描述 EIF2AK2 激酶检测试剂盒旨在测量 EIF2AK2(真核翻译起始因子 2 α 激酶 2)激酶活性,以使用 ADP-Glo™ 作为检测试剂进行筛选和分析应用。该检测试剂盒采用方便的 96 孔格式,含有足够的纯化重组 EIF2AK2 激酶(氨基酸 252 端)、激酶底物、ATP 和激酶检测缓冲液,可用于 100 次酶反应。背景 EIF2AK2(真核翻译起始因子 2 α 激酶 2,也称为 PKR)是一种蛋白激酶,已证实参与 HIV/gp120 相关神经变性。1 EIF2AK2 是 gp120 神经毒性的关键介质,也是对各种形式的环境压力作出反应的蛋白激酶家族的底物。EIF2AK2 在 mRNA 翻译、细胞增殖和细胞凋亡中起着关键作用。 EIF2AK 和 p53 之间的新型串扰可能对细胞增殖和肿瘤发生有影响。应用
资格设置和结果 为了在 NGS STARlet 上对 Oxford Nanopore SQK-LSK114-XL V14 V1.0 方法进行生物学验证,对 8 个(4 个阳性样本 + 4 个阴性对照)或 24 个样本(22 个阳性样本 + 2 个阴性对照)进行了生物学运行。作为输入材料,1 μg 全长(48 kB)噬菌体 Lambda DNA 用于 8 个样本的运行。对于 24 个样本的运行,1 μg 剪切(9kB)人类基因组 DNA 作为输入材料。使用 Thermo Fisher Scientific Qubit 4 荧光计和 Quant-iT™ 1X dsDNA 高灵敏度检测试剂盒(Thermo Fisher Scientific,#Q33232)测定从 8 个和 24 个样本的生物学验证运行中获得的文库的 DNA 浓度。平均样品产量为 344.3 ng(+/- 51.5 ng)
资格设置和结果 为了在 NGS STARlet 上对 Oxford Nanopore SQK-LSK114-XL V14 V1.0 方法进行生物学验证,对 8 个(4 个阳性样本 + 4 个阴性对照)或 24 个样本(22 个阳性样本 + 2 个阴性对照)进行了生物学运行。作为输入材料,1 μg 全长(48 kB)噬菌体 Lambda DNA 用于 8 个样本的运行。对于 24 个样本的运行,1 μg 剪切(9kB)人类基因组 DNA 作为输入材料。使用 Thermo Fisher Scientific Qubit 4 荧光计和 Quant-iT™ 1X dsDNA 高灵敏度检测试剂盒(Thermo Fisher Scientific,#Q33232)测定从 8 个和 24 个样本的生物学验证运行中获得的文库的 DNA 浓度。平均样品产量为 344.3 ng(+/- 51.5 ng)
图 1:检测原理说明。血管紧张素 II 肽被 ACE2 裂解后释放出 L-苯丙氨酸,可通过两步反应和荧光产物检测进行测量。荧光信号与 ACE2 活性成正比增加。注意:如需更高灵敏度的检测,请参阅 Fluoro-Verse™ ACE2 抑制剂检测试剂盒 (#78847)。背景血管紧张素转换酶 2 (ACE2) 是一种外肽酶,可催化血管紧张素 II 转化为血管紧张素 1-7 和 L-苯丙氨酸。血管紧张素 II 是经典肾素血管紧张素系统 (RAS) 的一部分,这是一种调节体液平衡、血压和维持血管张力的激素系统。ACE2 在降低血压和心血管健康方面发挥作用,因此是一个有吸引力的治疗靶点。 ACE2 也是人类呼吸道冠状病毒 NL63、SARS (SARS-CoV) 和 2019-nCoV/SARS- CoV-2 的受体。应用酶动力学和高通量筛选 (HTS) 应用中的小分子抑制剂筛选。提供的材料
