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毕赤酵母基因组 DNA 提取的优化...
基因组 PCR 是分子生物学的基础，包括两个关键步骤：DNA 提取和扩增。酵母 DNA 提取的主要挑战是细胞壁的破坏，这直接影响提取效率。在本研究中，我们使用了文献中报道的几种酵母基因组提取方法，例如玻璃珠法 [7] 、LiAc [8] 和 NaOH 法 [9] 。NaOH 法利用强碱性环境溶解和变性蛋白质，破坏细胞和核膜，并使核酸酶失活，从而无需影响其一级结构即可释放 DNA。另一方面，LiAc 法使用 LiAc 和 SDS 暂时透化酵母细胞，使 DNA 自由通过。SDS 是一种阴离子洗涤剂，可去除污染蛋白质，而乙醇可沉淀和浓缩 DNA。LiCl 遵循与 LiAc 类似的原理。玻璃珠法是一种物理方法，通过高速摇晃过程中的机械摩擦破坏细胞壁。本研究还测试了一种能够水解真菌细胞壁的酶 Lyticase，并优化了直接基因组提取的方案。
Komagataella phaffii（毕赤酵母）作为一种强大的酵母...
Komagataella phaffii (K. phaffii) (Pichia pastoris)，也称为生物技术酵母，是一种在生物技术和制药行业中具有多种应用的酵母菌种。这种甲基营养酵母作为重组蛋白的生产平台引起了人们的极大兴趣。它具有许多优点，包括有效的分泌表达，便于纯化异源蛋白，细胞密度高，生长迅速，翻译后变化，以及整合到基因组中的稳定基因表达。在过去的三十年里，K. phaffii 还被精炼为一个适应性强的细胞工厂，可以在实验室环境和工业规模上生产数百种生物分子。事实上，迄今为止，使用 K. phaffii 表达方法已经生成了 5000 多种重组蛋白，占细胞总蛋白的 30% 或总释放蛋白的 80%。除了已获得许可的 300 多种工业工艺外，K. phaffii 还用于制造 70 多种商业产品。其中包括对工业生物技术有用的酶，包括木聚糖酶、甘露聚糖酶、脂肪酶和植酸酶。其他是生物制药，包括人血清白蛋白、胰岛素、乙肝表面抗原和表皮生长因子。与其他表达系统相比，这种酵母还被认为是合成亚单位疫苗的特殊宿主，而亚单位疫苗最近已被替代疫苗类型所取代，例如灭活/杀死和减毒活疫苗。此外，通过多层次优化方法，如密码子偏好、基因剂量、启动子、信号肽和环境因素，可以实现重组蛋白的高效生产。因此，尽管 K. phaffii 表达系统高效、简单且工艺流程明确，但仍需确定理想条件，因为这些条件会根据目标蛋白而变化，以确保最高的重组蛋白生成量。本综述介绍了 K. phaffii 表达系统、其在工业和生物制药蛋白质生产中的重要性，以及一些高效蛋白质生产的生物加工和遗传改造策略。K. phaffii 最终将继续作为一种强大的表达系统在研究领域和工业应用中做出贡献。
将核酸外切酶与 Cas9 融合可增强毕赤酵母中的同源重组
HR 比 NHEJ 慢得多，NHEJ 可以从 DSB 事件中拯救更多细胞。NHEJ 几乎不需要或根本不需要末端切除来直接重新连接 DSB 末端。相比之下，HR 需要短距离切除和长距离切除 DSB 以及供体来实施修复过程。此外，其他蛋白质也可能是 HR 修复途径的限制因素 [18, 19]。我们在此发现，在同时删除两个基因和整合多个片段期间，将 MRE11 与 CAS9 融合可提高 CFU 数量
重组人乳头瘤病毒双价（16、18 型）疫苗（毕赤酵母）
抗 HPV 16 个月 7 265 264 99.62 (97.92, 99.99) 8571.45 (7437.30, 9878.50) 个月 12 265 265 100.00 (98.62, 100.00) 1577.93 (1408.00, 1768.40) 个月 24 242 242 100.00 (98.49, 100.00) 1916.92 (1668.50, 2202.40) 个月 36 235 235 100.00 (98.44, 100.00) 1161.28 (1007.80, 1338.10) 个月48 206 203 98.54 (95.80, 99.70) 762.37 (650.37, 893.66) 抗 HPV 18 第 7 个月 263 262 99.62 (97.90, 99.99) 5825.80 (5087.20, 6671.70) 第 12 个月 263 262 99.62 (97.90, 99.99) 3111.29 (2687.00, 3602.60) 第 24 个月 242 241 99.59 (97.72, 99.99) 1371.08 (1168.70, 1608.50) 第 36 个月 235 235 100.00 (98.44, 100.00) 1069.23 (903.80, 1264.90) 第 48 个月 206 201 97.57 (94.43, 99.21) 742.13 (625.20, 880.91) PPS 人群由接种 3 剂疫苗且在第 1 剂之前对相关 HPV 类型血清呈阴性的个体组成。采用基于假病毒的中和试验 (PBNA) 进行抗体检测；针对 HPV 16 和 HPV 18 的中和抗体的阳性截止值为 1:40。
Abdala COVID-19 疫苗的结构和功能糖基化
