将色谱柱放入干净的微量离心管中。将30-50µL洗脱缓冲液,TE缓冲液或无菌水直接加到柱膜上,并站立2分钟。对于大于8KB的DNA片段,在65°C -70°C下使用预热的洗脱缓冲液,以提高洗脱效率。在10,000 x g处离心1分钟以洗脱DNA。将DNA存储在4°C或-20°C下。对于较高的产率,在50µL中洗脱DNA,为更高的浓度,以较小体积的DNA(即:30µL)洗脱DNA。但是,产量将略有降低。确保洗脱缓冲液直接分配到膜的中心,以完全洗脱。te缓冲液也可以洗脱DNA。如果用水用于洗脱DNA,则最大洗脱效率在PH7.0和8.5之间。将DNA存储在-20°C时,DNA可能在没有缓冲剂的情况下会降解。
描述:PRMT1 化学发光检测试剂盒旨在测量 PRMT1 活性,用于筛选和分析应用。PRMT1 化学发光检测试剂盒采用方便的形式,8 孔试纸条预涂有组蛋白 H4 肽底物、针对组蛋白 H4 甲基化精氨酸残基的抗体、HRP 标记的二抗、S-腺苷甲硫氨酸、甲基转移酶检测缓冲液和纯化的 PRMT1 酶,可进行 96 种酶反应。PRMT1 化学发光检测试剂盒的关键是一种高度特异性的抗体,可识别组蛋白 H4 甲基化的 R3 残基。使用此试剂盒,只需三个简单的步骤即可检测甲基转移酶。首先,将 S-腺苷甲硫氨酸与含有检测缓冲液和甲基转移酶的样品一起孵育。接下来,添加一抗。最后,用 HRP 标记的二抗处理试纸条,然后添加 ELISA ECL 底物以产生化学发光,然后可以使用化学发光读数仪进行测量。组件:
现已明确,环氧合酶有两种不同的亚型。COX-1 在多种细胞类型中组成性表达,并参与正常细胞稳态。各种有丝分裂刺激物(如佛波醇酯、脂多糖和细胞因子)可诱导第二种 COX 亚型 COX-2 的表达。COX-2 负责急性炎症条件下前列腺素的生物合成。3 这种可诱导的 COX-2 被认为是非甾体抗炎药抗炎活性的靶酶。
组分 24 次反应 48 次反应 P-2014-24 P-2014-48 CP1(洗涤缓冲液) 28 ml 2 x 28 ml CP2(抗体缓冲液) 15 ml 30 ml CP3C(5X 裂解缓冲液 I) 12 ml 24 ml CP3D(裂解缓冲液 II) 3 ml 6 ml CP3E(裂解缓冲液 III) 2 ml 4 ml CP3F(裂解缓冲液 IV) 1.5 ml 5 ml CP4(ChIP 稀释缓冲液) 2 ml 6 ml CP5(DNA 释放缓冲液) 2 ml 2 x 2 ml CP6(反向缓冲液) 2 ml 2 x 2 ml CP7(结合缓冲液) 5 ml 8 ml CP8(洗脱缓冲液) 0.6 ml 1.2 ml 蛋白酶抑制剂混合物 (100X)* 25 µl 50 µl 非免疫 IgG (1 mg/ml)* 10 µl 10 µl 抗二甲基 H3-K9 (1 mg/ml)* 5 µl 8 µl 蛋白酶 K (10 mg/ml)* 25 µl 50 µl 8 孔检测条(带框架) 3 6 8 孔条盖 3 6 F-Spin Column 30 50 F-Collection Tube 30 50 * 使用前将溶液旋至底部。 运输和储存
图 1. 有效去除宿主基因组 DNA,且不降低噬菌体 DNA 产量。使用 Norgen 的噬菌体 DNA 分离试剂盒从四种富集噬菌体培养物中分离总 DNA。在添加提供的裂解缓冲液之前进行 DNase I 预处理。简而言之,将 20 单位 DNase I 添加到 1 mL 富集噬菌体培养物中,并将混合物在室温下孵育 20 分钟。DNAase I 处理后,遵循该程序。作为对照,使用 Norgen 的噬菌体 DNA 分离试剂盒从相同 4 种培养物的等分试样中分离 DNA,而不进行 DNase I 处理。对于 DNA 分析,将每 50 µL 洗脱液中的 10 µL 上样到 1X TAE 琼脂糖凝胶上。可以看出,噬菌体 DNA 被其外壳蛋白安全地保护起来,免受 DNase I 处理的影响,而宿主基因组 DNA 则被 DNase I 有效降解。因此,DNase I 预处理导致最终噬菌体洗脱中宿主 gDNA 污染较少,而不会影响总噬菌体 DNA 产量。M 号泳道为 Norgen 的 Highranger 1 kb DNA Ladder(货号 11900)。
