在第一区,游客将穿越海洋的不同层次,通过不断变化的色谱展示海洋生物,其中包括令人着迷的海洋生物发光现象。在第二区,游客可以通过 X 射线和超声波技术观察海洋生物的内部和解剖结构。进入第三区“秘密海景”,游客将发现壮丽的海带森林和珊瑚礁,这里生活着各种各样的动物。最后,在第四区,VibranSEA 展示了“时间与潮汐”,这是与四位当地艺术家合作创作的一系列发人深省的艺术装置。他们的作品既崇敬海洋,又哀叹海洋的现状,敦促游客反思环境保护和可持续实践的重要性。
blcl = b淋巴细胞细胞系; Bli =生物发光成像; CAR =嵌合抗原受体; EBV =爱泼斯坦 - 巴尔病毒; HLA =人白细胞抗原; IFN-γ=干扰素伽马; IL-4 =白介素4; IL-5 =白介素5; IL-6 =白介素6; ITAM =基于免疫受体酪氨酸的活化基序; ln =狼疮肾炎; MS =多发性硬化症; ntd =未转导的; PBMC =外周血单核细胞; PHAB,PHA爆炸; SCFV =单链变量片段; SLE =全身性红斑狼疮; TCR = T细胞受体; th2 = t助手2; tm-ic =跨膜构成细胞; TNF-α=肿瘤坏死因子α; VCN =矢量复制号。
CRISPR-Cas9 系统为生物学基础研究和转化研究疾病模型的开发提供了强大的基因编辑工具。本研究的目的是利用包括 CRISPR-Cas9 和生物发光在内的先进技术来生成新的人类细胞系,用作癌症研究中的体外和体内模型。大约 50% 的黑色素瘤患者有 BRAF V600E 突变,并且通常在治疗几个月后对当前的 BRAF 抑制剂产生耐药性。KRAS G13D 是一种与对这些抑制剂的耐药性相关的获得性突变。在这项研究中,CRISPR-Cas9 用于将 KRAS G13D 点突变敲入 A375 恶性黑色素瘤细胞系,该细胞系也含有可靶向的 BRAF V600E 突变。由此产生的 KRAS G13D 突变同源系 A375 已在基因组、转录本和蛋白质生物功能水平上得到验证,在传统的 2D 和 3D 细胞培养中研究时,该突变系对 BRAF 抑制剂达拉非尼和维莫非尼表现出显著的抗性。基于上述体外模型,我们通过将稳定的荧光素酶报告基因引入同源 A375 和 KRAS G13D A375 细胞系,开发了用于活体动物生物发光成像的其他模型。对细胞内的相对和绝对生物发光信号进行了量化,发现发射 4.9 x 10 5 光子/细胞/秒(A375)和 3.5 x 10 5 光子/细胞/秒(KRAS G13D A375)。本研究采用皮下异种移植模型,并使用 Xenogen IVIS™ 成像系统量化体内活体生物发光信号,以将肿瘤生长与荧光素酶表达关联起来。A375-Luc2 和 KRAS G13D A375-Luc2 注射到裸鼠体内后均生长为皮下肿瘤,生物发光水平不断提高。此外,还开发了 5 对人类同源荧光素酶报告细胞系和 18 种人类和小鼠荧光素酶报告细胞系,用于研究各种癌症类型。总之,CRISPR-Cas9 技术和稳定的荧光素酶表达两种技术的结合可以生成同源荧光素酶表达细胞系,这些细胞系是阐明肿瘤发生机制和研究体外和体内药物反应的宝贵工具。