图 1:PDE4C1 检测试剂盒原理图解。该检测使用荧光素标记的环状鸟苷酸(PDE4C1 为 cAMP-FAM),其中磷酸基团与环状核苷酸结合。这是一种旋转速度快(低 FP)的非常小的分子。PDE4C1 催化环状核苷酸中磷酸二酯键的水解并释放磷酸基团。在第二步中,游离磷酸基团被特定的磷酸结合纳米珠(结合剂)识别,从而形成大型复合物,运动受限(高 FP)。FP 与 PDE4C1 活性成正比。该检测需要荧光微孔板读数仪,该读数仪能够测量荧光偏振 (FP),并配备读取 FP 信号所需的部件。有关 FP 技术的更多信息,请访问我们的技术说明:FP、检测原理和应用。注意:截至 2025 年 1 月,此协议已重新优化性能。可根据要求提供此试剂盒的早期版本。背景磷酸二酯酶 (PDE) 通过水解第二信使 cAMP (环磷酸腺苷) 和 cGMP (环磷酸鸟苷) 信号,在动态调节这些信号传导中起重要作用。PDE 超家族由 11 个家族组成,其中 PDE4、7 和 8 是 cAMP 特异性水解酶,因此可调节对其的正向和负向反应。PDE4 是心血管组织中第二丰富的 PDE。PDE4 是一种 cAMP 特异性 PDE,也是最大的 PDE 亚家族,具有超过 35 种不同的同工型,因此也是特征最广泛的 PDE 同工酶。它是大多数炎症细胞和气道平滑肌中的主要同工酶,与炎症性气道疾病有关。PDE4 抑制剂罗氟司特已被批准用于治疗慢性阻塞性肺病 (COPD)。
费用负担责任人:宫城县警察会计官 细田正 1. 签约责任人姓名等费用负担责任人:宫城县警察会计官 细田正 2. 招标项目 (1)采购项目及数量:购买 DNA 分型试剂一套的年度单价合同(数量按照规格书计算) (2)交货期限:2025 年 4 月 1 日至 2026 年 3 月 31 日 (3)交货地点:宫城县宫城郡利府町守子冢崎 3-1 宫城县警察科学侦查实验室 (4)投标方式:投标金额为各项目的计划数量乘以合同单价计算出的总价格。在确定中标人时,中标价格为投标文件中载明的金额加上该金额的10%(如果该金额有不足1日元的小数部分,则小数部分四舍五入)。因此,无论投标人是消费税的应税商业实体还是免税商业实体,投标人都必须在投标文件中载明相当于预计合同金额的110/100的金额。 3.参加投标人员应具备的资格条件: (1) 不属于《主计法》第七十条规定情形的人员。 (二)不属于预算会计审计法第七十一条规定情形的。 (3) 2022年度、2023年度、2024年度,内阁府招标投标资格认定(各省厅统一资格认定)“货物销售”类别中,须获得A、B、C或D级评价。 (4)该人目前没有受到合同官员或其他类似人员的交易暂停。 (5) 不是作为经营者或者相当于经营者,且其经营管理实质上由黑社会组织或黑社会组织成员控制的人,受到警察机关要求排除公务经营等行为的人,并且该身份持续存在的人。 4.投标文件递交地点等(1)投标文件递交地点、合同条款地点、投标文件交付地点及联系方式:〒980-8410 宫城县仙台市青叶区本町3-8-1
4. 14,000 × g 离心 2 分钟,转移 500 ul 上清液到新的 2 ml 离心管,加入 500 μL Buffer AL 和 600 μL 异丙醇和 15 µL MB Mix ,室温
PANDNA试剂盒包含3个洗涤缓冲液(CW1,CW2和PW1),以提取各种样品类型。CBB套件仅包含2个洗涤缓冲液(CW1和CW2)。缓冲CW1,CW2和PW1作为浓缩物提供。CW1和CW2的最终乙醇浓度使用60%。PW1最终乙醇浓度使用70%。在使用之前,如瓶子上所示,将适当的乙醇量(96-100%)添加到缓冲液CW1,CW2和PW1中。注意:并非所有缓冲区都在每个过程中使用。