缺乏 Zn 2+ 位点,IC 50 分别为 9.35 ± 0.18 µ M 和 0.67 ± 0.09 µ M。18 有趣的是,
胱氨酸病是一种罕见遗传性疾病,其特征是胱氨酸积聚和结晶,可导致肾脏、甲状腺、眼睛和大脑等多种组织和器官严重受损。虽然胱氨酸病对大脑功能的影响与其对其他器官的影响相比相对较轻,但该人群的寿命增加以及因此对社会做出生产性贡献的潜力导致人们对其对大脑功能的影响越来越感兴趣。尽管如此,尽管存在一些结构性大脑差异的证据,但这种突变对神经的影响仍未得到很好的描述。在这里,我们使用被动持续时间异常范式(具有不同的刺激开始异步性 (SOA),代表对记忆的不同需求水平)和高密度电生理学,在一组 22 名被诊断患有胱氨酸病的儿童和青少年(年龄范围:6-17 岁)和神经典型年龄匹配的对照组(N = 24)中测试了基本听觉处理。我们检查了 N1 和不匹配负波 (MMN) 在各组之间是否存在显著差异,以及这些神经测量值是否与言语和非言语智商相关。被诊断患有胱氨酸病的个体表现出与年龄匹配的同龄人相似的 N1 反应,表明该人群的基本听觉处理是典型的。然而,尽管两组对最短(450 毫秒)SOA 表现出相似的 MMN 反应,表明变化检测和感觉记忆完好无损,但诊断为胱氨酸病的个体对较长(900 毫秒和 1800 毫秒)SOA 的反应明显减少。这可能表明在诊断为胱氨酸病的儿童和青少年中,听觉感觉记忆痕迹持续时间缩短,因此感觉记忆受损。未来需要研究感觉和工作记忆的其他方面,以了解此处描述的差异的根本基础及其对高阶处理的影响。
包括布鲁氏杆菌、棒状杆菌、巴氏杆菌、肺炎球菌和链球菌等难培养菌,在适当的温度下无需添加增菌剂(1,11,12)即可在较长时间内生长。甚至一些对光敏感的厌氧微生物也可以在没有特殊条件的情况下在该培养基中生长,但在还原气氛中,它们会得到理想的生长。该培养基在新鲜配制时效率最高,但可以长期保存,但注意避免脱水。为此,强烈建议使用螺旋盖或适当密封。在有二氧化碳的培养基中,牛放线菌、漏斗状拟杆菌和细毛菌(8)等厌氧菌在该培养基中生长良好。添加碳水化合物后,它可用于研究不在酚红经典培养基中生长的微生物的糖发酵。通过酚红指示剂的颜色变化可以轻易观察到酸化。在半固体琼脂中,酸性反应很容易检测到,因为形成的酸不会像在肉汤中那样立即扩散到整个培养物中。当不存在可发酵碳水化合物时,大多数培养物都会出现碱性反应。在半固体培养基中很容易检测到运动性 (13)。运动性培养物远离接种线生长。非运动性生物沿着接种线在接种区域生长,而周围区域保持清洁。胰蛋白胨、L-胱氨酸提供支持苛刻微生物生长所需的营养。碳水化合物发酵是通过培养基的可见颜色变化来检测的,这是由于 pH 指示剂染料酚红的掺入。当生物代谢存在的碳水化合物时,会产生有机酸,培养基会变酸。然而,培养基中存在的蛋白胨也会被存在的细菌降解,产生 pH 呈碱性的物质。当碳水化合物发酵产生的酸量大于蛋白胨降解的碱性终产物时,酚红指示剂会从红橙色变为黄色。酚红的颜色变化发生在 pH 值 6.8 左右,接近培养基的原始 pH 值。在研究奈瑟菌属的发酵时,只接种管状培养基的表面。对于兼性生物,例如链球菌和严格厌氧生物,接种方法是用接种针刺入培养基中心,深度约为培养基深度的 1/2。根据所测试的生物,使用松开的盖子进行有氧或厌氧培养。奈瑟菌应使用松开的盖子培养(7);如果在 CO2 培养箱中培养(3,10),则应在非 CO2 培养箱中使用紧密的盖子培养(3)。为了更快地生长和更快地进行发酵反应,厌氧培养物最好在 CO2 以及氢气或氮气存在下进行培养。
铅毒性与其相互作用和损害DNA的能力有关。但是,其作用的分子机制尚未完全理解。在我们实验室的体外研究表明,硝酸铅(PBNO 3)以剂量依赖性方式诱导人肝癌(HEPG 2)细胞的细胞毒性和氧化应激。在这项研究中,我们假设N-乙酰基半胱氨酸(NAC)是一种已知的抗氧化剂化合物,可针对铅诱导的与遗传毒性损伤相关的细胞死亡。为了检验该假设,将HEPG 2细胞用NAC,NAC加Plus PBNO 3或单独使用PBNO 3的生理剂量处理,然后在37 U C下在37 U C下孵育48小时。通过锥虫蓝色排除测试确定细胞活力。通过微凝胶电溶剂(彗星)测定检测到DNA损伤程度。我们的结果表明,铅暴露会诱导大量的细胞毒性以及对HEPG 2细胞的显着遗传毒性。然而,与NAC的生理剂量(500 m m)共同治疗可稍微增加细胞活力,并显着降低DNA损伤程度(p,.05)。因此,基于其清除自由基的能力,NAC治疗可能是针对铅毒性进行化学预防的有前途的治疗候选者。(Ethn dis。2010; 20 [Suppl 1]:S1-101 – S1-103)
荧光滴定表明,人类低分子量激肽原 (LK) 能以高亲和力结合两分子的蛋白酶 L 和 S 以及木瓜蛋白酶。相比之下,第二分子的蛋白酶 H 的结合要弱得多。通过滴定法(监测酶活性损失和沉降速度实验)证实了 2:1 的结合化学计量。蛋白酶 L 和 S 与木瓜蛋白酶的结合动力学表明,两个蛋白酶结合位点的结合速率常数 k,,,,, = 10.7-24.5 x 106 M" sI 和 k,,,,, = 0.83-1.4 x 106 M" s-'。将这些动力学常数与完整 LK 及其分离结构域的先前数据进行比较,表明结合较快的位点也是结合较紧的位点,位于结构域 3 上,而结合较慢、亲和力较低的位点位于结构域 2 上。这些结果还表明,两个结合位点之间或来自激肽原轻链的蛋白酶结合没有明显的空间障碍。