基因组 PCR 是分子生物学的基础,包括两个关键步骤:DNA 提取和扩增。酵母 DNA 提取的主要挑战是细胞壁的破坏,这直接影响提取效率。在本研究中,我们使用了文献中报道的几种酵母基因组提取方法,例如玻璃珠法 [7] 、LiAc [8] 和 NaOH 法 [9] 。NaOH 法利用强碱性环境溶解和变性蛋白质,破坏细胞和核膜,并使核酸酶失活,从而无需影响其一级结构即可释放 DNA。另一方面,LiAc 法使用 LiAc 和 SDS 暂时透化酵母细胞,使 DNA 自由通过。SDS 是一种阴离子洗涤剂,可去除污染蛋白质,而乙醇可沉淀和浓缩 DNA。LiCl 遵循与 LiAc 类似的原理。玻璃珠法是一种物理方法,通过高速摇晃过程中的机械摩擦破坏细胞壁。本研究还测试了一种能够水解真菌细胞壁的酶 Lyticase,并优化了直接基因组提取的方案。