率成像的视野扩大场，而没有共轭（之前，白盒之前）114左：左：髓磷脂的图像。SLM：空间灯调制器，DMD：数字微旋转设备，MMF：多模纤维。面板（a）根据CC-BY 4.0的CC-114改编。面板（b）根据CC-BY 4.0的CC-BY 30改编。面板（c）改编自参考文献54的顶部图像和根据许可证CC-BY 4.0改编的Ref 115的底部图像。面板（D）根据许可证CC-BY 4.0改编的参考文献114。
实用生物技术实验室 2：培养基
C.半固体培养基 将琼脂的量减少到0.2-0.5％可使培养基变成半固体。这种培养基相当柔软，可用于展示细菌的运动性（U型管） 某些运输培养基 D.其他凝固剂 除琼脂外，蛋黄和血清也可用于凝固培养基。 2.根据营养成分分类 培养基可分为简单、复杂和合成（或定义）。 1-简单培养基，如蛋白胨水、营养琼脂可以支持大多数非苛刻细菌。那些能够以最低要求生长的细菌被称为非苛刻细菌。 2-复杂培养基，那些需要额外营养的细菌被称为苛刻细菌，例如血琼脂，其成分的确切成分很难估计。 3.根据功能用途或应用分类 1.基础培养基基本上是支持大多数非苛刻细菌的简单培养基。蛋白胨水、营养肉汤和营养琼脂被视为基础培养基 2. 富集培养基用于培养营养要求高（要求苛刻）的细菌 在基础培养基中添加血液、血清、蛋黄等形式的额外营养物质，使其成为富集培养基。血琼脂、巧克力琼脂。 3. 选择性和富集培养基旨在抑制不需要的共生菌或污染菌，并有助于从细菌混合物中恢复病原体。选择性培养基是基于琼脂的，而用于恢复金黄色葡萄球菌的甘露醇盐琼脂和盐乳琼脂含有 10% NaCl 4. 鉴别/指示培养基 鉴别培养基或指示培养基将一种微生物类型与在同一培养基上生长的另一种微生物类型区分开来。这种培养基利用微生物在特定营养物或指示剂（如中性红、酚红或亚甲蓝）存在下生长的生化特性，以直观地指示微生物的定义特性。这种方法用于麦康凯琼脂，麦康凯琼脂是最常用的培养基。制备和储存培养基时必须小心调整培养基的 pH 值，然后进行高压灭菌。所使用的各种 pH 指示剂包括酚红、中性红、大多数培养基都通过高压灭菌进行灭菌。某些含有热不稳定成分（如葡萄糖、抗生素、尿素、血清、血液）的培养基不能进行高压灭菌。这些成分需要过滤，可以在培养基高压灭菌后单独添加。培养基可以在冰箱中 4-5oC 下保存 1-2 周。某些装在带螺旋盖的瓶子或试管中或用棉塞塞住的液体培养基可以在室温下保存数周
红外神经刺激引起的兴奋性和抑制性神经反应的双光子成像
理解复杂的神经回路及其与特定行为的关系需要对神经元亚型进行精确的时间和空间调节。非遗传近红外光刺激是最有前途的大脑非侵入性神经接口技术之一。1-5 最近，脉冲红外神经刺激 (INS) 技术已被引入作为一种能够安全且可逆地调节神经活动的方法。1 与其他波长的红外刺激（例如 808 nm、2 980 nm、3 5.6 μ m 4、5 ）引起的效应相反，脉冲传输 ∼ 1.875 μ m 红外波长会导致局部热量传输并被水快速吸收。6 当通过 200 μ m 光纤以短脉冲串（0.25 ms、200 Hz、0.5 s）传输时，这种高度聚焦（亚毫米）光学方法为灵长类动物皮层中的功能性柱特异性刺激提供了一种独特的方法。 7 因此，INS 相较于传统电刺激的优势包括高空间选择性、非接触式传递，以及对于灵长类动物和人类应用而言更为重要的一点，即无需事先表达视蛋白即可对大脑部位进行神经调节。8、9 此外，凭借这种靶向光纤刺激的精确度和 MRI 兼容性，局部 INS 结合 MRI 可用于灵长类动物大脑网络的体内映射 10-12，并有望用于对清醒行为猴子进行神经调节。虽然这些应用已显示出对体内回路神经调节的巨大前景，但其作用机制或对单个细胞类型的影响目前仍然知之甚少。现在有越来越多的证据表明 INS 会导致神经调节。通过电生理学、内在信号光学成像和体内钙成像评估，INS 已被证明可在麻醉啮齿动物中诱导兴奋性和抑制性神经元反应。 13、14 INS 对麻醉恒河猴视觉皮层产生了典型的视觉诱导皮层内在信号 7 的反应，而且导致功能匹配的眼部优势域的选择性调节，与局部皮层-皮层连接的激活一致。超高场 MRI 中的 INS 可激活恒河猴解剖学预测的中尺度全球大脑部位，这进一步表明投射细胞（兴奋性锥体神经元）被 INS 激活。10 – 12 这些 INS 诱导的反应已被证明具有强度和持续时间依赖性。尽管有这些令人信服的证据，但直接用电生理学方法展示神经元反应仍然具有挑战性。一个被称为贝克勒尔效应的问题在于，记录电极的直接加热会通过电极中的热诱导电流污染神经元反应。Cayce 等人。使用同时在麻醉啮齿动物体内使用 INS 进行钙成像，并观察大脑表面皮质星形胶质细胞和顶端树突中的细胞内钙信号。14 Kaszas 等人使用遗传编码的钙指示剂 Syn-GCaMP6f 进行双光子钙成像，并表明 INS 在麻醉小鼠皮质体内的神经元中诱导微弱的细胞内钙信号。