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补充图 1。流式细胞术分析的门控策略。(A)主要外周血淋巴细胞的门控策略。从前向散射面积与侧向散射面积点图中选择淋巴细胞,随后在前向散射面积与前向散射高度点图中选择单个细胞。然后,通过 CD3+ 表达选择 T 细胞,并通过 CD8 vs CD4 点图识别 CD8+ 细胞毒性和 CD4+ 辅助 T 细胞。NK 细胞被识别为 CD3- 和 CD56+ 和/或 CD16+ 淋巴细胞,并在 CD16 vs CD56 点图中选择 CD56 亮 CD16-、CD56 暗 CD16+ 和 CD56-CD16+ 功能亚群。B 细胞被选为 CD3-CD19+ 淋巴细胞。对于浆细胞,先进行前向散射面积与侧向散射面积点图,然后再进行单个细胞选择。然后,将 CD19+ 细胞门控为 B 细胞谱系,将 CD20-CD38 bright 定义为浆细胞。(B)B 谱系主要成熟阶段的门控策略。从 CD19+CD20+ B 细胞开始,选择过渡 B 淋巴细胞作为 CD27-CD10+ 细胞。在侧向散射面积与 CD27 点图中选择了 CD27+ 和 CD27- 细胞。从 CD27- 亚群中,我们在 IgD 与 IgM 图中鉴定了幼稚(IgD+IgM- 或 IgD+IgM+)和 IgD-IgM- 亚群;从 CD27+ 亚群和相同的 IgD 与 IgM 图中,我们鉴定了未切换记忆(IgD+IgM+)、仅 IgM 记忆(IgD-IgM+)和类别切换记忆(IgD-IgM-)亚群。 (C) 循环 Tfh 淋巴细胞的门控策略。通过 CXCR5 和 PD-1 的双阳性染色从 CD4+ T 细胞中筛选出循环 Tfh 淋巴细胞。分析该群体的 CCR7 表达情况。

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