荧光滴定表明,人类低分子量激肽原 (LK) 能以高亲和力结合两分子的蛋白酶 L 和 S 以及木瓜蛋白酶。相比之下,第二分子的蛋白酶 H 的结合要弱得多。通过滴定法(监测酶活性损失和沉降速度实验)证实了 2:1 的结合化学计量。蛋白酶 L 和 S 与木瓜蛋白酶的结合动力学表明,两个蛋白酶结合位点的结合速率常数 k,,,,, = 10.7-24.5 x 106 M" sI 和 k,,,,, = 0.83-1.4 x 106 M" s-'。将这些动力学常数与完整 LK 及其分离结构域的先前数据进行比较,表明结合较快的位点也是结合较紧的位点,位于结构域 3 上,而结合较慢、亲和力较低的位点位于结构域 2 上。这些结果还表明,两个结合位点之间或来自激肽原轻链的蛋白酶结合没有明显的空间障碍。