Cas9 切割的位置由与 Cas 蛋白结合的短 RNA 分子(称为向导 RNA)决定(图 1)。向导 RNA 与 Cas9 结合后,复合物扫描基因组以查找称为 PAM 的三碱基序列。Cas9 PAM 序列为 5' NGG 3',其中 N 可以是任何碱基。当 Cas9 遇到 PAM 序列时,它会解开 DNA,将其分离成单链。然后,Cas9 使用向导 RNA 来确定是否切割 DNA。向导 RNA 的一端有约 20 个碱基,它们决定了 Cas9 将切割哪个 DNA 序列。如果向导 RNA 中这约 20 个碱基的序列与 DNA 互补,则 Cas9 将切割 DNA 的两条链。如果向导 RNA 与 DNA 不匹配,则复合物将移动到下一个 PAM 位点,双螺旋将重新拉上拉链,变成双链形式。使用 Cas9 作为基因编辑工具的诀窍是,科学家可以定制这个约 20 个碱基的序列,将 Cas9 定位到 DNA 的特定区域,基本上允许他们对 Cas9 的切割位置进行编程。
Cas9 切割的位置由与 Cas 蛋白结合的短 RNA 分子(称为向导 RNA)决定(图 1)。向导 RNA 与 Cas9 结合后,复合物扫描基因组以查找称为 PAM 的三碱基序列。Cas9 PAM 序列为 5' NGG 3',其中 N 可以是任何碱基。当 Cas9 遇到 PAM 序列时,它会解开 DNA,将其分离成单链。然后,Cas9 使用向导 RNA 来确定是否切割 DNA。向导 RNA 的一端有约 20 个碱基,它们决定了 Cas9 将切割哪个 DNA 序列。如果向导 RNA 中这约 20 个碱基的序列与 DNA 互补,则 Cas9 将切割 DNA 的两条链。如果向导 RNA 与 DNA 不匹配,则复合物将移动到下一个 PAM 位点,双螺旋将重新拉上拉链,变成双链形式。使用 Cas9 作为基因编辑工具的诀窍是,科学家可以定制这个约 20 个碱基的序列,将 Cas9 定位到 DNA 的特定区域,基本上允许他们对 Cas9 的切割位置进行编程。
完整作者列表:库马尔,拉吉;密歇根大学,药学科学系 Mondal,Kunal;爱达荷国家实验室,材料科学与工程;北卡罗来纳州立大学,化学与生物分子工程 Panda,Pritam;乌普萨拉大学物理与天文学系 Kaushik,Ajeet;佛罗里达理工大学,自然科学 Abolhassani,Reza;南丹麦大学 - 松德堡,MCI/NanoSYD Ahuja,Rajeev;乌普萨拉大学,物理学和天文学 Rubahn,Horst-Gunter;南丹麦大学、马兹·克劳森研究所、NanoSYD Mishra、Yogendra;南丹麦大学 - 松德堡校区、NanoSYD、马兹·克劳森研究所
微胶囊允许从药物到香水的货物的控制,运输和释放。鉴于微胶囊和其他核心壳结构的各种行业的兴趣,存在多种制造策略。在这里,我们报告了一种依赖温度响应性微凝胶颗粒,聚(N-异丙基丙烯酰胺)(PNIPAM)的混合物和经历流体流体相分离的聚合物的混合物。在室温下,该混合物分离成富含胶体的(液体)和胶体贫困(气体)流体。通过在临界温度上加热样品,其中微凝胶颗粒会急剧收缩并产生更深刻的颗粒室内电势,富含胶体相的液滴变成类似凝胶的液滴。随着温度降低到室温,这些凝胶胶体颗粒的这些液滴会在液滴中重新和相位分离。这种相分离会导致胶体富含胶体的液滴中的胶体贫穷的液滴,并被连续的胶体贫穷相包围。气体/液体/气体全水乳液仅在大多数内液滴逸出前仅几分钟。但是,核壳液滴的胶壳可以通过添加盐来固化。这种方法使用仅使用水性成分的刺激敏感的微凝胶胶体颗粒组成的壳形成核心壳结构,使其对封装生物材料和制造胶囊的胶囊有吸引力,以响应例如温度,盐浓度或pH的变化。