在行为实验动物中对神经元活性的操纵对于阐明脑功能的神经元网络至关重要。光遗传学1和化学遗传学2方法对于确定遗传定义的神经元种群对电路和行为输出的贡献仍然非常有价值。两种方法都具有明显的优势,并在精确的时间尺度上对神经元亚群的活性进行了光遗传控制,并且对整个神经元群体活性的化学遗传控制较慢。以前的工作已经开发了一种工具集,该工具集通过将光发射荧光素酶融合到光遗传学的光响应元件中,从而积分光学和化学遗传学方法,从而产生发光的Opsin或Luminopsin(LMO)(LMO)3 - 5 [图。1(a)]。通过荧光素酶氧化可扩散的荧光素底物产生的生物发光会激活附近的蛋白蛋白。取决于OPSIN的生物物质特性,荧光素酶产生的光可以激发或抑制表达LMO的靶神经元。将光学和化学方法的这种整合允许在同一实验动物中同一神经元的一系列空间和时间尺度上操纵神经活动。例如,可以将整个神经元群体激活的行为成分的贡献与同一神经元子集的群体进行比较,从而通过生物发光或光遗传纤维通过光纤维在化学上激活OPSIN化学。6
Microtox方法涉及分析生物发光细菌在测试化合物溶液中的发光能力。测试了两个具有相同起始浓度的测试解决方案。一种测试第0天,另一种解决方案经过28天的有氧生物降解性测试。在暴露时间为5、15和30分钟,估计暴露细菌的光发射能力估计。计算测试化合物浓度与响应之间的关系。然后计算出20%的光发射(EC20)减少50%(EC50)的浓度。根据测试结果(0.7%v/v)对细菌vibro Fisheri第0天有些毒性。可生物降解性28天后,显示了没有毒性作用。
纳米杆技术使用生物发光共振能量转移(BRET)研究活细胞中蛋白质蛋白质的相互作用。研究了成人骨形成的调节剂Schnurri-3的相互作用,与ERK-2使用了2个不同的载体。一个载体包含Schnurri-3和Nanoluc®,一种具有高效率生成光子的发光酶,第二个载体包含ERK-2 PlusHalotag®,荧光配体。当两种蛋白质接近近距离时,观察到荧光。确定了Schnurri-3-ERK相互作用抑制剂的纳米伯特分析以及纳米信号与荧光信号的比率。使用MEK在竞争相互作用的单元格中验证了这一点,如果过表达,则会降低荧光信号。
多学科技术。mi模态可以大致分为三组:经典的解剖成像方式(例如磁共振成像(MRI),X射线计算机断层扫描(CT),超声成像(USI)等。],光学分子成像(OMI)方式(例如生物发光成像,荧光成像,光声成像等。)和核医学成像方式[例如正电子发射断层扫描(PET)和单光子发射计算机断层扫描(SPECT)](6,7)。经典的解剖成像方式在设备开发,图像处理和分析以及生物学和医学应用方面具有最长的历史。大量文献回顾了MI领域这些方式的进步(8-11)。因此,本文的内容主要关注OMI和核医学成像技术。
• Lumit 免疫测定细胞系统是一种均质生物发光免疫测定,它将免疫检测与酶亚基互补相结合,可直接在细胞裂解物中测量目标分析物 • 蛋白质磷酸化检测:Lumit 免疫测定能够快速、无需清洗地检测激酶信号通路(如 RAS-MAPK/ERK)中的磷酸化,以进行抑制剂评估和分析 • 靶向蛋白质降解 (TPD):Lumit 免疫测定能够有效分析多种细胞系中 PROTAC 介导的蛋白质降解,支持靶向激酶降解 • 高通量筛选 (HTS):Lumit 免疫测定针对可扩展的 HTS 进行了优化,能够有效筛选 384 孔和 1536 孔格式的激酶途径调节剂
Nanobret™靶标参与(TE)细胞内激酶测定法在完整细胞内的精选激酶蛋白靶标处定量化合物结合。该目标参与分析基于Nanobret™系统,这是一种旨在测量活细胞中分子接近的生物发光能量转移(BRET)技术。具体而言,该测定法使用测试化合物和可渗透荧光纳米骨架™示踪剂之间的竞争位移,该曲线可与细胞中表达的Nanoluc®荧光素酶 - 激酶融合蛋白可逆地结合。纳米细胞内激酶测定和特定的激酶-Nanoluc®荧光素酶融合载体一起用于测量活细胞中的激酶化合物亲和力,占用率和停留时间。