GF-1 DNA/RNA 提取试剂盒适用于提取和纯化各式不同样品的 DNA/RNA 。 GF-1 试剂盒最主要的 GF-1 硅胶膜离 心柱能在高盐缓冲液的裂解帮助下有效地离心吸附 DNA/RNA 。硅胶膜离心柱法以及洗涤缓冲液可去除残余蛋 白质和各种杂质,让吸附在离心柱的 DNA/RNA 更进一步地被纯化。最后通过洗脱液把 DNA/RNA 洗脱下来。提 取的 DNA/RNA 可用在各种不同的后续实验。
适用于基于磁转移技术的 32 位或 96 位核酸提取仪。如 BIO-DL 32 , TIANGEN TGuide S32 , TIANLONG NP968-C ,
4. 14,000 × g 离心 2 分钟,转移 500 ul 上清液到新的 2 ml 离心管,加入 500 μL Buffer AL 和 600 μL 异丙醇和 15 µL MB Mix ,室温
8001001 ),旋涡振荡 30 秒混匀,室温静置 5 分钟后再进入步骤 3 的操作。 3. 加入 15 ml Buffer L7 ,盖紧管盖,用力上下摇晃混合均匀。 4. 加入 8 ml Buffer EX ,盖紧管盖,用力上下摇晃混合均匀。≥ 12,000 g 离心 5 分钟。 5. 在一个洁净的 50 ml 离心管中加入 8 ml 异丙醇备用。 6. 吸取步骤 4 中的所有离心上清液(约 25 ml )转移到步骤 5 备用的 50 ml 离心管 中,盖紧管盖,混匀上清液和异丙醇。
CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats) 是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其 他外源 DNA 的免疫机制。在该机制中, Cas 蛋白( CRISP‐associated protein )含有两个核酸酶结构域,可以 分别切割两条 DNA 链。一旦与 crRNA ( CRISPR RNA )和 tracrRNA 结合形成复合物, Cas 蛋白中的核酸酶即 可对与复合物结合的 DNA 进行切割。切割后 DNA 双链断裂从而使入侵的外源 DNA 降解。
商标:GeneCopoeia™、OmicsLink™、Secrete-Pair™、GLuc-ON™、miTarget™、Fast-Fusion™(GeneCopoeia Inc)。FF006-091224
5'-tcctaggtataAtaTaCtaAgtaAgcagggGACTAACATGTGGTGGTTTTTTAGAGCTAGAAATAGC-3'
内容数量/容量储存温度蛋白酶 250µl -20°C 蛋白酶缓冲液 5ml RT 裂解缓冲液 20ml RT 沉淀缓冲液 15ml RT 洗涤缓冲液 2×50ml RT 溶剂缓冲液 2×1250µl RT 描述易于使用的 DNP TM 试剂盒用于从人或动物来源中分离双链 DNA。该过程需要 35-55 分钟,不需要在过程中进行苯酚提取或换管。DNA 分离基于细胞裂解和随后的选择性 DNA 沉淀。最后,用洗涤缓冲液洗涤和脱盐不溶性 DNA。通过这种方法获得的 DNA 可用于所有分子生物学程序(PCR、限制性消化、克隆、Southern 印迹、DNA 测序等)。
我们强烈建议您在使用靶向特异性多向导 sgRNA 之前,先使用特定细胞类型的阳性对照优化转染条件。为了优化人类细胞系的条件,EditCo 提供了转染优化试剂盒,其中包含靶向人类 TRAC 的阳性对照多向导 sgRNA。对于小鼠细胞系,我们建议使用靶向小鼠 Rosa26 的阳性对照单向导 sgRNA 来优化您的条件(请参阅第 2 页所需的其他材料)。我们建议为您的基因组编辑实验形成核糖核蛋白 (RNP) 复合物,以最大限度地提高编辑效率并减少脱靶效应。选择 EditCo 的电穿孔、脂质转染或核转染方案与此试剂盒一起使用。所有方案均可在 editco.com/resources 上找到。