用途:EpiNext™ CUT&LUNCH 检测试剂盒是一套完整的优化试剂,旨在快速从细胞中直接富集蛋白质(组蛋白或强结合转录因子)特异性 DNA 复合物,以通过 qPCR 或使用 Illumina 平台的下一代测序分析蛋白质与 DNA 之间的相互作用。起始材料:起始材料可以包括各种哺乳动物细胞样本,例如来自烧瓶或培养皿的培养细胞、原代细胞或从血液、体液、新鲜/冷冻组织中分离的稀有细胞群,以及从整个细胞群和胚胎细胞中分选的特定细胞等。细胞输入量:每个反应的细胞量可以是 2 x 10 3 到 5 x 10 5 个细胞。为了获得最佳制备效果,细胞输入量应为 2 x 10 5 ,尽管只需 500 个细胞即可获得修饰组蛋白的结果。抗体:抗体应为 ChIP 级,以识别与 DNA 或其他蛋白质结合的蛋白质。如果您使用的抗体尚未经过 ChIP 验证,则应使用适当的对照抗体(例如抗 RNA 聚合酶 II、抗 H3K4me3 或抗 H3K9me3)来证明这些抗体适合 ChIP。
图 1. 有效去除宿主基因组 DNA,同时不降低噬菌体 DNA 产量。使用 Norgen 的噬菌体 DNA 分离试剂盒从四种富集噬菌体培养物中分离总 DNA。在添加提供的裂解缓冲液之前进行 DNase I 预处理。简而言之,将 20 单位 DNase I 添加到 1 mL 富集噬菌体培养物中,并将混合物在室温下孵育 20 分钟。DNAase I 处理后,按照程序进行。作为对照,使用 Norgen 的噬菌体 DNA 分离试剂盒从相同 4 种培养物的等分试样中分离 DNA,而无需进行 DNase I 处理。对于 DNA 分析,将每 50 µL 洗脱液中的 10 µL 上样到 1X TAE 琼脂糖凝胶上。可以看出,噬菌体 DNA 被其外壳蛋白安全地保护起来,免受 DNase I 处理的影响,而宿主基因组 DNA 则被 DNase I 有效降解。因此,DNase I 预处理导致最终噬菌体洗脱中宿主 gDNA 污染较少,而不会影响总噬菌体 DNA 产量。M 号泳道为 Norgen 的 Highranger 1 kb DNA Ladder(货号 11900)
其他培养基类型 对于特定解决方案,可能需要使用替代培养基类型来隔离可能损害系统的利基细菌。以下是针对此类细菌经常要求使用的一些其他培养基类型: • SRB - 改良 Postgate B (MPB) • SRB - 美国石油协会 (API) • 硫代硫酸盐还原菌 (TRB) • 普通厌氧菌 (GAN) • 兼性和专性厌氧菌硫代乙醇酸盐 (TGC) • 硝酸盐还原菌* (NRB) • 硝酸盐还原硫化物氧化菌 (NRSOB) • 亚硝酸盐还原菌* (NiRB) • 亚硝酸盐氧化菌 (NOB) • 铁氧化菌 (IOB) • 石油降解菌 (ODB)
迷你电影制造商一个负担得起且紧凑的单元,适用于少量供应量的轻型应用。包括加热的柏拉图,压力机以及将聚合物样品融化为可重复的膜所需的一切,并使用您的Thermo Scientific FTIR光谱仪分析它们。允许对添加剂和其他聚合物特性进行定量分析,包括共聚物中的结晶度和单体比。紧凑型尺寸几乎可以在任何桌面或实验室长凳上使用,并且能够加热高达250°C。胶片可以按至50、100、250和500微米的厚度,并安装在随附的10毫米光圈采样卡中以进行传输分析归档。
Roboprep®96使DNA和RNA提取变得容易,与手动方法相比,动手时间大大减少。这使您可以优化日常工作,从而为其他有价值的实验室任务提供时间。您可以执行最多96个样本的自动提取。通过使用磁珠技术,结合加热块,样品裂解和洗脱的效率得到了提高。结果是高度纯化的核酸,不含抑制性成分,可以直接在实时PCR分析中使用。