摘要:单光子来源对于推进量子技术至关重要,可扩展的集成是至关重要的要求。迄今为止,大规模光子结构中单光子源的确定性定位仍然是一个挑战。在这种情况下,胶体量子点(QD),尤其是核心/外壳配置,由于其解决方案的加工性而具有吸引力。但是,传统QD通常很小,约为3至6 nm,这限制了它们在大规模光子设备中的确定性位置和实用性。最大的现有核/壳QD是巨型CDSE/CDS QD的家族,总直径约为20至50 nm。推动超过此尺寸限制,我们使用逐步高温连续注射方法引入了巨大CDSE/CDS QD的合成策略,尺寸范围从30到100 nm。电子显微镜揭示了一个一致的六角形钻石形态,由十二个半极化{101̅1}方面和一个极(0001)刻面组成。我们还确定了破坏壳生长的条件,导致缺陷,岛屿和机械不稳定性,这表明将晶体颗粒生长到100 nm以上。厚CD壳在CDSE核上的逐步生长可以使发射QD的合成长度发光寿命为几微秒,并在室温下抑制眨眼。值得注意的是,具有100个CDS单层的QD具有高单光子发射纯度,二阶光子相关G(2)(0)值低于0.2。我们的发现表明,巨大的核心/壳QD可以有效地发出单个光子,这为需要确定性放置单光子源的量子光子应用铺平了道路。
1.1.1 适用范围 1.1.1.1 本部分适用于在本社入级并在 2006 年 4 月 1 日或以后签订建造合同(1)的长度为 150 m、L CSR-T 及以上的双壳油船。规范长度 L CSR-T 的定义见第 4 节/1.1.1.1。 1.1.1.2 通常,对于长度小于 150 m、L CSR-T 的双壳油船,应适用本社规范。 1.1.1.3 在本部分生效日前签订建造合同的船舶应符合本社规范。 注建造合同日期系指未来船东与造船厂签订船舶建造合同的日期。有关建造合同日期的更多详细信息,参见 IACS 程序要求(PR)第 29 号。
作者 KS Longmire · 2022 · 被引用 7 次 — 硬蛤是一种浅栖双壳类动物,具有短而可伸缩的虹吸管,可以紧密密封,表明其具有装甲防御策略...
将打靶特定人源基因的 Cas9 和 sgRNA 转染到 HEK293 细胞。转染所用的质粒 DNA 上含有 表达带双端核定位序列 ( NLS )的 Cas9 及 sgRNA 的表达框,通过 TransIT-X2 (Mirus) 转染 试剂进行转染。转染所用的 Cas9 mRNA 进行了假尿苷和 5- 甲基胞嘧啶修饰且带有双端 核定位序列,使用 transIT-mRNA 转染试剂将 sgRNA 和 mRNA 共转染。 Cas9 RNPs 使用脂质 体 RNAiMAX ( Life Technologies ) 进行反向转染, RNP 的终浓度为 10 nmol 。 Cas9 蛋白上不含 核定位序列。 EnGen Cas9 含有双端核定位序列。编辑效率通过 T7E1 实验进行分析,结果 以修饰百分比进行统计。
将打靶特定人源基因的 Cas9 和 sgRNA 转染到 HEK293 细胞。转染所用的质粒 DNA 上含有 表达带双端核定位序列 ( NLS )的 Cas9 及 sgRNA 的表达框,通过 TransIT-X2 (Mirus) 转染 试剂进行转染。转染所用的 Cas9 mRNA 进行了假尿苷和 5- 甲基胞嘧啶修饰且带有双端 核定位序列,使用 transIT-mRNA 转染试剂将 sgRNA 和 mRNA 共转染。 Cas9 RNPs 使用脂质 体 RNAiMAX ( Life Technologies ) 进行反向转染, RNP 的终浓度为 10 nmol 。 Cas9 蛋白上不含 核定位序列。 EnGen Cas9 含有双端核定位序列。编辑效率通过 T7E1 实验进行分析,结果 以修饰百分比进行统计。