15 到目前为止，我们对神经元反应的理解仍然处于初级阶段。其潜在的作用机制尚不清楚 16 – 23，并且在细胞水平上对不同神经元亚型以及体内不同生理状态的反应的影响仍然缺乏。特别是，尽管 fMRI 研究表明 INS 可在远处皮质部位诱导 BOLD 激活，但对于细胞回路对这种功能连接结果的贡献知之甚少。为了研究 INS 如何影响体内单个神经元并检查对不同细胞亚型的影响，我们在小鼠体感皮层 2/3 层以单细胞分辨率对 INS 的神经元钙反应进行了双光子成像。使用特定的遗传编码钙指示剂 GCaMP6 检查了 hSyn 和 mDlx 标记的神经元亚型的钙反应。我们发现 INS 诱导了神经元钙反射变化的强烈、强度依赖性调节，这种调节与脉冲序列重复频率精确同步。在麻醉小鼠中，hSyn 神经元对 INS 表现出正偏转反应。令人惊讶的是，mDlx 神经元群体包含不同的反应，其中一些表现出负向反应，可能反映了抑制神经元群体的多样性。因此，这些数据确定了 INS 对 hSyn 和 mDlx 神经元的有效性以及对细胞亚型的可能依赖性。讨论了这一发现的意义。使用特定的遗传编码钙指示剂 GCaMP6s 检查了 hSyn 和 mDlx 标记的神经元亚型的钙反应。我们发现 INS 诱导了神经元钙反射变化的强烈、强度依赖性调节，这种调节与脉冲序列重复频率精确同步。在麻醉小鼠中，hSyn 神经元对 INS 表现出正偏转反应。令人惊讶的是，mDlx 神经元群体包含不同的反应，其中一些表现出负向反应，可能反映了抑制神经元群体的多样性。因此，这些数据确定了 INS 对 hSyn 和 mDlx 神经元的有效性以及对细胞亚型的可能依赖性。讨论了这一发现的含义。使用特定的遗传编码钙指示剂 GCaMP6s 检查了 hSyn 和 mDlx 标记的神经元亚型的钙反应。我们发现 INS 诱导了神经元钙反射变化的强烈、强度依赖性调节，这种调节与脉冲序列重复频率精确同步。在麻醉小鼠中，hSyn 神经元对 INS 表现出正偏转反应。令人惊讶的是，mDlx 神经元群体包含不同的反应，其中一些表现出负向反应，可能反映了抑制神经元群体的多样性。因此，这些数据确定了 INS 对 hSyn 和 mDlx 神经元的有效性以及对细胞亚型的可能依赖性。讨论了这一发现的含义。
Algeria中GRSPAV相关病毒的遗传多样性
葡萄鲁佩斯特茎斑点相关病毒（Grspav; Foveavirus Rupestris，betaflexiviridae）（Martelli和Jelkmann，1998; Petrovic等人，2003年）在许多葡萄酒中广泛普遍存在（Martelli等人（Martelli等人），1997; Meng and Gonsalves，2007年； Morelli等。，2011年）。grspav已知与葡萄植物中的Rupestris茎斑点和静脉坏死有关（Martelli，2014年），并且该病毒在指示剂vitisator vitis'St.上引起了典型的茎斑点症状。George'（Goszczynski和Jooste，2003年）。 缺乏该病毒在茎斑点或静脉坏死中的病因作用的确定性证明（Meng and Rowhani，2017年）。 没有昆虫向量与Grspav的扩散有关，其传播是通过感染材料的交换来解释的（Meng and Gonsalves，2003年）。George'（Goszczynski和Jooste，2003年）。缺乏该病毒在茎斑点或静脉坏死中的病因作用的确定性证明（Meng and Rowhani，2017年）。没有昆虫向量与Grspav的扩散有关，其传播是通过感染材料的交换来解释的（Meng and Gonsalves，2003年）。
计算机生成的全息技术在针对性神经元调节方面的进展
摘要。遗传编码钙指示剂和光遗传学通过利用光以单细胞精度检测和调节神经活动，彻底改变了神经科学。为了充分利用这些技术的巨大潜力，需要先进的光学仪器，能够以高水平的空间和时间精度将光照射到定制的神经元集合上。具有塑造光束能力的现代光雕刻技术是首选，因为它们可以同时精确瞄准多个神经元，并以与自然神经元动力学相匹配的速率调节单个神经元大集合的活动。最通用的方法是计算机生成的全息术 (CGH)，它依赖于放置在相干激光束路径中的计算机控制光调制器来合成定制的三维 (3D) 照明模式并根据需要照亮神经集合。在这里，我们回顾了快速和时空精确的 CGH 技术的开发和实施的最新进展，该技术以 3D 形式雕刻光以光学方式询问神经回路功能。 © 作者。由 SPIE 根据 Creative Commons Attribution 4.0 International 许可证出版。分发或复制本作品的全部或部分内容需要完全注明原始出版物的出处，包括其 DOI。[DOI：10.1117/1.NPh.9.4.041409]