Abdala 是一种由毕赤酵母生产的 COVID-19 疫苗，基于 SARS-CoV-2 刺突的受体结合域 (RBD)。Abdala 目前已获准在多个国家使用，临床试验证实了其在预防重症和死亡方面的安全性和有效性。尽管毕赤酵母被用作基于蛋白质的疫苗的表达系统，但酵母糖基化在免疫原中仍然基本未被表征。在这里，我们表征了 N-糖结构及其在 Abdala 上的附着位点，并展示了与等效的哺乳动物衍生 RBD 相比，酵母特异性糖基化如何降低与 ACE2 受体和受体结合基序 (RBM) 靶向抗体的结合。受体和抗体结合的减少归因于 N-糖基化导致的构象动力学变化。这些数据强调了糖基化在疫苗设计中的关键重要性，并展示了单个糖如何通过蛋白质结构动力学影响宿主相互作用和免疫识别。
B型肝炎-DGDA
介绍 Hepa-B 儿科疫苗：每瓶含 0.5 ml 乙肝疫苗 (rDNA) BP，其中含有≥10 µ g 乙肝表面抗原，吸附于氢氧化铝凝胶上，相当于 Al 3+ 0.25 mg。硫柳汞 0.025 mg 作为防腐剂。 Hepa-B 成人疫苗：每瓶含 1 ml 乙肝疫苗 (rDNA) BP，其中含有≥20 µ g 乙肝表面抗原，吸附于氢氧化铝凝胶上，相当于 Al 3+ 0.5 mg。硫柳汞 0.05 mg 作为防腐剂。 描述 Hepa-B 是一种非感染性重组 DNA 乙肝疫苗。它是通过培养携带编码 HBsAg 基因的巴氏毕赤酵母基因工程酵母细胞获得的纯化乙型肝炎病毒表面抗原的悬浮液。通过几种物理化学步骤纯化巴氏毕赤酵母细胞中表达的 HBsAg 蛋白，并配制为吸附在氢氧化铝上的抗原悬浮液。在其生产过程中不使用任何人源物质。适应症和用途 Hepa-B 适用于针对已知所有亚型乙型肝炎病毒引起的感染进行主动免疫。由于没有乙型肝炎感染就不会发生丁型肝炎（由 delta 病毒引起），因此可以预期，丁型肝炎也可以通过乙型肝炎疫苗接种来预防。
产品列表 - 疫苗 - 印度
标签成分： 每剂量 0.5 mL 含： 白喉类毒素 ≥30 IU（≥20 Lf 至 ≤30 Lf）S .............................................................. 破伤风类毒素 ≥60 IU（≥5Lf 至 ≤ 25 Lf）S .............................................................................. 百日咳杆菌（全细胞） ≥4 IU S ............................................................................................. r-HBsAg 12.5 µg S ............................................................................................................. （毕赤酵母产生的重组 HBs 抗原） 纯化的 Hib 荚膜多糖 (PRP) S 与 20 至 36.7 µg 破伤风类毒素 11 µg 共价连接 .............................................
毕spmg高加索和中亚技术调查2024
我们地区的另一个值得注意的特征是，在对IT投资的决定时，尤其是与信息安全相关的公司时，IT领导者并未看到所有利益相关者的需求都没有足够平衡的公司。Baizhan Kanafin，Documentolog的首席执行官，通过许多人作为执行者对IT功能的历史看法解释了这一差距，而不是成本中心。他补充说，进入分水岭的方式应该是双向的：“如果他/她想影响商业决策，IT主管必须准备好对业务成果负责。”同时，这一差距在财务和电信部门不太明显。Qazcode首席执行官Alexey Sharavar评论：“我们正在整体和全面考虑所有决定。为了做出决定，绝对需要基于数据的业务案例，但是只有未来才能显示目标是否可以实现。因此，可以自由操纵此案，但是，我们将在整个项目周期中不断监视所有指标。” CA，Creatio的企业销售团队负责人Dmitry Parshuto同意他的观点：“当然，选择和启动IT项目时依靠数据非常重要；但是，为了最大程度地提高效率，应该以专业专业知识和战略愿景来补充数据。”
利用赤泥和生物肥料改善泥炭质量并
泥炭地是次优土地，其质量可以得到改善，以便用于农业种植。其中一种方法就是利用赤泥和生物肥料。赤泥是铝土矿加工产生的废弃物，在西加里曼丹储量丰富。赤泥的pH值高、电导率高、可交换性钠高、碱饱和度高。生物肥料是含有精选微生物的产品，可以帮助促进植物生长和产量。本研究旨在确定赤泥和生物肥料对改善泥炭质量的效果以及对杂交玉米生长和产量的影响。该实验采用双因素随机区组设计（RBD）。第一个因素是赤泥，有三种剂量水平：对照（l 0 ）、6吨/公顷（l 1 ）和12吨/公顷（l 2 ）。第二个因素是生物肥料，有三种类型：对照（p 0）、Mycofer 高达 10 g/plant（p 1）和 Provibio 高达 10 ml/l（p 2）。研究结果表明，12吨/公顷剂量的赤泥显著提高了土壤pH值、土壤电导率、植物生长和杂交玉米产量。 12吨/公顷赤泥与Provibio生物肥料的相互作用显著提高了钠的含量，并实现了磷、钾、钙和镁的最高吸收。关键字：